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當(dāng)前位置:上海研生實業(yè)有限公司>>科研細胞>>細胞培養(yǎng)基>> 小鼠甲狀腺上皮細胞*培養(yǎng)基
參 考 價 | 面議 |
產(chǎn)品型號
品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
所 在 地上海市
更新時間:2022-03-23 11:02:46瀏覽次數(shù):264次
聯(lián)系我時,,請告知來自 化工儀器網(wǎng)供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100mL/125mL×4 |
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貨號 | YS-02X10256 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研使用 |
細胞特性:
1)】組織來源于實驗動物的正常眼組織。
2)細胞鑒定:細胞免疫熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%,。
4)不含有 HIV-1、 HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌,。
5)細胞生長方式:上皮樣,不規(guī)則細胞,,貼壁培養(yǎng),。
產(chǎn)品名稱:小鼠甲狀腺上皮細胞*培養(yǎng)基
規(guī)格:100mL/125mL×4
貨號:YS-02X10256
細胞生長實驗 :細胞生長良好,形態(tài)正常
儲存條件:2℃-8℃,,避光儲存
運輸條件:冰袋冷藏運輸
公司產(chǎn)品僅用于科研
細胞培養(yǎng)步驟
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備RPMI-1640 培養(yǎng)基,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%,;Glutamax(invitrogen 35050061),,1%;Sodium pyruvate(invitrogen 11360070),,1%,;雙抗,1%,。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%;二氧化碳,,5%,。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3) 凍存液:90%血清,,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,。
二. 細胞處理:
1) 復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?50px皿中,,加入約8ml培養(yǎng)基,,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng),。
注意事項:
(1)凍存前細胞狀態(tài),細胞最好在對數(shù)生長期,,細胞密度適合,,剛剛發(fā)生細胞融合,過密或連成片的細胞狀態(tài)不好,,而且消化時不容易分散,;
(2)凍存的密度不宜過低,10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好,,我凍存的細胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),,一瓶凍一管(1.5ml凍存管),10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個細胞)分成兩管,。
(3)消化和吹打,,切忌胰酶消化過度,吹打不可太用力,,最好不要吹出好多泡泡,。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦,不是加入凍存液再吹打,。
(4)離心后加入凍存液,。凍存液中FBS的用量對于細胞而言要求不是很嚴(yán)格,我從10%-90%都用過,,問題不大,,個人認(rèn)為10%-20%可以了,能節(jié)約處就節(jié)約點嘛,!另外,,凍存液可以在處理細胞前配置,放在4度冰箱預(yù)冷,。細胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸,,移入凍存管。
(5)關(guān)于“慢凍",,傳統(tǒng)的方法,,細胞凍存管用棉花包好,4度2h,,-20度2h或更長,,-80度過夜,最后液氮,。對于條件較好的實驗室和細胞凍存數(shù)量多的實驗室,推薦使用程序降溫盒,內(nèi)裝異丙醇,,在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,,很方便,省了包棉花,、4度,、-20度了。
使用步驟:
一)準(zhǔn)確稱量試劑:根據(jù)不同的菌類和用途,,選擇適宜的培養(yǎng)基,,培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。
(二)校正pH值:將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi),,標(biāo)記劃線,,加熱溶解,補充水分,,測定酸堿度,,常用pH6.8~8.0的精密試紙或酸度計測定。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi),。
(三)過濾:將玻璃漏斗置鐵架上,,再用紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明,。
(四)分裝:將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(nèi)(試管內(nèi)每支裝5mL,;三角瓶中裝100~150ml),塞好棉塞用牛皮紙包扎好,,準(zhǔn)備滅菌,。
(五)滅菌:培養(yǎng)基的滅菌,常用高壓蒸汽滅菌法,。一般微生物的營養(yǎng)細胞在水中煮沸后即被殺死,,但細菌的芽胞有較強的抗熱性,須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達到*滅菌的目的,。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,,即壓力越大,蒸汽溫度就越高,。因此,,在同一溫度條件下,采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好,。而且在濕熱情況下,,菌體吸收水分后,其蛋白質(zhì)易于凝固變性,,因為蒸汽的穿透力強,,殺菌效果好。
MYSM1/FITC 熒光素標(biāo)記MYSM1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
VASP/FITC 熒光素標(biāo)記血管擴張刺激磷蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
腎上腺髓質(zhì)素抗體 ADM 0.1ml
Mouse Goat IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的小鼠抗羊IgG 0.1ml
phospho-GluR1 (Ser836) 英文名稱: 磷酸化谷酸受體1抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Proteasome 26S S2/TRAP2 壞死因子受體相關(guān)蛋白2抗體 規(guī)格 0.2ml
VASP/FITC 熒光素標(biāo)記血管擴張刺激磷蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
MEC/CCL28(Human mucosae associated epithelia chemokine) ELISA Kit 人粘膜相關(guān)上皮趨化因子Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
GFP 綠色熒光蛋白(組化用抗體)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Mouse Guinea pig IgG/APC APC標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgG 規(guī)格 0.1ml
HSP-20(Human Heat Shock Protein 20) ELISA Kit 人熱休克蛋白20 96T
RTP4 英文名稱: 受體轉(zhuǎn)運蛋白4抗體 0.2ml
Phospho-cdc25A (Ser178) 英文名稱: 磷酸化細胞分裂周期蛋白25抗體 0.1ml
GFP 綠色熒光蛋白(組化用抗體)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Mouse rat IgG/Cy5.5 Cy5.5標(biāo)記的小鼠抗大鼠IgG 0.1ml
GRIK2 + GRIK3 英文名稱: 谷酸受體紅藻酸離子2/3抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh 14-3-3E/YWHAE 14-3-3E蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
MrpL28 /FITC 熒光素標(biāo)記線粒體核糖體蛋白L28抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh PSMD6/P44S10 蛋白酶調(diào)解因子6抗體 規(guī)格 0.2ml
VTG/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記兔抗魚、青鳉魚卵黃蛋白原抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
小鼠甲狀腺上皮細胞*培養(yǎng)基10倍酵母菌SD-LEU/TRP培養(yǎng)基100毫升2-乙基己酸
酵母菌SD-LEU培養(yǎng)基100毫升無水氯化鉻(III)
10倍酵母菌SD-LEU培養(yǎng)基100毫升水磷酸肌酸二鈉鹽
酵母菌SD-TRP培養(yǎng)基100毫升3-乙酰吡啶
10倍酵母菌SD-TRP培養(yǎng)基100毫升丙酸正丙酯
酵母菌SD-HIS培養(yǎng)基100毫升甲基氯化銨
10倍酵母菌SD-HIS培養(yǎng)基100毫升草酸銨
酵母菌SD-URA培養(yǎng)基100毫升銀
10倍酵母菌SD-URA培養(yǎng)基100毫升蘇
酵母菌SD-URA培養(yǎng)基(半乳糖)100毫升亞油酸甲酯
10倍酵母菌SD-URA培養(yǎng)基(半乳糖)100毫升老龍皮酸(網(wǎng)脊衣酸)
酵母菌SD-URA培養(yǎng)基(半乳糖+棉籽糖)100毫升迷迭香酸
10倍酵母菌SD-URA培養(yǎng)基(半乳糖+棉籽糖)100毫升沙棘
酵母菌SD-LEU/TRP/HIS培養(yǎng)基100毫升魚腥草素鈉
酵母菌SD-TRP/URA培養(yǎng)基100毫升鹽酸肼屈嗪
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