產(chǎn)品名稱：大鼠腎管狀上皮細胞*培養(yǎng)基

規(guī)格：100mL/125mL×4
貨號：YS-02X10181

細胞生長實驗 ：細胞生長良好,，形態(tài)正常

儲存條件：2℃-8℃，避光儲存

運輸條件：冰袋冷藏運輸
公司產(chǎn)品僅用于科研

細胞特性：

1)】組織來源于實驗動物的正常眼組織,。

2)細胞鑒定：細胞免疫熒光染色為陽性,。

3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1,、 HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌。

5)細胞生長方式：上皮樣,，不規(guī)則細胞,，貼壁培養(yǎng)。

細胞培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1） 準備RPMI-1640 培養(yǎng)基,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%；Glutamax（invitrogen 35050061）,，1%,；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070），1%,；雙抗,，1%。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳，5%,。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%血清,，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配。

二． 細胞處理：

1） 復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?50px皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并檢查細胞密度,。

2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng),。

注意事項：

（1）凍存前細胞狀態(tài),，細胞最好在對數(shù)生長期，細胞密度適合,，剛剛發(fā)生細胞融合,，過密或連成片的細胞狀態(tài)不好，而且消化時不容易分散,；

（2）凍存的密度不宜過低,，10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好，我凍存的細胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107）,，一瓶凍一管（1.5ml凍存管）,，10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個細胞）分成兩管。

（3）消化和吹打,，切忌胰酶消化過度,，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡,。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦,，不是加入凍存液再吹打。

（4）離心后加入凍存液,。凍存液中FBS的用量對于細胞而言要求不是很嚴格,，我從10%-90%都用過，問題不大,，個人認為10%-20%可以了,，能節(jié)約處就節(jié)約點嘛！另外,，凍存液可以在處理細胞前配置,，放在4度冰箱預冷。細胞離心后直接用預冷的凍存液重懸,，移入凍存管,。

（5）關(guān)于“慢凍"，傳統(tǒng)的方法，細胞凍存管用棉花包好,，4度2h,，-20度2h或更長,，-80度過夜,，最后液氮。對于條件較好的實驗室和細胞凍存數(shù)量多的實驗室,，推薦使用程序降溫盒,，內(nèi)裝異丙醇，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,，很方便,，省了包棉花、4度,、-20度了,。

Phospho-NF-κB2 p100 (Ser866/870)/FITC 熒光素標記細胞核因子/k基因結(jié)合核因子p100抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

 VWF/RBITC 紅色羅丹明標記血管假性血友病因子/血管性血友病因子抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

活化轉(zhuǎn)錄因子3抗體  ATF3 0.2ml

Goat  human IgG/PE-CY5 PE-CY5標記的羊抗人IgG 0.1ml

GPCR TGR7 英文名稱： G蛋白偶聯(lián)受體TGR7蛋白抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh PRC1 胞質(zhì)分裂調(diào)控蛋白1抗體 規(guī)格 0.1ml

 VWF/RBITC 紅色羅丹明標記血管假性血友病因子/血管性血友病因子抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

MIP-3 Beta 小鼠巨噬細胞炎性蛋白-3βMulti-class antibodies規(guī)格： 48T

 FAK 粘著斑激酶抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh MPS1/TTK 單極紡錘體蛋白激酶1抗體 規(guī)格 0.2ml

VD2(Human Vitamin D2) ELISA Kit 人D2 96T

SFRP1 英文名稱： 分泌型卷曲相關(guān)蛋白1抗體 0.1ml

C2orf68 英文名稱： 2號染色體開放閱讀框68抗體 0.2ml

 FAK 粘著斑激酶抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Mouse  human IgG/FITC FITC標記的小鼠抗人IgG 0.3ml

GALNT13 英文名稱： 多肽N-乙酰基半乳糖轉(zhuǎn)移酶13抗體 0.2ml

載脂蛋白D抗體  apoD 0.2ml

 Nestin/RBITC 紅色熒光素羅丹明(RBITC)標記巢蛋白/神經(jīng)上皮干細胞蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh PRL1/PTP4A1 肝再生磷酸酯酶1抗體 規(guī)格 0.1ml

 Phospho-FLT3 (Tyr842) /FITC 熒光素標記兔抗人,、大,、小鼠磷酸化FMS樣酪激酶3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
大鼠腎管狀上皮細胞*培養(yǎng)基細胞PKD2酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）20次雞熱休克蛋白20(HSP-20)Elisa測定試劑盒

組織PKD2酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）20次周期素E/原癌基因抗體流式組化

細胞PKG酶總活性定量檢測試劑盒（A/B/C）20次葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白94抗體流式組化

組織PKG酶總活性定量檢測試劑盒（A/B/C）20次蛋白裂解酶（一種新的癌基因）IHC WB抗體流式組化

細胞PKG-I酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）20次髓樣分化蛋白抗體流式組化

組織PKG-I酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）20次鼠抗人心肌肌凝蛋白（平滑肌）IHC WB 單抗

細胞PKG-Iα酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）20次神經(jīng)生長因子受體抗體流式組化

組織PKG-Iα酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）20次谷受體2B抗體流式組化

細胞PKG-Iβ酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）20次神經(jīng)纖毛蛋白-2抗體流式組化

組織PKG-Iβ酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）20次磷脂酸磷酸酶2C抗體流式組化

細胞PKG-II酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）20酸鈉協(xié)同轉(zhuǎn)運蛋白抗體流式組化

組織PKG-II酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）20次抗干燥癥SSB/La抗體流式組化

細胞PLK1酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）20次D-乳酸脫氫酶

組織PLK1酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）20次2′-脫氧鳥苷-5′-三磷酸鈉鹽

細胞PLK3酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）20次5-溴-2-脫氧胞苷

使用步驟：

一）準確稱量試劑：根據(jù)不同的菌類和用途,，選擇適宜的培養(yǎng)基,，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。

（二）校正pH值：將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi),，標記劃線,，加熱溶解，補充水分,，測定酸堿度,，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計測定。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi),。

（三）過濾：將玻璃漏斗置鐵架上,，再用紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中，將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明,。

（四）分裝：將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(nèi)（試管內(nèi)每支裝5mL,；三角瓶中裝100～150ml），塞好棉塞用牛皮紙包扎好,，準備滅菌,。

（五）滅菌：培養(yǎng)基的滅菌，常用高壓蒸汽滅菌法,。一般微生物的營養(yǎng)細胞在水中煮沸后即被殺死,，但細菌的芽胞有較強的抗熱性，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達到*滅菌的目的。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,，即壓力越大,，蒸汽溫度就越高。因此,，在同一溫度條件下,，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下,，菌體吸收水分后,，其蛋白質(zhì)易于凝固變性，因為蒸汽的穿透力強,，殺菌效果好,。