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所 在 地上海市
更新時(shí)間:2022-03-23 09:05:06瀏覽次數(shù):200次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 化工儀器網(wǎng)供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100mL/125mL×4 |
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貨號(hào) | YS-02X10150 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研使用 |
產(chǎn)品名稱:大鼠肝星形細(xì)胞*培養(yǎng)基
規(guī)格:100mL/125mL×4
貨號(hào):YS-02X10150
細(xì)胞生長實(shí)驗(yàn) :細(xì)胞生長良好,,形態(tài)正常
儲(chǔ)存條件:2℃-8℃,,避光儲(chǔ)存
運(yùn)輸條件:冰袋冷藏運(yùn)輸
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞特性:
1)】組織來源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常眼組織。
2)細(xì)胞鑒定:細(xì)胞免疫熒光染色為陽性,。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌。
5)細(xì)胞生長方式:上皮樣,,不規(guī)則細(xì)胞,,貼壁培養(yǎng)。
細(xì)胞培養(yǎng)步驟
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備RPMI-1640 培養(yǎng)基,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%;Glutamax(invitrogen 35050061),,1%,;Sodium pyruvate(invitrogen 11360070),1%,;雙抗,,1%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%,;二氧化碳,5%,。 溫度:37攝氏度,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,,培養(yǎng)過夜),。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
注意事項(xiàng):
(1)凍存前細(xì)胞狀態(tài),,細(xì)胞最好在對(duì)數(shù)生長期,細(xì)胞密度適合,,剛剛發(fā)生細(xì)胞融合,,過密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好,而且消化時(shí)不容易分散,;
(2)凍存的密度不宜過低,,10的6次方-7次方的數(shù)量級(jí)比較好,我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),,一瓶凍一管(1.5ml凍存管),,10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個(gè)細(xì)胞)分成兩管。
(3)消化和吹打,,切忌胰酶消化過度,,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡,。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦,,不是加入凍存液再吹打。
(4)離心后加入凍存液,。凍存液中FBS的用量對(duì)于細(xì)胞而言要求不是很嚴(yán)格,,我從10%-90%都用過,,問題不大,,個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了,能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛,!另外,,凍存液可以在處理細(xì)胞前配置,放在4度冰箱預(yù)冷,。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸,,移入凍存管。
(5)關(guān)于“慢凍",,傳統(tǒng)的方法,,細(xì)胞凍存管用棉花包好,4度2h,,-20度2h或更長,,-80度過夜,最后液氮,。對(duì)于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室,,推薦使用程序降溫盒,內(nèi)裝異丙醇,,在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,,很方便,,省了包棉花、4度,、-20度了,。
sIgA ELISA Kit 大鼠分泌型球蛋白AMulti-class antibodies規(guī)格: 48T
WRCH-1 WRCH1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh G6PD/Glucose 6 Phosphate Dehydrogenase 葡萄糖-6磷酸脫氫酶抗體 規(guī)格 0.1ml
AcSDKP ELISA Kit 大鼠N-乙酰基-絲酰-天門冬酰-賴酰-脯酸 96T
NUP160 英文名稱: 核孔蛋白NUP160抗體 0.2ml
Arginyl tRNA synthetase 英文名稱: 精酰tRNA合成酶抗體 0.2ml
WRCH-1 WRCH1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Cytochrome-C 小鼠Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Fibulin 1 “衰老關(guān)鍵蛋白"抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Mouse Rabbit IgM/AP 堿性磷酸酶(AP)標(biāo)記的小鼠抗兔IgM 規(guī)格 0.1ml
AhR(Human aryl hydrocarbon receptor) ELISA Kit 人芳香烴受體 96T
SIX2 英文名稱: 轉(zhuǎn)錄因子同源框蛋白SIX2抗體 0.2ml
CD163L1 英文名稱: CD163蛋白樣1抗體 0.1ml
Fibulin 1 “衰老關(guān)鍵蛋白"抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Goat human IgG/Bio 生標(biāo)記的羊抗人IgG 0.1ml
GALC/Galactosylceramidase 英文名稱: 半乳糖神經(jīng)酰胺酶抗體 0.2ml
Bcl-2抗體 Bcl-2 0.1ml
NGX6 /FITC 熒光素標(biāo)記鼻咽癌細(xì)胞相關(guān)基因6抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh PPP2R3 蛋白質(zhì)磷酸酶2A亞基3抗體 規(guī)格 0.2ml
WNT9A/WNT14/FITC 熒光素標(biāo)記信號(hào)通路Wnt9a抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
大鼠肝星形細(xì)胞*培養(yǎng)基組織樣品組織蛋白酶L(CATHEPSIN L)活性比色法定量檢測試劑盒20次浙貝母染料法PCR鑒定試劑盒
血液組織蛋白酶L(CATHEPSIN L)活性比色法定量檢測試劑盒20次小鼠鉤端螺旋體IgG(Lep IgG)Elisa測定試劑盒
體液組織蛋白酶L(CATHEPSIN L)活性比色法定量檢測試劑盒20次小鼠抗單核抗體(AMA)Elisa測定試劑盒
細(xì)胞組織蛋白酶K(CATHEPSIN K)活性比色法定量檢測試劑盒20次大鼠抑瘤素M(OSM)Elisa測定試劑盒
組織樣品組織蛋白酶K(CATHEPSIN K)活性比色法定量檢測試劑盒20次雞促黃體素(LH)Elisa測定試劑盒
細(xì)胞組織蛋白酶B(CATHEPSIN B)活性比色法定量檢測試劑盒20次血管緊張素Ⅱ-1型受體抗體流式組化
組織樣品組織蛋白酶B(CATHEPSIN B)活性比色法定量檢測試劑盒20次活化白粘附分子抗體流式組化
血液樣品組織蛋白酶B(CATHEPSIN B)活性比色法定量檢測試劑盒20次DNA甲基轉(zhuǎn)移酶-3α抗體流式組化
體液樣品組織蛋白酶B(CATHEPSIN B)活性比色法定量檢測試劑盒20次kappa型受體抗體流式組化
細(xì)胞組織蛋白酶D(CATHEPSIN D)活性比色法定量檢測試劑盒20次神經(jīng)纖毛蛋白-1抗體流式組化
組織樣品組織蛋白酶D(CATHEPSIN D)活性比色法定量檢測試劑盒20次“蒙"蛋白又稱“波克曼"蛋白抗體流式組化
細(xì)胞組織蛋白酶H(CATHEPSIN H)活性比色法定量檢測試劑盒20次抵抗素抗體流式組化
組織樣品組織蛋白酶H(CATHEPSIN H)活性比色法定量檢測試劑盒20次P物質(zhì)抗體流式組化
細(xì)胞組織蛋白酶C(CATHEPSIN C)活性比色法定量檢測試劑盒20次抗spindly抗體流式組化
組織樣品組織蛋白酶C(CATHEPSIN C)活性比色法定量檢測試劑盒20次炎癥負(fù)調(diào)控因子蛋白抗體流式組化
使用步驟:
一)準(zhǔn)確稱量試劑:根據(jù)不同的菌類和用途,,選擇適宜的培養(yǎng)基,,培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。
(二)校正pH值:將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi),,標(biāo)記劃線,,加熱溶解,補(bǔ)充水分,,測定酸堿度,,常用pH6.8~8.0的精密試紙或酸度計(jì)測定。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi),。
(三)過濾:將玻璃漏斗置鐵架上,,再用紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明,。
(四)分裝:將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(nèi)(試管內(nèi)每支裝5mL,;三角瓶中裝100~150ml),塞好棉塞用牛皮紙包扎好,,準(zhǔn)備滅菌,。
(五)滅菌:培養(yǎng)基的滅菌,常用高壓蒸汽滅菌法,。一般微生物的營養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死,,但細(xì)菌的芽胞有較強(qiáng)的抗熱性,須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到*滅菌的目的,。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,,即壓力越大,蒸汽溫度就越高,。因此,,在同一溫度條件下,采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好,。而且在濕熱情況下,,菌體吸收水分后,其蛋白質(zhì)易于凝固變性,,因?yàn)檎羝拇┩噶?qiáng),,殺菌效果好。
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