細(xì)胞特性：

1)】組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常眼組織,。

2)細(xì)胞鑒定：細(xì)胞免疫熒光染色為陽(yáng)性,。

3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%,。

4)不含有 HIV-1,、 HBV,、HCV,、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌。

5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式：上皮樣,，不規(guī)則細(xì)胞,，貼壁培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱：小鼠腮腺細(xì)胞*培養(yǎng)基

規(guī)格：100mL/125mL×4
貨號(hào)：YS-02X10253

細(xì)胞生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn) ：細(xì)胞生長(zhǎng)良好,，形態(tài)正常

儲(chǔ)存條件：2℃-8℃,，避光儲(chǔ)存

運(yùn)輸條件：冰袋冷藏運(yùn)輸
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1） 準(zhǔn)備RPMI-1640 培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%,；Glutamax（invitrogen 35050061），1%,；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070）,，1%；雙抗,，1%,。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%,；二氧化碳,，5%,。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。

3） 凍存液：90%血清,，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配,。

二． 細(xì)胞處理：

1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

注意事項(xiàng)：

（1）凍存前細(xì)胞狀態(tài),，細(xì)胞最好在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，細(xì)胞密度適合,，剛剛發(fā)生細(xì)胞融合,，過(guò)密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好，而且消化時(shí)不容易分散,；

（2）凍存的密度不宜過(guò)低,，10的6次方-7次方的數(shù)量級(jí)比較好，我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107）,，一瓶?jī)鲆还埽?.5ml凍存管）,，10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個(gè)細(xì)胞）分成兩管。

（3）消化和吹打,，切忌胰酶消化過(guò)度,，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡,。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦,，不是加入凍存液再吹打。

（4）離心后加入凍存液,。凍存液中FBS的用量對(duì)于細(xì)胞而言要求不是很嚴(yán)格,，我從10%-90%都用過(guò)，問(wèn)題不大,，個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了,，能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛,！另外，凍存液可以在處理細(xì)胞前配置,，放在4度冰箱預(yù)冷,。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸，移入凍存管,。

（5）關(guān)于“慢凍",，傳統(tǒng)的方法，細(xì)胞凍存管用棉花包好,，4度2h,，-20度2h或更長(zhǎng)，-80度過(guò)夜,，最后液氮,。對(duì)于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室，推薦使用程序降溫盒,，內(nèi)裝異丙醇,，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫，很方便,，省了包棉花,、4度、-20度了,。

使用步驟：

一）準(zhǔn)確稱量試劑：根據(jù)不同的菌類和用途,，選擇適宜的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈,。

（二）校正pH值：將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi),，標(biāo)記劃線，加熱溶解,，補(bǔ)充水分,，測(cè)定酸堿度，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計(jì)測(cè)定,。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi),。

（三）過(guò)濾：將玻璃漏斗置鐵架上，再用紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,，將上述培養(yǎng)基倒入其中過(guò)濾至透明,。

（四）分裝：將過(guò)濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶?jī)?nèi)（試管內(nèi)每支裝5mL；三角瓶中裝100～150ml）,，塞好棉塞用牛皮紙包扎好,，準(zhǔn)備滅菌。

（五）滅菌：培養(yǎng)基的滅菌,，常用高壓蒸汽滅菌法,。一般微生物的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死,，但細(xì)菌的芽胞有較強(qiáng)的抗熱性，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到*滅菌的目的,。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,，即壓力越大，蒸汽溫度就越高,。因此,，在同一溫度條件下，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好,。而且在濕熱情況下,，菌體吸收水分后，其蛋白質(zhì)易于凝固變性,，因?yàn)檎羝拇┩噶?qiáng),，殺菌效果好。

LDL-IC ELISA Kit 大鼠低密度脂蛋白復(fù)合物Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

 VCAM-1 血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh GAS2L1 生長(zhǎng)停滯特異性蛋白2家族1抗體 規(guī)格 0.2ml

OSM(Mouse Oncostatin-M) ELISA KIT 小鼠抑瘤素M 96T

phospho-IKB epsilon (Ser157) 英文名稱： 磷酸化KB抑制蛋白激酶ε 0.1ml

APOA2 英文名稱： 載脂蛋白A2抗體 0.1ml

 VCAM-1 血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

IGFBP-3(Human insulin-like growth factors binding protein 3) ELISA Kit 人胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白3Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

 GRM1 促代謝型谷受體1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh MOBKL2C Mob1同源蛋白MOBKL2C抗體 規(guī)格 0.2ml

AAA(Human  adrenocortical antibody) ELISA Kit 人抗腎上腺皮質(zhì)抗體 96T

RUNX1T1 英文名稱： 周期素D相關(guān)蛋白抗體 0.1ml

Phospho-Cofilin (Ser3) 英文名稱： 磷酸化絲切蛋白抗體 0.1ml

 GRM1 促代謝型谷受體1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Mouse  Rabbit IgM/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的小鼠抗兔IgM 0.1ml

GPR125 英文名稱： G蛋白偶聯(lián)受體125抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh 14-3-3 family protein 蘋(píng)果14-3-3蛋白抗體(植物) 規(guī)格 1ml

 MSK1/FITC 熒光素標(biāo)記有絲分裂原和應(yīng)激活化型蛋白激酶1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh PSGL-1/CD162 P選擇素糖蛋白配體1抗體 規(guī)格 0.1ml

Rabbit  human Fibrinogen/HRP 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記可溶性纖維蛋白原抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
小鼠腮腺細(xì)胞*培養(yǎng)基/酵母細(xì)胞β-半乳糖苷酶活性濾膜染色試劑盒20次蛋白酶（枯草桿菌）

小量/酵母細(xì)胞基因組DNA純化試劑盒20次肝素鈉

中量/酵母細(xì)胞基因組DNA純化試劑盒10次鏈脲佐菌素

大量/酵母細(xì)胞基因組DNA純化試劑盒10次胸腺嘧啶

裂解液IX：/酵母細(xì)胞裂解液50次2′-脫氧腺苷-5′-三磷酸三鈉鹽

裂解液IX：/酵母細(xì)胞強(qiáng)裂解液20次2′-脫氧胸苷-5′-二磷酸三鈉鹽

/酵母細(xì)胞可溶性總蛋白制備試劑盒20次基-β-環(huán)糊精

/酵母細(xì)胞可溶性總核蛋白制備試劑盒20次亞硝鈷鈉

/酵母細(xì)胞漿可溶性總蛋白制備試劑盒20次萘酚AS-TR乙酸酯

/酵母細(xì)胞壁可溶性總蛋白制備試劑盒20次鎢酸銀

/酵母細(xì)胞壁*可溶性總蛋白制備試劑盒20次大葉茜草素

/酵母細(xì)胞細(xì)胞壁分離試劑盒20次槲皮素-3-O-β-D- 葡萄糖

/酵母細(xì)胞染色質(zhì)沉淀分析（CHIP）試劑盒20次石斛堿

/酵母細(xì)胞染色質(zhì)沉淀分析（CHIP）*試劑盒20次五味子（北五味子）

（包括抗體）山藥