產(chǎn)品名稱：肝星形細胞*培養(yǎng)基

規(guī)格：100mL/125mL×4
貨號：YS-02X10019

細胞生長實驗 ：細胞生長良好,，形態(tài)正常

儲存條件：2℃-8℃，避光儲存

運輸條件：冰袋冷藏運輸
公司產(chǎn)品僅用于科研

細胞培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1） 準(zhǔn)備RPMI-1640 培養(yǎng)基,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%,；Glutamax（invitrogen 35050061）,，1%；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070）,，1%,；雙抗，1%,。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%；二氧化碳,，5%,。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。

3） 凍存液：90%血清,，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配,。

二． 細胞處理：

1） 復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?50px皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度,。

2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng)。

注意事項：

（1）凍存前細胞狀態(tài),，細胞最好在對數(shù)生長期,，細胞密度適合,，剛剛發(fā)生細胞融合，過密或連成片的細胞狀態(tài)不好,，而且消化時不容易分散,；

（2）凍存的密度不宜過低，10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好,，我凍存的細胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107）,，一瓶凍一管（1.5ml凍存管），10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個細胞）分成兩管,。

（3）消化和吹打,，切忌胰酶消化過度，吹打不可太用力,，最好不要吹出好多泡泡,。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦，不是加入凍存液再吹打,。

（4）離心后加入凍存液,。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細胞株而言要求不是很嚴(yán)格，我從10%-90%都用過,，問題不大,，個人認(rèn)為10%-20%可以了，能節(jié)約處就節(jié)約點嘛,！另外,，凍存液可以在處理細胞前配置，放在4度冰箱預(yù)冷,。細胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸,，移入凍存管。

（5）關(guān)于“慢凍",，傳統(tǒng)的方法,，LLC細胞凍存管用棉花包好，4度2h,，-20度2h或更長,，-80度過夜，最后液氮,。對于條件較好的實驗室和細胞凍存數(shù)量多的實驗室,，推薦使用程序降溫盒，內(nèi)裝異丙醇,，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,，很方便，省了包棉花,、4度,、-20度了,。

使用步驟：

一）準(zhǔn)確稱量試劑：根據(jù)不同的菌類和用途,，選擇適宜的培養(yǎng)基,，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈,。

（二）校正pH值：將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi),，標(biāo)記劃線，加熱溶解,，補充水分,，測定酸堿度,，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計測定,。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi),。

（三）過濾：將玻璃漏斗置鐵架上，再用人子宮成纖維細胞*培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,，將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明,。

（四）分裝：將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(nèi)（試管內(nèi)每支裝5mL；三角瓶中裝100～150ml）,，塞好棉塞用牛皮紙包扎好,，準(zhǔn)備滅菌,。

（五）滅菌：培養(yǎng)基的滅菌,，常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養(yǎng)細胞在水中煮沸后即被殺死,，但細菌的芽胞有較強的抗熱性,，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達到*滅菌的目的。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,，即壓力越大,，蒸汽溫度就越高。因此,，在同一溫度條件下,，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下,，菌體吸收水分后,，其蛋白質(zhì)易于凝固變性，因為蒸汽的穿透力強,，殺菌效果好,。

細胞特性：

1)】組織來源于實驗動物的正常眼組織。

2)細胞鑒定：細胞免疫熒光染色為陽性,。

3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%,。

4)不含有 HIV-1、 HBV,、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌,。

5)細胞生長方式：上皮樣,，不規(guī)則細胞，貼壁培養(yǎng),。
PKB/FITC 熒光素標(biāo)記蛋白激酶B抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Bovine IgG (親和純化) IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 10mg

鼠抗人α 亞基人絨毛膜促性腺單抗  α -HCG α ) 0.1ml

Dog IgM/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗犬IgM抗體 0.1ml

FAM50A 英文名稱： FAM50A蛋白抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-RPS6KB1(Ser434) 磷酸化核糖體S6蛋白激酶抗體 規(guī)格 0.1ml

Bovine IgG (親和純化) IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 10mg

CNTF 小鼠睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

 FGFR4/CD334 成纖維細胞生長因子受體4抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Mouse  Rabbit IgM/Bio 生物素標(biāo)記的小鼠抗兔IgM 規(guī)格 0.1ml

MF/MPF(Human maturation promoting factor) ELISA Kit 人促有絲分裂因子 96T

Stanniocalcin 2 英文名稱： 斯鈣素2抗體 0.2ml

C22orf31 英文名稱： 22號染色體開放閱讀框31抗體 0.2ml

 FGFR4/CD334 成纖維細胞生長因子受體4抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Mouse  Rabbit IgM/PE-Cy3 PE-Cy3標(biāo)記的小鼠抗兔IgM 0.1ml

Phospho-FoxO3a (Ser294) 英文名稱： 磷酸化叉頭蛋白3A抗體 0.1ml

c-mer原癌基因酪激酶抗體  C-Mer/MERTK 0.1ml

 P38 MAPK/FITC 熒光素標(biāo)記原活化蛋白激酶p38抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh PIM1 絲/蘇激酶蛋白Pim1抗體 規(guī)格 0.2ml

bovine-BSA/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記血清白蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
肝星形細胞*培養(yǎng)基動物硬組織可溶性膜蛋白（粗提）制備試劑盒20次鴨子碳酸酐酶（CA）ELISA試劑盒,

動物硬組織可溶性膜蛋白（純提）制備試劑盒20次兔子基質(zhì)金屬蛋白酶3（MMP-3）ELISA試劑盒,

動物硬組織可溶性膜蛋白相位分離制備試劑盒20次兔腎素（Renin）ELISA試劑盒,

/酵母細胞可溶性膜蛋白（粗提）制備試劑盒20次紅螯光殼螯蝦卵黃脂磷蛋白/卵黃磷蛋白（Lv/Vn）ELISA試劑盒,

/酵母細胞可溶性膜蛋白（純提）制備試劑盒20次LB肉湯

/酵母細胞可溶性膜蛋白相位分離制備試劑盒20次L-甘-甘-白三肽

通用包涵體蛋白溶解試劑盒10次光甘草定 Glabridin

溫和包涵體蛋白溶解試劑盒10次高良姜素 Galangin

包涵體蛋白溶解試劑盒10次甘草苷 Liquiritin

可溶性包涵體蛋白復(fù)性（化學(xué)稀釋I）試劑盒5次L-谷鉀鹽

可溶性包涵體蛋白復(fù)性（化學(xué)稀釋II）試劑盒20次D-

可溶性包涵體蛋白復(fù)性（物理透析）試劑盒（10毫升純化蛋白）1次人c-myc癌基因產(chǎn)物（c-myc）ELISA試劑盒,c-myc ELISA kit

紅細胞可溶性膜蛋白（粗提）制備試劑盒20次人微量轉(zhuǎn)鐵蛋白（MTF）ELISA試劑盒,MTF ELISA kit

紅細胞可溶性膜蛋白（純提）制備試劑盒20次人γ谷氨酰轉(zhuǎn)移酶（GGT） ELISA試劑盒,GGT  ELISA kit

紅細胞可溶性膜蛋白相位分離制備試劑盒20次人抗人絨毛膜促性腺素抗體（AhCGAb）ELISA試劑盒, AhCGAb ELISA kit