產(chǎn)品名稱(chēng)：大鼠牙乳頭細(xì)胞*培養(yǎng)基

規(guī)格：100mL/125mL×4
貨號(hào)：YS-02X10234

細(xì)胞生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn) ：細(xì)胞生長(zhǎng)良好,，形態(tài)正常

儲(chǔ)存條件：2℃-8℃，避光儲(chǔ)存

運(yùn)輸條件：冰袋冷藏運(yùn)輸
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞特性：

1)】組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常眼組織,。

2)細(xì)胞鑒定：細(xì)胞免疫熒光染色為陽(yáng)性,。

3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%,。

4)不含有 HIV-1、 HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌。

5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式：上皮樣,，不規(guī)則細(xì)胞,，貼壁培養(yǎng)。

細(xì)胞培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1） 準(zhǔn)備RPMI-1640 培養(yǎng)基,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%；Glutamax（invitrogen 35050061）,，1%,；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070），1%,；雙抗，1%,。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%；二氧化碳,，5%,。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。

3） 凍存液：90%血清,，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配,。

二． 細(xì)胞處理：

1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

注意事項(xiàng)：

（1）凍存前細(xì)胞狀態(tài),，細(xì)胞最好在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,，細(xì)胞密度適合,，剛剛發(fā)生細(xì)胞融合，過(guò)密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好,，而且消化時(shí)不容易分散,；

（2）凍存的密度不宜過(guò)低，10的6次方-7次方的數(shù)量級(jí)比較好,，我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107）,，一瓶?jī)鲆还埽?.5ml凍存管），10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個(gè)細(xì)胞）分成兩管,。

（3）消化和吹打,，切忌胰酶消化過(guò)度，吹打不可太用力,，最好不要吹出好多泡泡,。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦，不是加入凍存液再吹打,。

（4）離心后加入凍存液,。凍存液中FBS的用量對(duì)于細(xì)胞而言要求不是很?chē)?yán)格，我從10%-90%都用過(guò),，問(wèn)題不大,，個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了，能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛,！另外,，凍存液可以在處理細(xì)胞前配置，放在4度冰箱預(yù)冷,。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸,，移入凍存管。

（5）關(guān)于“慢凍",，傳統(tǒng)的方法,，細(xì)胞凍存管用棉花包好，4度2h,，-20度2h或更長(zhǎng),，-80度過(guò)夜，最后液氮,。對(duì)于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室,，推薦使用程序降溫盒，內(nèi)裝異丙醇,，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,，很方便，省了包棉花,、4度,、-20度了,。

Nebulin/FITC 熒光素標(biāo)記伴肌動(dòng)蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

 VEGF/RBITC 羅丹明標(biāo)記VEGF抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

血管緊張素Ⅱ受體抗體  Angiotensin II receptor 0.2ml

Mouse  human IgG/Cy5 Cy5標(biāo)記的小鼠抗人IgG 0.1ml

gamma C Crystallin 英文名稱(chēng)： 晶狀體球蛋白γ3/γC-crystallin/白內(nèi)障相關(guān)蛋白抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh PRODH 脯脫氫酶抗體 規(guī)格 0.2ml

 VEGF/RBITC 羅丹明標(biāo)記VEGF抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Emap-2 大鼠內(nèi)皮單核細(xì)胞活化多肽2Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

 envelope glycoprotein (Yellow fever virus) 黃熱病毒包膜糖蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh MURF3 肌肉特異性環(huán)指蛋白3抗體 規(guī)格 0.2ml

HbCO(Human carboxyhemoglobin) ELISA Kit 人一氧化碳血紅蛋白 96T

Salmonella enteritidis 英文名稱(chēng)： 腸炎沙門(mén)氏菌抗體 0.2ml

CARD7 英文名稱(chēng)： 凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白7抗體 0.1ml

 envelope glycoprotein (Yellow fever virus) 黃熱病毒包膜糖蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Mouse  rabbit IgG/PE PE標(biāo)記的小鼠抗兔IgG 0.1ml

Galactocerebroside 英文名稱(chēng)： 半乳糖腦苷脂酶抗體 0.1ml

血管緊張素1轉(zhuǎn)換酶抑制劑抗體  ACEI 0.1ml

 mucin4/Muc4/FITC 熒光素標(biāo)記粘蛋白-4抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh PRRSV-GP5 豬藍(lán)耳病病毒GP5蛋白抗體 規(guī)格 1ml

 ULBP1/N2DL1/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大,、小鼠UL16結(jié)合蛋白1蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
大鼠牙乳頭細(xì)胞*培養(yǎng)基細(xì)胞花生烯酸（arachidonic acid）高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒20次胰島素（豬）

組織花生烯酸（arachidonic acid）高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒20次甲萘醌

白三烯A4（Leukotriene A4 ,；LTA4）高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒20次哈西奈德

白三烯B4（LTB4）高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒20次鹽酸羥甲唑啉

白三烯C4（LTC4）高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒20次順式那

白三烯D4（LTD4）高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒20次大鼠Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)Elisa測(cè)定試劑盒

白三烯E4（LTE4）高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒20次半胱酸蛋白酶-10抗體流式組化

5-羥基二十烯酸（5-HETE）高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒20次白介素1-β轉(zhuǎn)化酶樣凋亡蛋白酶6抗體流式組化

12-羥基二十烯酸（12-HETE）高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒20次FOSL2抗體流式組化

15-羥基二十烯酸（15-HETE）高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒20次糖皮質(zhì)素誘導(dǎo)腫瘤壞死因子受體抗體流式組化

前列腺素H2（PGH2）高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒20次果膠酶Y-23

前列腺素E2（PGE2）高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒20次鹽酸萬(wàn)古霉素

6-KETO-PGF1a高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒20次3-吲哚丙酸鉀

前列腺素F2a（PGF2a）高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒20次脫氧核糖核酸（鯡魚(yú)精）

8-ISO-PGF2a糖原Ⅸ

使用步驟：

一）準(zhǔn)確稱(chēng)量試劑：根據(jù)不同的菌類(lèi)和用途，選擇適宜的培養(yǎng)基,，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈,。

（二）校正pH值：將稱(chēng)量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi)，標(biāo)記劃線(xiàn),，加熱溶解,，補(bǔ)充水分，測(cè)定酸堿度,，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計(jì)測(cè)定,。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi)。

（三）過(guò)濾：將玻璃漏斗置鐵架上,，再用紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,，將上述培養(yǎng)基倒入其中過(guò)濾至透明。

（四）分裝：將過(guò)濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶?jī)?nèi)（試管內(nèi)每支裝5mL,；三角瓶中裝100～150ml）,，塞好棉塞用牛皮紙包扎好，準(zhǔn)備滅菌,。

（五）滅菌：培養(yǎng)基的滅菌，常用高壓蒸汽滅菌法,。一般微生物的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死,，但細(xì)菌的芽胞有較強(qiáng)的抗熱性，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到*滅菌的目的,。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,，即壓力越大，蒸汽溫度就越高,。因此,，在同一溫度條件下，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好,。而且在濕熱情況下,，菌體吸收水分后，其蛋白質(zhì)易于凝固變性,，因?yàn)檎羝拇┩噶?qiáng),，殺菌效果好。