產(chǎn)品名稱：小鼠卵巢上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基

規(guī)格：100mL/125mL×4
貨號：YS-02X10287

細(xì)胞生長實驗 ：細(xì)胞生長良好,，形態(tài)正常

儲存條件：2℃-8℃,，避光儲存

運輸條件：冰袋冷藏運輸
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1） 準(zhǔn)備RPMI-1640 培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%,；Glutamax（invitrogen 35050061），1%,；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070）,，1%,；雙抗，1%,。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%；二氧化碳,，5%,。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。

3） 凍存液：90%血清,，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配,。

二． 細(xì)胞處理：

1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

注意事項：

（1）凍存前細(xì)胞狀態(tài),，細(xì)胞最好在對數(shù)生長期,，細(xì)胞密度適合，剛剛發(fā)生細(xì)胞融合,，過密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好,，而且消化時不容易分散；

（2）凍存的密度不宜過低,，10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好,，我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107），一瓶凍一管（1.5ml凍存管）,，10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個細(xì)胞）分成兩管,。

（3）消化和吹打，切忌胰酶消化過度,，吹打不可太用力,，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦，不是加入凍存液再吹打,。

（4）離心后加入凍存液,。凍存液中FBS的用量對于細(xì)胞而言要求不是很嚴(yán)格，我從10%-90%都用過,，問題不大,，個人認(rèn)為10%-20%可以了，能節(jié)約處就節(jié)約點嘛,！另外,，凍存液可以在處理細(xì)胞前配置，放在4度冰箱預(yù)冷,。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸,，移入凍存管。

（5）關(guān)于“慢凍",，傳統(tǒng)的方法,，細(xì)胞凍存管用棉花包好，4度2h,，-20度2h或更長,，-80度過夜，最后液氮,。對于條件較好的實驗室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實驗室,，推薦使用程序降溫盒，內(nèi)裝異丙醇,，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,，很方便，省了包棉花,、4度、-20度了,。

使用步驟：

一）準(zhǔn)確稱量試劑：根據(jù)不同的菌類和用途,，選擇適宜的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈,。

（二）校正pH值：將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi),，標(biāo)記劃線，加熱溶解,，補充水分,，測定酸堿度，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計測定,。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi),。

（三）過濾：將玻璃漏斗置鐵架上，再用培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中，將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明,。

（四）分裝：將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(nèi)（試管內(nèi)每支裝5mL,；三角瓶中裝100～150ml），塞好棉塞用牛皮紙包扎好,，準(zhǔn)備滅菌,。

（五）滅菌：培養(yǎng)基的滅菌，常用高壓蒸汽滅菌法,。一般微生物的營養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死,，但細(xì)菌的芽胞有較強的抗熱性，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到*滅菌的目的,。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,，即壓力越大，蒸汽溫度就越高,。因此,，在同一溫度條件下，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好,。而且在濕熱情況下,，菌體吸收水分后，其蛋白質(zhì)易于凝固變性,，因為蒸汽的穿透力強,，殺菌效果好。

細(xì)胞特性：

1)】組織來源于實驗動物的正常眼組織,。

2)細(xì)胞鑒定：細(xì)胞免疫熒光染色為陽性,。

3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1,、 HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌。

5)細(xì)胞生長方式：上皮樣,，不規(guī)則細(xì)胞,，貼壁培養(yǎng)。
MTF-1/FITC 熒光素標(biāo)記金屬反應(yīng)轉(zhuǎn)錄因子-1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

 URGCP/URG4/FITC 熒光素標(biāo)記乙型肝炎病毒X蛋白(HBxAg)抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

促腎上腺皮質(zhì)抗體  ACTH 0.1ml

Mouse  Goat IgG/APC APC標(biāo)記的小鼠抗羊IgG 0.1ml

GMPPA 英文名稱： GDP甘露糖焦磷酸化酶抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh PRPH2 外周蛋白2抗體 規(guī)格 0.2ml

 URGCP/URG4/FITC 熒光素標(biāo)記乙型肝炎病毒X蛋白(HBxAg)抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

PDGF-AB(Human Platelet-Derived Growth Factor AB) ELISA kit 人血血小板衍生生長因子ABMulti-class antibodies規(guī)格： 48T

 GLUT12/slc2a12 葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白12抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Mouse  Goat IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的小鼠抗羊IgG 規(guī)格 0.1ml

CMLC-1(Human Cardiac myosin-light chains 1) ELISA Kit 人心肌肌凝蛋白輕鏈1 96T

RPL19 英文名稱： 核糖體蛋白L19抗體 0.2ml

CWH43 英文名稱： 細(xì)胞壁合成蛋白43抗體 0.2ml

 GLUT12/slc2a12 葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白12抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Mouse  Bov IgG/AP 堿性磷酸酶(AP)標(biāo)記的小鼠抗IgG 0.1ml

GARP 英文名稱： 環(huán)磷酸鳥苷門控通道蛋白CNG4抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh AAT1/C3orf15 3號染色體開放閱讀框15抗體 規(guī)格 0.2ml

 MMP-9/FITC 熒光素標(biāo)記基質(zhì)金屬蛋白酶-9抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh PXR 孤兒核受體PAR1抗體 規(guī)格 0.2ml

 TSARG3/FITC 熒光素標(biāo)記生精細(xì)胞凋亡相關(guān)基因3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
小鼠卵巢上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基組織HHV6-B（HUMAN HERPESVIRUS 6-B）病毒定性檢測試劑盒20次鏈霉素硫酸鹽

體液HHV6-B（HUMAN HERPESVIRUS 6-B）病毒定性檢測試劑盒20次木聚糖

通用型HHV6-B（HUMAN HERPESVIRUS 6-B）病毒20次3-硝基

定量PCR擴增檢測試劑盒正丁基氯化銨

細(xì)胞HHV6-B（HUMAN HERPESVIRUS 6-B）病毒20次小茴香油

定量PCR擴增檢測試劑盒蛻皮甾酮

組織HHV6-B（HUMAN HERPESVIRUS 6-B）病毒20次氫檳榔堿

定量PCR擴增檢測試劑盒人參皂苷 Rf

體液HHV6-B（HUMAN HERPESVIRUS 6-B）病毒20次莪術(shù)二酮

定量PCR擴增檢測試劑盒巴豆苷

HHV6-B（HUMAN HERPESVIRUS 6-B）病毒2次廣草

標(biāo)準(zhǔn)曲線定量PCR擴增檢測試劑盒布美他尼

通用型HCV（HEPATITIS VIRUS C）病毒定性檢測試劑盒20次舒林酸

細(xì)胞HCV（HEPATITIS VIRUS C）病毒定性檢測試劑盒20次鹽酸喹那普利

組織HCV（HEPATITIS VIRUS C）病毒定性檢測試劑盒20次消旋鹽酸替羅非班