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供貨周期 | 現貨 | 規(guī)格 | 100mL/125mL×4 |
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貨號 | YS-02X10179 | 應用領域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研使用 |
產品名稱:大鼠尿道上皮細胞*培養(yǎng)基
規(guī)格:100mL/125mL×4
貨號:YS-02X10179
細胞生長實驗 :細胞生長良好,形態(tài)正常
儲存條件:2℃-8℃,避光儲存
運輸條件:冰袋冷藏運輸
公司產品僅用于科研
細胞培養(yǎng)步驟
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1) 準備RPMI-1640 培養(yǎng)基;優(yōu)質胎牛血清,10%;Glutamax(invitrogen 35050061),1%,;Sodium pyruvate(invitrogen 11360070),1%,;雙抗,,1%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%,;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,,現用現配,。
二. 細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入250px皿中,,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜),。第二天換液并檢查細胞密度,。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng),。
注意事項:
(1)凍存前細胞狀態(tài),,細胞最好在對數生長期,細胞密度適合,,剛剛發(fā)生細胞融合,,過密或連成片的細胞狀態(tài)不好,而且消化時不容易分散,;
(2)凍存的密度不宜過低,,10的6次方-7次方的數量級比較好,我凍存的細胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),,一瓶凍一管(1.5ml凍存管),,10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個細胞)分成兩管。
(3)消化和吹打,,切忌胰酶消化過度,吹打不可太用力,,最好不要吹出好多泡泡,。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦,不是加入凍存液再吹打,。
(4)離心后加入凍存液,。凍存液中FBS的用量對于細胞而言要求不是很嚴格,我從10%-90%都用過,,問題不大,,個人認為10%-20%可以了,能節(jié)約處就節(jié)約點嘛,!另外,,凍存液可以在處理細胞前配置,,放在4度冰箱預冷。細胞離心后直接用預冷的凍存液重懸,,移入凍存管,。
(5)關于“慢凍",傳統的方法,,細胞凍存管用棉花包好,,4度2h,-20度2h或更長,,-80度過夜,,最后液氮。對于條件較好的實驗室和細胞凍存數量多的實驗室,,推薦使用程序降溫盒,,內裝異丙醇,在-80度并內可以逐漸降溫,,很方便,,省了包棉花、4度,、-20度了,。
使用步驟:
一)準確稱量試劑:根據不同的菌類和用途,選擇適宜的培養(yǎng)基,,培養(yǎng)基所需試劑必須純凈,。
(二)校正pH值:將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內,標記劃線,,加熱溶解,,補充水分,測定酸堿度,,常用pH6.8~8.0的精密試紙或酸度計測定,。用1N NaOH和1N HCl調節(jié)pH值到適宜范圍內。
(三)過濾:將玻璃漏斗置鐵架上,,再用培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,,將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明。
(四)分裝:將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(試管內每支裝5mL,;三角瓶中裝100~150ml),,塞好棉塞用牛皮紙包扎好,準備滅菌,。
(五)滅菌:培養(yǎng)基的滅菌,,常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養(yǎng)細胞在水中煮沸后即被殺死,但細菌的芽胞有較強的抗熱性,,須經高壓蒸汽滅菌才能達到*滅菌的目的,。根據蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,即壓力越大,,蒸汽溫度就越高,。因此,在同一溫度條件下,,采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好,。而且在濕熱情況下,菌體吸收水分后,,其蛋白質易于凝固變性,,因為蒸汽的穿透力強,殺菌效果好,。
細胞特性:
1)】組織來源于實驗動物的正常眼組織,。
2)細胞鑒定:細胞免疫熒光染色為陽性。
3)經鑒定細胞純度高于90%,。
4)不含有 HIV-1,、 HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌,。
5)細胞生長方式:上皮樣,,不規(guī)則細胞,貼壁培養(yǎng),。
IL-20 人白介素-20Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
WBSCR14/ChREBP 糖類應答元件結合蛋白ChREBP抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Nucleolin/C23 核仁蛋白C23抗體 規(guī)格 0.2ml
Trypan Blue 臺盼藍染色液 5ml
TROVE-2 英文名稱: 干燥綜合征相關蛋白2抗體 0.2ml
CPT1B 英文名稱: 肉毒堿棕櫚?;D移酶1B抗體 0.2ml
WBSCR14/ChREBP 糖類應答元件結合蛋白ChREBP抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
IL-22 大鼠白介素-22Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
DAPK1 凋亡相關蛋白激酶1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh NDUFS3 線粒體復合物NDUFS3蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
Human Tissue-type Plasiminogen Actilyse,t-PA ELISA Kit 人組織型纖溶酶原激活劑 96T
SFRS7 英文名稱: 絲酸/蘇酸蛋白激酶SRPK7抗體 0.2ml
C-REL 英文名稱: 細胞衍生C-型凝集素抗體 0.2ml
DAPK1 凋亡相關蛋白激酶1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Mouse human IgG/AP 堿性磷酸酶(AP)標記的小鼠抗人IgG 0.1ml
GRIM19 英文名稱: 干擾素/維誘導凋亡相關基因抗體 0.1ml
淀粉樣肽前體蛋白抗體 APP695/770 0.1ml
NeuN/FITC 熒光素標記神經元核抗原抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Prkg1/cGKI cGMP依賴性蛋白激酶1抗體 規(guī)格 0.1ml
VEGFR-3/FLt-4 /FITC 熒光素標記血管內皮細胞生長因子受體-3IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
大鼠尿道上皮細胞*培養(yǎng)基細胞PCTA1RE1酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次2-羥基吡啶
組織PCTA1RE1酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次正庚酸
細胞PDK1酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次異丙醇鋁
組織PDK1酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次鹽酸川芎嗪
細胞PHKG2酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次千斤拔
組織PHKG2酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次炔雌醚
細胞PIM1酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次酞丁安
組織PIM1酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次雙羥萘酸噻嘧啶
細胞PIM2酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次雙羥萘酸
組織PIM2酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次鹽酸氟奮
細胞PKCα酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次醋酸甲萘氫醌
組織PKCα酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次鹽酸二氧丙嗪
細胞PKCβ1酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次保泰松
組織PKCβ1酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次鹽酸貝那替秦
細胞PKCβ2酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次泮托拉唑鈉
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