細(xì)胞特性：

1)】組織來源于實驗動物的正常眼組織,。

2)細(xì)胞鑒定：細(xì)胞免疫熒光染色為陽性。

3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%,。

4)不含有 HIV-1,、 HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌,。

5)細(xì)胞生長方式：上皮樣,，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng),。
產(chǎn)品名稱：大鼠滑膜細(xì)胞*培養(yǎng)基

規(guī)格：100mL/125mL×4
貨號：YS-02X10192

細(xì)胞生長實驗 ：細(xì)胞生長良好,，形態(tài)正常

儲存條件：2℃-8℃，避光儲存

運輸條件：冰袋冷藏運輸
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1） 準(zhǔn)備RPMI-1640 培養(yǎng)基,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%；Glutamax（invitrogen 35050061）,，1%,；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070）,，1%；雙抗,，1%,。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳，5%,。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%血清,，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配。

二． 細(xì)胞處理：

1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

注意事項：

（1）凍存前細(xì)胞狀態(tài)，細(xì)胞最好在對數(shù)生長期,，細(xì)胞密度適合,，剛剛發(fā)生細(xì)胞融合，過密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好,，而且消化時不容易分散,；

（2）凍存的密度不宜過低，10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好,，我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107）,，一瓶凍一管（1.5ml凍存管），10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個細(xì)胞）分成兩管,。

（3）消化和吹打,，切忌胰酶消化過度，吹打不可太用力,，最好不要吹出好多泡泡,。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦,，不是加入凍存液再吹打。

（4）離心后加入凍存液,。凍存液中FBS的用量對于細(xì)胞而言要求不是很嚴(yán)格,，我從10%-90%都用過，問題不大,，個人認(rèn)為10%-20%可以了,，能節(jié)約處就節(jié)約點嘛！另外,，凍存液可以在處理細(xì)胞前配置,，放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸,，移入凍存管,。

（5）關(guān)于“慢凍"，傳統(tǒng)的方法,，細(xì)胞凍存管用棉花包好,，4度2h，-20度2h或更長,，-80度過夜,，最后液氮。對于條件較好的實驗室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實驗室,，推薦使用程序降溫盒,，內(nèi)裝異丙醇，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,，很方便,，省了包棉花、4度,、-20度了,。

使用步驟：

一）準(zhǔn)確稱量試劑：根據(jù)不同的菌類和用途，選擇適宜的培養(yǎng)基,，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈,。

（二）校正pH值：將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi)，標(biāo)記劃線,，加熱溶解,，補(bǔ)充水分，測定酸堿度,，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計測定,。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi)。

（三）過濾：將玻璃漏斗置鐵架上，再用紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,，將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明,。

（四）分裝：將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(nèi)（試管內(nèi)每支裝5mL；三角瓶中裝100～150ml）,，塞好棉塞用牛皮紙包扎好,，準(zhǔn)備滅菌。

（五）滅菌：培養(yǎng)基的滅菌,，常用高壓蒸汽滅菌法,。一般微生物的營養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死，但細(xì)菌的芽胞有較強(qiáng)的抗熱性,，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到*滅菌的目的,。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理，即壓力越大,，蒸汽溫度就越高。因此,，在同一溫度條件下,，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下,，菌體吸收水分后,，其蛋白質(zhì)易于凝固變性，因為蒸汽的穿透力強(qiáng),，殺菌效果好,。

TAb ELISA Kit 大鼠甲狀腺素抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

 VTG 魚、青鳉魚卵黃蛋白原抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh GADD34 生長抑制DNA損傷基因34抗體 規(guī)格 0.1ml

CD19(Rat Troponin T) ELISA Kit 小鼠CD19分子 96T

NG2 英文名稱： 黑色素瘤軟骨素蛋白多糖抗體 0.1ml

phospho-Aconitase 1 (Ser711) 英文名稱： 磷酸化鐵調(diào)節(jié)蛋白1抗體 0.1ml

 VTG 魚,、青鳉魚卵黃蛋白原抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

VCAM-1 小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞間粘附因子-1Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

 phospho-FANCD2(Ser222) 磷酸化FANCD2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh Mouse  rat IgG/Gold 膠體金標(biāo)記的小鼠抗大鼠IgG 規(guī)格 2ml

5-HIAA(Human 5-hydroxyindolacetic acid) ELISA Kit 人5羥基吲哚乙酸 96T

Separase 英文名稱： 外紡錘體極樣蛋白1抗體 0.1ml

C20orf194 英文名稱： 20號染色體開放閱讀框194抗體 0.2ml

 phospho-FANCD2(Ser222) 磷酸化FANCD2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Mouse  human IgG/Cy5 Cy5標(biāo)記的小鼠抗人IgG 0.1ml

gamma C Crystallin 英文名稱： 晶狀體球蛋白γ3/γC-crystallin/白內(nèi)障相關(guān)蛋白抗體 0.2ml

血管緊張素Ⅱ受體抗體  Angiotensin II receptor 0.2ml

 Nebulin/FITC 熒光素標(biāo)記伴肌動蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh PRODH 脯脫氫酶抗體 規(guī)格 0.2ml

 VEGF/RBITC 羅丹明標(biāo)記VEGF抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
大鼠滑膜細(xì)胞*培養(yǎng)基組織糖原磷酸化酶酶（GLYCOGEN PHOSPHORYLASE KINASE）活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒10次3,，5-二甲基-3-己醇

純化溶酶體酸性磷酸酶活性比色法定量檢測試劑盒20次十烷

細(xì)胞溶酶體型酸性磷酸酶活性熒光定量檢測試劑盒20次氧化鎂

組織溶酶體型酸性磷酸酶活性熒光定量檢測試劑盒20次土貝母苷甲

純化溶酶體酸性磷酸酶活性熒光定量檢測試劑盒20次竹節(jié)參皂苷ⅠVa （暫行）

細(xì)胞鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶（CALCINEURIN；PP2B）活性定磷比色法定量檢測試劑盒20次萎陵菜

組織鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶（CALCINEURIN,；PP2B）活性定磷比色法定量檢測試劑盒20次槲寄生

細(xì)胞蛋白磷酸酶2A（ PP2A）活性比色法定量檢測試劑盒20次芡實

（10個樣本）鹽酸羅通定

組織蛋白磷酸酶2A （PP2A）活性比色法定量檢測試劑盒20次倍他環(huán)糊精

（10個樣本）卡巴膽堿

細(xì)胞鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶（CALCINEURIN,；PP2B）活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒20次鹽酸美司坦

組織鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶（CALCINEURIN；PP2B）活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒20次洛伐他汀

細(xì)胞蛋白磷酸酶2A（ PP2A）活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒20次鹽酸左西替利嗪

組織蛋白磷酸酶2A （PP2A）活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒20次人肽釋放酶8(KLK 8)Elisa測定試劑盒