產(chǎn)品名稱：大鼠小腸粘膜上皮細胞*培養(yǎng)基

規(guī)格：100mL/125mL×4
貨號：YS-02X10154

細胞生長實驗 ：細胞生長良好，形態(tài)正常

儲存條件：2℃-8℃,，避光儲存

運輸條件：冰袋冷藏運輸
公司產(chǎn)品僅用于科研

細胞培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1） 準(zhǔn)備RPMI-1640 培養(yǎng)基,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%,；Glutamax（invitrogen 35050061）,，1%,；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070）,，1%,；雙抗，1%,。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%；二氧化碳,，5%,。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。

3） 凍存液：90%血清,，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配,。

二． 細胞處理：

1） 復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?50px皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度,。

2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng)。

注意事項：

（1）凍存前細胞狀態(tài),，細胞最好在對數(shù)生長期,，細胞密度適合，剛剛發(fā)生細胞融合,，過密或連成片的細胞狀態(tài)不好,，而且消化時不容易分散；

（2）凍存的密度不宜過低,，10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好,，我凍存的細胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107），一瓶凍一管（1.5ml凍存管）,，10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個細胞）分成兩管,。

（3）消化和吹打，切忌胰酶消化過度,，吹打不可太用力,，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦,，不是加入凍存液再吹打,。

（4）離心后加入凍存液,。凍存液中FBS的用量對于細胞而言要求不是很嚴(yán)格，我從10%-90%都用過,，問題不大,，個人認為10%-20%可以了，能節(jié)約處就節(jié)約點嘛,！另外,，凍存液可以在處理細胞前配置，放在4度冰箱預(yù)冷,。細胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸,，移入凍存管。

（5）關(guān)于“慢凍",，傳統(tǒng)的方法,，細胞凍存管用棉花包好，4度2h,，-20度2h或更長,，-80度過夜，最后液氮,。對于條件較好的實驗室和細胞凍存數(shù)量多的實驗室,，推薦使用程序降溫盒，內(nèi)裝異丙醇,，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,，很方便，省了包棉花,、4度,、-20度了。

使用步驟：

一）準(zhǔn)確稱量試劑：根據(jù)不同的菌類和用途,，選擇適宜的培養(yǎng)基,，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。

（二）校正pH值：將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi),，標(biāo)記劃線,，加熱溶解，補充水分,，測定酸堿度,，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計測定。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi),。

（三）過濾：將玻璃漏斗置鐵架上,，再用培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中，將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明。

（四）分裝：將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(nèi)（試管內(nèi)每支裝5mL,；三角瓶中裝100～150ml）,，塞好棉塞用牛皮紙包扎好，準(zhǔn)備滅菌,。

（五）滅菌：培養(yǎng)基的滅菌，常用高壓蒸汽滅菌法,。一般微生物的營養(yǎng)細胞在水中煮沸后即被殺死,，但細菌的芽胞有較強的抗熱性，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達到*滅菌的目的,。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,，即壓力越大，蒸汽溫度就越高,。因此,，在同一溫度條件下，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好,。而且在濕熱情況下,，菌體吸收水分后，其蛋白質(zhì)易于凝固變性,，因為蒸汽的穿透力強,，殺菌效果好。

細胞特性：

1)】組織來源于實驗動物的正常眼組織,。

2)細胞鑒定：細胞免疫熒光染色為陽性,。

3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1,、 HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌。

5)細胞生長方式：上皮樣,，不規(guī)則細胞,，貼壁培養(yǎng)。
cTn- I ELISA Kit 大鼠心肌肌鈣蛋白ⅠMulti-class antibodies規(guī)格： 48T

 WNT5A 信號通路Wnt5a抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh Gab2 接頭蛋白Gab 2抗體 規(guī)格 0.1ml

PA-IgG/M/A ELISA Kit 大鼠抗血小板抗體IgG/M/A 96T

Neuro D 英文名稱： 神經(jīng)特異性轉(zhuǎn)錄因子DPF1抗體 0.2ml

ARHGAP15 英文名稱： Rho GTP酶激活蛋白15抗體 0.2ml

 WNT5A 信號通路Wnt5a抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

IL-21 小鼠白介素-21Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

 phospho-ERK1(Thr202/Thr204)+ERK2(Thr183/Tyr185) 磷酸化原活化蛋白激酶1/2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh MTF-1 金屬應(yīng)答元件結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子-1抗體 規(guī)格 0.2ml

PC(Human plasma anticoagulant protein C) ELISA Kit 人血漿抗凝蛋白C 96T

SIRT2 英文名稱： 沉默調(diào)節(jié)相關(guān)蛋白2抗體 0.1ml

CD4 英文名稱： CD4抗體 0.1ml

 phospho-ERK1(Thr202/Thr204)+ERK2(Thr183/Tyr185) 磷酸化原活化蛋白激酶1/2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Goat  human IgG/PE-Cy7 PE-Cy7標(biāo)記的羊抗人IgG 0.1ml

GLT1D1 英文名稱： 糖基轉(zhuǎn)移酶1結(jié)構(gòu)域1抗體 0.2ml

Bcl-2同源拮抗劑Bak抗體  Bak 0.1ml

 NGB/FITC 熒光素標(biāo)記腦紅蛋白/神紅蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh PPY/Pancreatic hormone 胰腺抗體 規(guī)格 0.1ml

 Wnt1/FITC 熒光素標(biāo)記信號通路Wnt1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
大鼠小腸粘膜上皮細胞*培養(yǎng)基定量檢測試劑盒雞N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)Elisa測定試劑盒

細胞冠狀病毒3C類蛋白酶（SARS -CoV 3C-like PROTEASE）活性20次雞神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白（GFAP）Elisa測定試劑盒

熒光淬滅法定量檢測試劑盒兔半胱蛋白酶抑制劑/胱抑素C（Cys-C）Elisa測定試劑盒

組織冠狀病毒3C類蛋白酶（SARS -CoV 3C-like PROTEASE）活性20次芳香化酶/色素P450/P450抗體流式組化

熒光淬滅法定量檢測試劑盒人瘤病16型E7抗體流式組化

細胞艾滋病毒1蛋白酶（HIV-1 PROTEASE）活性熒光淬滅法20次原癌基因H-ras抗體流式組化

定量檢測試劑盒敏感脂肪酸抗體流式組化

組織艾滋病毒1蛋白酶（HIV-1 PROTEASE）活性熒光淬滅法20次蛋白酶N2抗體流式組化

定量檢測試劑盒素受體相關(guān)蛋白16抗體流式組化

細胞切割酶/β分泌酶（MENAPSIN 2,；β－SECRETASE）活性20次D-脯

熒光淬滅法定量檢測試劑盒鏈霉蛋白酶

組織切割酶/β分泌酶（MENAPSIN 2,；β－SECRETASE）活性20次5′-核苷酸酶

熒光淬滅法定量檢測試劑盒牛血清白蛋白（第五組份）

細胞蛋白酶（PROTEASE）活性比色法定量檢測試劑盒20次鹽酸林可霉素

組織蛋白酶（PROTEASE）活性比色法定量檢測試劑盒20次硫酸巴龍霉素