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產(chǎn)品型號
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廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
所 在 地上海市
更新時(shí)間:2022-03-23 09:34:05瀏覽次數(shù):274次
聯(lián)系我時(shí),,請告知來自 化工儀器網(wǎng)供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100mL/125mL×4 |
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貨號 | YS-02X10187 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研使用 |
細(xì)胞特性:
1)】組織來源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常眼組織。
2)細(xì)胞鑒定:細(xì)胞免疫熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%,。
4)不含有 HIV-1,、 HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌,。
5)細(xì)胞生長方式:上皮樣,不規(guī)則細(xì)胞,,貼壁培養(yǎng),。
產(chǎn)品名稱:大鼠大隱靜脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基
規(guī)格:100mL/125mL×4
貨號:YS-02X10187
細(xì)胞生長實(shí)驗(yàn) :細(xì)胞生長良好,形態(tài)正常
儲(chǔ)存條件:2℃-8℃,,避光儲(chǔ)存
運(yùn)輸條件:冰袋冷藏運(yùn)輸
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞培養(yǎng)步驟
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備RPMI-1640 培養(yǎng)基,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;Glutamax(invitrogen 35050061),,1%,;Sodium pyruvate(invitrogen 11360070),1%,;雙抗,1%,。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%;二氧化碳,,5%,。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3) 凍存液:90%血清,,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中,,加入約8ml培養(yǎng)基,,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
注意事項(xiàng):
(1)凍存前細(xì)胞狀態(tài),,細(xì)胞最好在對數(shù)生長期,,細(xì)胞密度適合,剛剛發(fā)生細(xì)胞融合,,過密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好,,而且消化時(shí)不容易分散;
(2)凍存的密度不宜過低,,10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好,,我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),一瓶凍一管(1.5ml凍存管),,10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個(gè)細(xì)胞)分成兩管,。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化過度,,吹打不可太用力,,最好不要吹出好多泡泡,。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦,不是加入凍存液再吹打,。
(4)離心后加入凍存液,。凍存液中FBS的用量對于細(xì)胞而言要求不是很嚴(yán)格,我從10%-90%都用過,,問題不大,,個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了,能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛,!另外,,凍存液可以在處理細(xì)胞前配置,放在4度冰箱預(yù)冷,。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸,,移入凍存管。
(5)關(guān)于“慢凍",,傳統(tǒng)的方法,,細(xì)胞凍存管用棉花包好,4度2h,,-20度2h或更長,,-80度過夜,最后液氮,。對于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室,,推薦使用程序降溫盒,內(nèi)裝異丙醇,,在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,,很方便,省了包棉花,、4度,、-20度了。
使用步驟:
一)準(zhǔn)確稱量試劑:根據(jù)不同的菌類和用途,,選擇適宜的培養(yǎng)基,,培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。
(二)校正pH值:將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi),,標(biāo)記劃線,,加熱溶解,補(bǔ)充水分,,測定酸堿度,,常用pH6.8~8.0的精密試紙或酸度計(jì)測定。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi)。
(三)過濾:將玻璃漏斗置鐵架上,,再用紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,,將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明。
(四)分裝:將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(nèi)(試管內(nèi)每支裝5mL,;三角瓶中裝100~150ml),,塞好棉塞用牛皮紙包扎好,準(zhǔn)備滅菌,。
(五)滅菌:培養(yǎng)基的滅菌,,常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死,,但細(xì)菌的芽胞有較強(qiáng)的抗熱性,須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到*滅菌的目的,。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,,即壓力越大,蒸汽溫度就越高,。因此,,在同一溫度條件下,采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好,。而且在濕熱情況下,,菌體吸收水分后,其蛋白質(zhì)易于凝固變性,,因?yàn)檎羝拇┩噶?qiáng),,殺菌效果好。
CK20(Human cytokeratin 20) ELISA Kit 人細(xì)胞角蛋白20Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
VWCE VWCE抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Miz1/ZNF60 鋅指蛋白60抗體 規(guī)格 0.2ml
PDI(Human protein disulfide isomerase) ELISA Kit 人蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶 96T
RNF156 英文名稱: 環(huán)指蛋白156抗體 0.2ml
CHD6 英文名稱: ATP依賴的解旋酶CHD6抗體 0.1ml
VWCE VWCE抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
SCF 大鼠干細(xì)胞因子Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
ELAVL1/HuR ELAVL1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh MYBBP1A/p53 activated protein 2 p53激活蛋白2抗體 規(guī)格 0.2ml
Human Fibrin ELISA Kit 人纖維蛋白 96T
Serine carboxypeptidase 1 英文名稱: 絲酸羧肽酶1抗體 0.2ml
C21ORF13 英文名稱: 21號染色體開放閱讀框13抗體 0.2ml
ELAVL1/HuR ELAVL1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Mouse human IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標(biāo)記的小鼠抗人IgG 0.1ml
GALNS 英文名稱: 軟骨素裂解酶抗體 0.2ml
膜粘連蛋白-2抗體 Annexin II 0.2ml
Ephrin B (phospho Tyr298) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人,、大,、小鼠磷酸化Ephrin B抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh PRMT5 組蛋白精甲基轉(zhuǎn)移酶5抗體 規(guī)格 0.2ml
SV2A/FITC 熒光素標(biāo)記突觸泡蛋白2A抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
大鼠大隱靜脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基細(xì)胞FYNT酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次羥甲酯鈉(布洛芬雜質(zhì)C)
組織FYNT酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次阿佐塞米
細(xì)胞HCK酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次人胞漿型磷脂酶A2(cPLA2)Elisa測定試劑盒
組織HCK酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次冬蟲夏草LAMP鑒定試劑盒
細(xì)胞IGF-1R酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次花椒探針法PCR鑒定試劑盒
組織IGF-1R酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次皂角染料法PCR鑒定試劑盒
細(xì)胞INSULIN R酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次小鼠抗內(nèi)皮抗體(AECA)Elisa測定試劑盒
組織INSULIN R酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次小鼠白介素8(IL-8/CXCL8)Elisa測定試劑盒
細(xì)胞ITK酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次小鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)Elisa測定試劑盒
組織ITK酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次大鼠皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CORT)Elisa測定試劑盒
細(xì)胞JAK3酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次豬雌二醇(E2)Elisa測定試劑盒
組織JAK3酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次雞C反應(yīng)蛋白(CRP)Elisa測定試劑盒
細(xì)胞LCK酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次雞白介素17(IL-17)Elisa測定試劑盒
組織LCK酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次兔子血小板因子4(PF-4/CXCL4)Elisa測定試劑盒
細(xì)胞LYNA酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次兔骨橋素(OPN)Elisa測定試劑盒
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