細(xì)胞特性：

1)】組織來源于實(shí)驗(yàn)動物的正常眼組織,。

2)細(xì)胞鑒定：細(xì)胞免疫熒光染色為陽性,。

3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%,。

4)不含有 HIV-1,、 HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌。

5)細(xì)胞生長方式：上皮樣,，不規(guī)則細(xì)胞,，貼壁培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱：大鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基

規(guī)格：100mL/125mL×4
貨號：YS-02X10223

細(xì)胞生長實(shí)驗(yàn) ：細(xì)胞生長良好,，形態(tài)正常

儲存條件：2℃-8℃,，避光儲存

運(yùn)輸條件：冰袋冷藏運(yùn)輸
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1） 準(zhǔn)備RPMI-1640 培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%,；Glutamax（invitrogen 35050061），1%,；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070）,，1%；雙抗,，1%,。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%,；二氧化碳,，5%。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。

3） 凍存液：90%血清，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配,。

二． 細(xì)胞處理：

1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

注意事項(xiàng)：

（1）凍存前細(xì)胞狀態(tài),，細(xì)胞最好在對數(shù)生長期,，細(xì)胞密度適合，剛剛發(fā)生細(xì)胞融合,，過密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好,，而且消化時不容易分散；

（2）凍存的密度不宜過低,，10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好,，我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107），一瓶凍一管（1.5ml凍存管）,，10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個細(xì)胞）分成兩管,。

（3）消化和吹打，切忌胰酶消化過度,，吹打不可太用力,，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦,，不是加入凍存液再吹打,。

（4）離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于細(xì)胞而言要求不是很嚴(yán)格,，我從10%-90%都用過,，問題不大，個人認(rèn)為10%-20%可以了,，能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛,！另外，凍存液可以在處理細(xì)胞前配置,，放在4度冰箱預(yù)冷,。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸，移入凍存管,。

（5）關(guān)于“慢凍",，傳統(tǒng)的方法，細(xì)胞凍存管用棉花包好,，4度2h，-20度2h或更長,，-80度過夜,，最后液氮,。對于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室,，推薦使用程序降溫盒，內(nèi)裝異丙醇,，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,，很方便,，省了包棉花,、4度、-20度了,。

使用步驟：

一）準(zhǔn)確稱量試劑：根據(jù)不同的菌類和用途,，選擇適宜的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈,。

（二）校正pH值：將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi),，標(biāo)記劃線，加熱溶解,，補(bǔ)充水分,，測定酸堿度，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計(jì)測定,。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi),。

（三）過濾：將玻璃漏斗置鐵架上，再用紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,，將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明,。

（四）分裝：將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(nèi)（試管內(nèi)每支裝5mL；三角瓶中裝100～150ml）,，塞好棉塞用牛皮紙包扎好,，準(zhǔn)備滅菌。

（五）滅菌：培養(yǎng)基的滅菌,，常用高壓蒸汽滅菌法,。一般微生物的營養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死，但細(xì)菌的芽胞有較強(qiáng)的抗熱性,，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到*滅菌的目的,。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理，即壓力越大,，蒸汽溫度就越高,。因此，在同一溫度條件下,，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好,。而且在濕熱情況下，菌體吸收水分后,，其蛋白質(zhì)易于凝固變性,，因?yàn)檎羝拇┩噶?qiáng)，殺菌效果好,。

Ephrin B (phospho Tyr331) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人,、大、小鼠磷酸化Ephrin B抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

 VEGFR2(VEGF-R2)Flk1/FITC 熒光素標(biāo)記血管內(nèi)皮生長因子受體2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

膜粘連蛋白-A抗體  Annexin A 0.2ml

Mouse  human IgG/PE-Cy3 PE-Cy3標(biāo)記的小鼠抗人IgG 0.1ml

GALNT10 英文名稱： 多肽N-乙?；肴樘寝D(zhuǎn)移酶10抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh PRMT6 組蛋白精甲基轉(zhuǎn)移酶6抗體 規(guī)格 0.1ml

 VEGFR2(VEGF-R2)Flk1/FITC 熒光素標(biāo)記血管內(nèi)皮生長因子受體2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

PF/PFP(Human Perforin/Pore-forming protein) ELISA Kit 人穿孔素/成孔蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

 GABABR2/GB2 G氨基丁酸B型受體2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Mouse  human IgG/Cy5.5 Cy5.5標(biāo)記的小鼠抗人IgG 規(guī)格 0.1ml

sTREM-1(Human soluble Triggering Receptor Expresses on Myeloid Cells-1) ELISA Kit 人可溶性髓系細(xì)胞觸發(fā)受體-1 96T

SCG3 英文名稱： 分泌粒蛋白3抗體 0.1ml

CHRDL1 英文名稱： 脊索生成素樣蛋白1抗體 0.2ml

 GABABR2/GB2 G氨基丁酸B型受體2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Mouse  Goat IgG/Cy3 Cy3標(biāo)記的小鼠抗羊IgG 0.1ml

phospho-GFAP (Ser8) 英文名稱： 磷酸化膠質(zhì)纖維酸性蛋白抗體 0.1ml

脂聯(lián)素受體-1抗體  Adipo R1 0.1ml

 MYOG/Myogenin/FITC 熒光素標(biāo)記肌紅蛋白抗體(肌細(xì)胞生成素)IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Protein C inhibitor/SerpinA5 蛋白C抑制因子抗體 規(guī)格 0.1ml

 VASH1/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗血管抑制蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
大鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基磷脂酶D2（Phospholipase D2）活性比色法定量檢測試劑盒20次鼠抗人促甲狀腺素單克隆抗體流式組化

細(xì)胞磷脂酶D2（Phospholipase D2）活性熒光定量檢測試劑盒20次鹽酸-L-白氨酰-2-萘

組織磷脂酶D2（Phospholipase D2）活性熒光定量檢測試劑盒20次BOC-L-天冬酰

純化微粒體磷脂酶D2（Phospholipase D2）活性熒光定量檢測試劑盒20次嘌呤核苷磷酸化酶

/酵母磷脂酶D2（Phospholipase D2）活性熒光定量檢測試劑盒20次鏈親和素

植物磷脂酶D2（Phospholipase D2）活性熒光定量檢測試劑盒20次5-肌苷三磷酸二鈉鹽

磷脂酶D2（Phospholipase D2）活性熒光定量檢測試劑盒20次生根粉

細(xì)胞輔脂酶（COLIPASE）活性比色法定量檢測試劑盒20次D-（-）水楊苷

組織輔脂酶（COLIPASE）活性比色法定量檢測試劑盒20次天青II

細(xì)胞溶酶體脂酶（酸性脂酶）活性比色法定量檢測試劑盒20次氯化鎘

組織溶酶體脂酶（酸性脂酶）活性比色法定量檢測試劑盒20次氯化鉍

細(xì)胞胰腺脂酶活性比色法定量檢測試劑盒20次9-芴酮

組織胰腺脂酶活性比色法定量檢測試劑盒20次

細(xì)胞肝脂酶活性比色法定量檢測試劑盒20次獐牙菜苦苷

組織肝脂酶活性比色法定量檢測試劑盒20次何首烏