產(chǎn)品名稱：結(jié)腸粘膜上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基

規(guī)格：100mL/125mL×4
貨號(hào)：YS-02X10013

細(xì)胞生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn) ：細(xì)胞生長(zhǎng)良好，形態(tài)正常

儲(chǔ)存條件：2℃-8℃,，避光儲(chǔ)存

運(yùn)輸條件：冰袋冷藏運(yùn)輸
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞特性：

1)】組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常眼組織,。

2)細(xì)胞鑒定：細(xì)胞免疫熒光染色為陽(yáng)性,。

3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1,、 HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌,。

5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式：上皮樣，不規(guī)則細(xì)胞,，貼壁培養(yǎng),。

細(xì)胞培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1） 準(zhǔn)備RPMI-1640 培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%,；Glutamax（invitrogen 35050061），1%,；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070）,，1%；雙抗,，1%,。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%,；二氧化碳,，5%。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。

3） 凍存液：90%血清，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配,。

二． 細(xì)胞處理：

1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

注意事項(xiàng)：

（1）凍存前細(xì)胞狀態(tài)，細(xì)胞最好在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,，細(xì)胞密度適合,，剛剛發(fā)生細(xì)胞融合，過(guò)密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好,，而且消化時(shí)不容易分散,；

（2）凍存的密度不宜過(guò)低,，10的6次方-7次方的數(shù)量級(jí)比較好，我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107）,，一瓶?jī)鲆还埽?.5ml凍存管）,，10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個(gè)細(xì)胞）分成兩管。

（3）消化和吹打,，切忌胰酶消化過(guò)度,，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡,。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦,，不是加入凍存液再吹打。

（4）離心后加入凍存液,。凍存液中FBS的用量對(duì)于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很?chē)?yán)格,，我從10%-90%都用過(guò)，問(wèn)題不大,，個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了,，能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛！另外,，凍存液可以在處理細(xì)胞前配置,，放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸,，移入凍存管,。

（5）關(guān)于“慢凍"，傳統(tǒng)的方法,，LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好,，4度2h，-20度2h或更長(zhǎng),，-80度過(guò)夜,，最后液氮。對(duì)于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室,，推薦使用程序降溫盒,，內(nèi)裝異丙醇，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,，很方便,，省了包棉花、4度,、-20度了,。

TRAF2/TNF-R2 /FITC 熒光素標(biāo)記壞死因子受體相關(guān)因子2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

BRCA2(Breast cancer susceptbility gene 2) 癌易感基因2抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體/凋亡素2配體抗體  TRAIL/Apo2L 0.1ml

SPRR1a 英文名稱： 角質(zhì)蛋白α抗體 0.1ml

EBF2 英文名稱： 早期B細(xì)胞因子2抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-IRS1(Tyr1222) 磷酸化胰島素受體底物-1抗體 規(guī)格 0.1ml

BRCA2(Breast cancer susceptbility gene 2) 癌易感基因2抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

CTACK/CCL27(Human cutaneous T cell-attracting chemokine,CTACK) ELISA Kit 人皮膚T細(xì)胞虜獲趨化因子Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

 Phospho-FRA1 (Ser265) 磷酸化FRA-1蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh Mouse  rabbit IgG/Cy3 Cy3標(biāo)記的小鼠抗兔IgG 規(guī)格 0.1ml

HS(Human heparan sulfate) ELISA Kit 人類(lèi)肝素 96T

Steroid sulfatase 英文名稱： 類(lèi)固醇酯酶抗體 0.1ml

CINP 英文名稱： CDK2相互作用蛋白抗體 0.2ml

 Phospho-FRA1 (Ser265) 磷酸化FRA-1蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Mouse  rabbit IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的小鼠抗兔IgG 0.1ml

Phospho-FHIT (Tyr114) 英文名稱： 磷酸化脆性組酸三聯(lián)體抗體 0.1ml

抗Ⅱ型膠原抗體  Collagen Ⅱ 0.1ml

 Phospho-MAPKAPK2 (Thr334)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化原活化蛋白激酶活化的蛋白激酶2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh PIGR 多聚球蛋白受體抗體 規(guī)格 0.1ml

Goat  human IgM/Biotin 生物素化羊抗人IgMMulti-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
結(jié)腸粘膜上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基凍切片組織組蛋白NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20次人肽基脯氨酰順?lè)串悩?gòu)酶（PPI）ELISA試劑盒,

石蠟切片組織組蛋白NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20次人組織蛋白酶D（cath-D）ELISA試劑盒, cath-D ELISA

細(xì)胞組蛋白比色法定量檢測(cè)試劑盒20 次人胰肽原酶（PK）ELISA試劑盒, PK ELISA

細(xì)胞組蛋白熒光定量檢測(cè)試劑盒20 次人抗透明帶抗體（aZP）ELISA試劑盒,

組蛋白西方雜交分析試劑盒5次人球蛋白j鏈（Ig-j）ELISA試劑盒,

組蛋白染色質(zhì)沉淀（CHIP）分析試劑盒10/20次小鼠可溶性肌球蛋白重鏈1（sMHC-1）ELISA試劑盒,

細(xì)胞/組織裂解懸液、血液,、體液等組蛋白ELISA定量試劑盒24/48/96次小鼠多巴D1受體（D1R）ELISA試劑盒,

名稱規(guī)格大鼠可溶性白介素6受體（sIL-6R）ELISA試劑盒,

海洋動(dòng)物種系COI-5基因擴(kuò)增分析試劑盒20次大鼠腎損傷分子1（Kim-1）ELISA試劑盒,

海洋動(dòng)物種系18sRNA基因擴(kuò)增分析試劑盒20次大鼠生長(zhǎng)素（GH）ELISA試劑盒,

名稱規(guī)格大鼠抵抗素（Resistin）ELISA試劑盒,

通用型RFLP基因分析試劑盒20次大鼠復(fù)合前列腺特異性抗原（CPSA）ELISA試劑盒,

引物設(shè)計(jì)合成和酶切位點(diǎn)分析1個(gè)基因快速硫化氫試驗(yàn)瓊脂    用于彎曲桿菌的硫化氫試驗(yàn)（GB標(biāo)準(zhǔn)）

人體（apolipoprotein）RFLP基因分析試劑盒20次D-環(huán)絲    加入250ml TSC瓊脂基礎(chǔ)中

人體EIF-2AK3 RFLP基因分析試劑盒20次DL-半胱鹽酸鹽無(wú)水物

使用步驟：

一）準(zhǔn)確稱量試劑：根據(jù)不同的菌類(lèi)和用途,，選擇適宜的培養(yǎng)基,，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。

（二）校正pH值：將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi),，標(biāo)記劃線,，加熱溶解，補(bǔ)充水分,，測(cè)定酸堿度,，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計(jì)測(cè)定。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi),。

（三）過(guò)濾：將玻璃漏斗置鐵架上,，再用人子宮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中，將上述培養(yǎng)基倒入其中過(guò)濾至透明,。

（四）分裝：將過(guò)濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶?jī)?nèi)（試管內(nèi)每支裝5mL,；三角瓶中裝100～150ml），塞好棉塞用牛皮紙包扎好,，準(zhǔn)備滅菌,。

（五）滅菌：培養(yǎng)基的滅菌，常用高壓蒸汽滅菌法,。一般微生物的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死,，但細(xì)菌的芽胞有較強(qiáng)的抗熱性，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到*滅菌的目的,。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,，即壓力越大，蒸汽溫度就越高,。因此,，在同一溫度條件下，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好,。而且在濕熱情況下,，菌體吸收水分后，其蛋白質(zhì)易于凝固變性,，因?yàn)檎羝拇┩噶?qiáng),，殺菌效果好。