產(chǎn)品名稱：小鼠胰腺上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基

規(guī)格：100mL/125mL×4
貨號：YS-02X10255

細(xì)胞生長實(shí)驗(yàn) ：細(xì)胞生長良好，形態(tài)正常

儲存條件：2℃-8℃,，避光儲存

運(yùn)輸條件：冰袋冷藏運(yùn)輸
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1） 準(zhǔn)備RPMI-1640 培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%；Glutamax（invitrogen 35050061）,，1%；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070）,，1%,；雙抗，1%,。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%；二氧化碳,，5%,。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。

3） 凍存液：90%血清,，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配,。

二． 細(xì)胞處理：

1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

注意事項(xiàng)：

（1）凍存前細(xì)胞狀態(tài),，細(xì)胞最好在對數(shù)生長期,，細(xì)胞密度適合，剛剛發(fā)生細(xì)胞融合,，過密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好,，而且消化時(shí)不容易分散；

（2）凍存的密度不宜過低,，10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好,，我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107），一瓶凍一管（1.5ml凍存管）,，10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個(gè)細(xì)胞）分成兩管,。

（3）消化和吹打，切忌胰酶消化過度,，吹打不可太用力,，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦,，不是加入凍存液再吹打,。

（4）離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于細(xì)胞而言要求不是很嚴(yán)格,，我從10%-90%都用過,，問題不大，個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了,，能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛,！另外，凍存液可以在處理細(xì)胞前配置,，放在4度冰箱預(yù)冷,。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸，移入凍存管,。

（5）關(guān)于“慢凍",，傳統(tǒng)的方法，細(xì)胞凍存管用棉花包好,，4度2h,，-20度2h或更長，-80度過夜,，最后液氮,。對于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室,，推薦使用程序降溫盒，內(nèi)裝異丙醇,，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,，很方便，省了包棉花,、4度,、-20度了。

使用步驟：

一）準(zhǔn)確稱量試劑：根據(jù)不同的菌類和用途,，選擇適宜的培養(yǎng)基,，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。

（二）校正pH值：將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi),，標(biāo)記劃線,，加熱溶解，補(bǔ)充水分,，測定酸堿度,，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計(jì)測定。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi),。

（三）過濾：將玻璃漏斗置鐵架上,，再用培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中，將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明,。

（四）分裝：將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(nèi)（試管內(nèi)每支裝5mL,；三角瓶中裝100～150ml），塞好棉塞用牛皮紙包扎好,，準(zhǔn)備滅菌,。

（五）滅菌：培養(yǎng)基的滅菌，常用高壓蒸汽滅菌法,。一般微生物的營養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死,，但細(xì)菌的芽胞有較強(qiáng)的抗熱性，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到*滅菌的目的,。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,，即壓力越大，蒸汽溫度就越高,。因此,，在同一溫度條件下，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好,。而且在濕熱情況下,，菌體吸收水分后，其蛋白質(zhì)易于凝固變性，因?yàn)檎羝拇┩噶?qiáng),，殺菌效果好,。

細(xì)胞特性：

1)】組織來源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常眼組織。

2)細(xì)胞鑒定：細(xì)胞免疫熒光染色為陽性,。

3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%,。

4)不含有 HIV-1、 HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌。

5)細(xì)胞生長方式：上皮樣,，不規(guī)則細(xì)胞,，貼壁培養(yǎng)。
Beta2-GP1 IgA/G/M ELISA Kit 大鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/MMulti-class antibodies規(guī)格： 48T

 VAT 囊泡乙酰膽堿通道抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh GAS7/Growth Arrest Specific Protein 7 生長休止特定蛋白7抗體 規(guī)格 0.2ml

SLC/CCL21(Human secondary lymphoid-tissue chemokine) ELISA Kit 人二級組織趨化因子 96T

NF1 英文名稱： 1型神經(jīng)纖維瘤抗體 0.1ml

APOE3 英文名稱： 載脂蛋白E3抗體 0.2ml

 VAT 囊泡乙酰膽堿通道抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

ACAST-D IV (Human autoantibodies against the C-terminal domain IV ) ELISA Kit 人抗鈣蛋白酶抑素抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

 IGF I 胰島素樣生長因子I抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh MAGP2 纖微絲相關(guān)糖蛋白2抗體 規(guī)格 0.1ml

ALP-B(Human Bone-specific Alkphase B) ELISA Kit 人骨特異性堿性磷酸酶B 96T

RUBISCO 英文名稱： 核酮糖1,5二磷酸羧化酶抗體 0.1ml

CHI3L1 英文名稱： 軟骨糖蛋白39抗體 0.1ml

 IGF I 胰島素樣生長因子I抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Mouse  rat IgG/Cy5 Cy5標(biāo)記的小鼠抗大鼠IgG 0.1ml

GRIK3 英文名稱： 谷酸受體紅藻酸離子3/谷酸受體7抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh 14-3-3(Alpha/Beta/Gamma/Delta/Epsilon) 14-3-3蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

  Alpha-MSH/POMC /FITC 熒光素標(biāo)記α黑素細(xì)胞刺/阿黑皮素原抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh PSMD10/Proteasome 26S S10 蛋白酶調(diào)解因子10抗體 規(guī)格 0.2ml

 Tumstatin/Col4a3/FITC 熒光素標(biāo)記抑素抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
小鼠胰腺上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基電擊法酵母細(xì)胞轉(zhuǎn)化試劑盒20次BOC-L-天冬

酵母菌落直接PCR檢測試劑盒20/50次胰凝乳蛋白酶（牛）

酵母細(xì)胞溶解試劑盒20次卵白素（雞蛋）

酵母細(xì)胞凍存試劑盒50次透明質(zhì)酸鈉

酵母菌YPD培養(yǎng)基100毫升青霉素鈉

酵母菌YPD培養(yǎng)基500毫升替卡西林鈉

酵母菌DOB培養(yǎng)基100毫升*紅霉素

酵母菌DOBA培養(yǎng)基100毫升2′-氟脫氧胞苷

酵母菌YNB培養(yǎng)基100/500毫升脫氧核糖核酸（魚精）

酵母菌YNBA培養(yǎng)基100毫升菊糖

酵母菌SD-G培養(yǎng)基100毫升熒光

10倍酵母菌SD-G培養(yǎng)基100毫升對氨基

酵母菌SD-GAL/RAF培養(yǎng)基100毫升N,N,N,N-甲基乙二

10倍酵母菌SD-GAL/RAF培養(yǎng)基100毫升聚酰

酵母菌SD-LEU/TRP培養(yǎng)基100毫升水楊酸鈉