產(chǎn)品名稱：小氣道平滑肌細胞*培養(yǎng)基

規(guī)格：100mL/125mL×4
貨號：YS-02X9986

細胞生長實驗 ：細胞生長良好,，形態(tài)正常

儲存條件：2℃-8℃，避光儲存

運輸條件：冰袋冷藏運輸
公司產(chǎn)品僅用于科研

細胞培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1） 準(zhǔn)備RPMI-1640 培養(yǎng)基,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%；Glutamax（invitrogen 35050061）,，1%,；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070），1%,；雙抗,，1%。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳，5%,。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%血清,，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配。

二． 細胞處理：

1） 復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?50px皿中，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并檢查細胞密度。

2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng)。

注意事項：

（1）凍存前細胞狀態(tài),，細胞最好在對數(shù)生長期,，細胞密度適合，剛剛發(fā)生細胞融合,，過密或連成片的細胞狀態(tài)不好,，而且消化時不容易分散；

（2）凍存的密度不宜過低,，10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好,，我凍存的細胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107）,，一瓶凍一管（1.5ml凍存管），10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個細胞）分成兩管,。

（3）消化和吹打,，切忌胰酶消化過度，吹打不可太用力,，最好不要吹出好多泡泡,。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦，不是加入凍存液再吹打,。

（4）離心后加入凍存液,。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細胞株而言要求不是很嚴(yán)格，我從10%-90%都用過,，問題不大,，個人認(rèn)為10%-20%可以了，能節(jié)約處就節(jié)約點嘛,！另外,，凍存液可以在處理細胞前配置，放在4度冰箱預(yù)冷,。細胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸,，移入凍存管。

（5）關(guān)于“慢凍",，傳統(tǒng)的方法,，LLC細胞凍存管用棉花包好，4度2h,，-20度2h或更長,，-80度過夜，最后液氮,。對于條件較好的實驗室和細胞凍存數(shù)量多的實驗室,，推薦使用程序降溫盒，內(nèi)裝異丙醇,，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,，很方便，省了包棉花,、4度,、-20度了。

使用步驟：

一）準(zhǔn)確稱量試劑：根據(jù)不同的菌類和用途,，選擇適宜的培養(yǎng)基,，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。

（二）校正pH值：將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi),，標(biāo)記劃線,，加熱溶解,，補充水分，測定酸堿度,，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計測定,。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi)。

（三）過濾：將玻璃漏斗置鐵架上,，再用人子宮成纖維細胞*培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,，將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明。

（四）分裝：將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(nèi)（試管內(nèi)每支裝5mL,；三角瓶中裝100～150ml）,，塞好棉塞用牛皮紙包扎好，準(zhǔn)備滅菌,。

（五）滅菌：培養(yǎng)基的滅菌,，常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養(yǎng)細胞在水中煮沸后即被殺死,，但細菌的芽胞有較強的抗熱性,，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達到*滅菌的目的。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,，即壓力越大,，蒸汽溫度就越高。因此,，在同一溫度條件下,，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下,，菌體吸收水分后,，其蛋白質(zhì)易于凝固變性，因為蒸汽的穿透力強,，殺菌效果好,。

細胞特性：

1)】組織來源于實驗動物的正常眼組織。

2)細胞鑒定：細胞免疫熒光染色為陽性,。

3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%,。

4)不含有 HIV-1、 HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌,。

5)細胞生長方式：上皮樣,，不規(guī)則細胞,，貼壁培養(yǎng),。
Slug/FITC 熒光素標(biāo)記鋅指轉(zhuǎn)錄因子Slug抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Caspase-6 (CT) 半胱胺酸蛋白酶蛋白-6(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

核小體結(jié)合蛋白1抗體  NSBP1 0.2ml

SORCS3 英文名稱： 液泡蛋白分選受體SORCS3抗體 0.2ml

E2F8 英文名稱： 轉(zhuǎn)錄因子E2F8抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-Nur77(Ser351) 磷酸化孤兒核受體蛋白Nur77抗體 規(guī)格 0.1ml

Caspase-6 (CT) 半胱胺酸蛋白酶蛋白-6(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

BFGF 大鼠堿性成纖維細胞因子Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

 eIF2 alpha 真核啟動因子2α抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh MyD88 髓樣分化蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

EMP(Human erythrocyte membrane protein) ELISA Kit 人紅細胞膜蛋白 96T

Synaptotagmin 1 英文名稱： 突觸結(jié)合蛋白1抗體 0.2ml

SLC7A5 英文名稱： CD98輕鏈抗體 0.1ml

 eIF2 alpha 真核啟動因子2α抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Goat  Mouse IgM/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的羊抗小鼠IgM 0.1ml

FOXF1 英文名稱： 叉頭蛋白F1抗體 0.2ml

間隙連接蛋白45抗體  CX45 0.1ml

 Phospho-p63 (Ser455)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化P63抑制基因抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-Vimentin(Ser82) 磷酸化波形蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

Rabbit  monkey IgM/Biotin 生物素化兔抗猴IgMMulti-class antibodies規(guī)格： 0.3ml
小氣道平滑肌細胞*培養(yǎng)基GMS10電擊感受態(tài)轉(zhuǎn)化試劑盒10次緩沖蛋白胨水（BPW）

pZERO載體克隆鑒定試劑盒20次酪 蛋白胨    干酪素胰酶水解而成，培養(yǎng)基原材料

PCR產(chǎn)物末端平滑處理試劑盒20次DL-脯

DNA產(chǎn)物磷酸化處理試劑盒10次L-甘-白二肽

載體/DNA產(chǎn)物去磷酸化處理試劑盒10次D-甘乙酯鹽酸鹽

5’端銜接體（LINKER）連接試劑盒20次川陳皮素 Nobiletin

3’端銜接體（LINKER）連接試劑盒20次羧甲基纖維素CM-23

適配體（ADAPTER）連接試劑盒10次氧化金

鈣轉(zhuǎn)試劑盒20次L-α-氨基戊二酸

通用型CHIP DNA分子克隆試劑盒10次人抗神經(jīng)節(jié)苷脂抗體（GM1）ELISA試劑盒,GM1 ELISA kit

通用型CHIP DNA分子庫構(gòu)建試劑盒10次人抗肝膜抗體（LMA）ELISA試劑盒,LMA ELISA kit

高效CHIP DNA分子克隆試劑盒10次人抗丁型肝炎病抗體（anti-HDV）ELISA試劑盒, anti-HDV ELISA

高效CHIP DNA分子庫構(gòu)建試劑盒10次人乙醛脫氫酶（ALDH）ELISA試劑盒,ALDH ELISA

PCR反應(yīng)試劑專題人肌酸酶（CK）ELISA試劑盒,

名稱規(guī)格人肽釋放酶8（KLK 8）ELISA試劑盒,