產(chǎn)品名稱：大鼠肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基

規(guī)格：100mL/125mL×4
貨號(hào)：YS-02X10121

細(xì)胞生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn) ：細(xì)胞生長(zhǎng)良好，形態(tài)正常

儲(chǔ)存條件：2℃-8℃,，避光儲(chǔ)存

運(yùn)輸條件：冰袋冷藏運(yùn)輸
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1） 準(zhǔn)備RPMI-1640 培養(yǎng)基,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%,；Glutamax（invitrogen 35050061）,，1%；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070）,，1%；雙抗,，1%。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳，5%,。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%血清,，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配。

二． 細(xì)胞處理：

1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過(guò)夜）,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

注意事項(xiàng)：

（1）凍存前細(xì)胞狀態(tài),，細(xì)胞最好在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，細(xì)胞密度適合,，剛剛發(fā)生細(xì)胞融合,，過(guò)密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好，而且消化時(shí)不容易分散,；

（2）凍存的密度不宜過(guò)低,，10的6次方-7次方的數(shù)量級(jí)比較好，我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107）,，一瓶?jī)鲆还埽?.5ml凍存管）,，10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個(gè)細(xì)胞）分成兩管。

（3）消化和吹打,，切忌胰酶消化過(guò)度,，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡,。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦,，不是加入凍存液再吹打,。

（4）離心后加入凍存液,。凍存液中FBS的用量對(duì)于細(xì)胞而言要求不是很嚴(yán)格，我從10%-90%都用過(guò),，問(wèn)題不大,，個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了，能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛,！另外,，凍存液可以在處理細(xì)胞前配置，放在4度冰箱預(yù)冷,。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸，移入凍存管,。

（5）關(guān)于“慢凍"，傳統(tǒng)的方法,，細(xì)胞凍存管用棉花包好,，4度2h，-20度2h或更長(zhǎng),，-80度過(guò)夜,，最后液氮。對(duì)于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室,，推薦使用程序降溫盒，內(nèi)裝異丙醇,，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,，很方便，省了包棉花,、4度,、-20度了。

使用步驟：

一）準(zhǔn)確稱量試劑：根據(jù)不同的菌類和用途,，選擇適宜的培養(yǎng)基,，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。

（二）校正pH值：將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi),，標(biāo)記劃線,，加熱溶解，補(bǔ)充水分,，測(cè)定酸堿度,，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計(jì)測(cè)定。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi),。

（三）過(guò)濾：將玻璃漏斗置鐵架上,，再用培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中，將上述培養(yǎng)基倒入其中過(guò)濾至透明,。

（四）分裝：將過(guò)濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶?jī)?nèi)（試管內(nèi)每支裝5mL；三角瓶中裝100～150ml）,，塞好棉塞用牛皮紙包扎好，準(zhǔn)備滅菌,。

（五）滅菌：培養(yǎng)基的滅菌,，常用高壓蒸汽滅菌法,。一般微生物的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死，但細(xì)菌的芽胞有較強(qiáng)的抗熱性，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到*滅菌的目的,。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,，即壓力越大,，蒸汽溫度就越高。因此,，在同一溫度條件下，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好,。而且在濕熱情況下，菌體吸收水分后,，其蛋白質(zhì)易于凝固變性，因?yàn)檎羝拇┩噶?qiáng),，殺菌效果好,。

細(xì)胞特性：

1)】組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常眼組織,。

2)細(xì)胞鑒定：細(xì)胞免疫熒光染色為陽(yáng)性。

3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%,。

4)不含有 HIV-1,、 HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌,。

5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式：上皮樣,，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
TPO ELISA Kit 大鼠甲狀腺過(guò)氧化物酶Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

 ZNF217 鋅指脂蛋白217抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh FUT1 巖藻糖轉(zhuǎn)移酶1抗體 規(guī)格 0.2ml

IL-16(Mouse Interleukin 16) ELISA Kit 小鼠白介素16 96T

Neuropeptide Y 英文名稱： 神經(jīng)肽Y抗體 0.1ml

Apolipoprotein CII/APOC2 英文名稱： 載脂蛋白C2抗體 0.2ml

 ZNF217 鋅指脂蛋白217抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

TH1/TH2 小鼠細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞因子Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

 FABP(brain) CT 腦型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體(C端)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh MRF/C11orf9 髓鞘基因調(diào)控因子抗體 規(guī)格 0.2ml

MIS/AMH(Human Mullerian Inhibiting Substance/ Mullerian hormone) ELISA Kit 人繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管 96T

SLC44A1 英文名稱： 溶質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白家族44成員1抗體 0.2ml

C2orf55 英文名稱： 2號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框55抗體 0.2ml

 FABP(brain) CT 腦型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體(C端)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Goat  Guinea pig IgG/AP 堿性磷酸酶(AP)標(biāo)記的羊抗豚鼠IgG 0.1ml

FSD1L 英文名稱： 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白10抗體 0.2ml

鈣蛋白酶抗體  Calpain 1 0.1ml

 Nogo-B/A /FITC 熒光素標(biāo)記軸索過(guò)度生長(zhǎng)抑制因子-B/A抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh POT1 端粒保護(hù)蛋白1抗體 規(guī)格 0.2ml

 ZAP-70/FITC 熒光素標(biāo)記zeta相關(guān)蛋白70抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
大鼠肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基組織結(jié)構(gòu)型內(nèi)皮細(xì)胞一氧化氮合成酶（cNOS/NOS3/eNOS）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次十二醇

血液結(jié)構(gòu)型內(nèi)皮細(xì)胞一氧化氮合成酶（cNOS/NOS3/eNOS）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次2,，4-二氯

體液結(jié)構(gòu)型內(nèi)皮細(xì)胞一氧化氮合成酶（cNOS/NOS3/eNOS）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次鄰甲酚

細(xì)胞結(jié)構(gòu)型神經(jīng)元一氧化氮合成酶（cNOS/NOS1/nNOS）活性熒光定量檢測(cè)試劑盒20次檸檬酸鋰

組織結(jié)構(gòu)型神經(jīng)元一氧化氮合成酶（cNOS/NOS1/nNOS）活性熒光定量檢測(cè)試劑盒20次桃色歐文氏菌多少錢

血液結(jié)構(gòu)型神經(jīng)元一氧化氮合成酶（cNOS/NOS1/nNOS）活性熒光定量檢測(cè)試劑盒20次人正常T表達(dá)和分泌因子（RANTES/CCL5）ELISA試劑盒,

體液結(jié)構(gòu)型神經(jīng)元一氧化氮合成酶（cNOS/NOS1/nNOS）活性熒光定量檢測(cè)試劑盒20次人Ⅰ型膠原N末端肽（NTX）ELISA試劑盒, NTX ELISA kit

細(xì)胞誘導(dǎo)型巨噬細(xì)胞一氧化氮合成酶（iNOS /NOS2/mNOS）活性熒光定量檢測(cè)試劑盒20次人EB病IgA（EBv IgA）ELISA試劑盒,EBv IgA ELISA

組織誘導(dǎo)型巨噬細(xì)胞一氧化氮合成酶（iNOS /NOS2/mNOS）活性熒光定量檢測(cè)試劑盒20次人胸苷酸合成酶（TS）ELISA試劑盒,TS ELISA

血液誘導(dǎo)型巨噬細(xì)胞一氧化氮合成酶（iNOS /NOS2/mNOS）活性熒光定量檢測(cè)試劑盒20次人26S蛋白酶體（26S PSM）ELISA試劑盒,

體液誘導(dǎo)型巨噬細(xì)胞一氧化氮合成酶（iNOS /NOS2/mNOS）活性熒光定量檢測(cè)試劑盒20次豬白介素1α（IL-1α）ELISA試劑盒,

細(xì)胞結(jié)構(gòu)型內(nèi)皮細(xì)胞一氧化氮合成酶（cNOS/NOS3/eNOS）活性熒光定量檢測(cè)試劑盒20次亮綠乳糖培養(yǎng)基

組織結(jié)構(gòu)型內(nèi)皮細(xì)胞一氧化氮合成酶（cNOS/NOS3/eNOS）活性熒光定量檢測(cè)試劑盒20次硫十二烷基鈉瓊脂用于鼠疫桿菌抗噬菌體培養(yǎng)

血液結(jié)構(gòu)型內(nèi)皮細(xì)胞一氧化氮合成酶（cNOS/NOS3/eNOS）活性熒光定量檢測(cè)試劑盒20次1-羥基并三氮唑一水物

體液結(jié)構(gòu)型內(nèi)皮細(xì)胞一氧化氮合成酶（cNOS/NOS3/eNOS）活性熒光定量檢測(cè)試劑盒20次BOC-O-芐基-L-酪