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產(chǎn)品型號(hào)
品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)經(jīng)銷(xiāo)商
所 在 地上海市
更新時(shí)間:2022-03-23 13:12:15瀏覽次數(shù):220次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 化工儀器網(wǎng)供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100mL/125mL×4 |
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貨號(hào) | YS-02X10315 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研使用 |
細(xì)胞特性:
1)】組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常眼組織,。
2)細(xì)胞鑒定:細(xì)胞免疫熒光染色為陽(yáng)性,。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1,、 HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌,。
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式:上皮樣,不規(guī)則細(xì)胞,,貼壁培養(yǎng),。
產(chǎn)品名稱(chēng):小鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞*培養(yǎng)基
規(guī)格:100mL/125mL×4
貨號(hào):YS-02X10315
細(xì)胞生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn) :細(xì)胞生長(zhǎng)良好,形態(tài)正常
儲(chǔ)存條件:2℃-8℃,,避光儲(chǔ)存
運(yùn)輸條件:冰袋冷藏運(yùn)輸
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞培養(yǎng)步驟
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備RPMI-1640 培養(yǎng)基,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%,;Glutamax(invitrogen 35050061),,1%;Sodium pyruvate(invitrogen 11360070),,1%,;雙抗,1%,。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%;二氧化碳,,5%,。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3) 凍存液:90%血清,,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中,,加入約8ml培養(yǎng)基,,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
注意事項(xiàng):
(1)凍存前細(xì)胞狀態(tài),,細(xì)胞最好在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,,細(xì)胞密度適合,剛剛發(fā)生細(xì)胞融合,過(guò)密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好,,而且消化時(shí)不容易分散,;
(2)凍存的密度不宜過(guò)低,10的6次方-7次方的數(shù)量級(jí)比較好,,我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),,一瓶?jī)鲆还埽?.5ml凍存管),10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個(gè)細(xì)胞)分成兩管,。
(3)消化和吹打,,切忌胰酶消化過(guò)度,吹打不可太用力,,最好不要吹出好多泡泡,。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦,不是加入凍存液再吹打,。
(4)離心后加入凍存液,。凍存液中FBS的用量對(duì)于細(xì)胞而言要求不是很?chē)?yán)格,我從10%-90%都用過(guò),,問(wèn)題不大,,個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了,能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛,!另外,,凍存液可以在處理細(xì)胞前配置,放在4度冰箱預(yù)冷,。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸,,移入凍存管。
(5)關(guān)于“慢凍",,傳統(tǒng)的方法,,細(xì)胞凍存管用棉花包好,4度2h,,-20度2h或更長(zhǎng),,-80度過(guò)夜,最后液氮,。對(duì)于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室,,推薦使用程序降溫盒,內(nèi)裝異丙醇,,在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,,很方便,,省了包棉花,、4度、-20度了,。
使用步驟:
一)準(zhǔn)確稱(chēng)量試劑:根據(jù)不同的菌類(lèi)和用途,,選擇適宜的培養(yǎng)基,,培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。
(二)校正pH值:將稱(chēng)量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi),,標(biāo)記劃線(xiàn),,加熱溶解,補(bǔ)充水分,,測(cè)定酸堿度,,常用pH6.8~8.0的精密試紙或酸度計(jì)測(cè)定。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi),。
(三)過(guò)濾:將玻璃漏斗置鐵架上,,再用紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,將上述培養(yǎng)基倒入其中過(guò)濾至透明,。
(四)分裝:將過(guò)濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶?jī)?nèi)(試管內(nèi)每支裝5mL,;三角瓶中裝100~150ml),塞好棉塞用牛皮紙包扎好,,準(zhǔn)備滅菌,。
(五)滅菌:培養(yǎng)基的滅菌,常用高壓蒸汽滅菌法,。一般微生物的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死,,但細(xì)菌的芽胞有較強(qiáng)的抗熱性,須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到*滅菌的目的,。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,,即壓力越大,蒸汽溫度就越高,。因此,,在同一溫度條件下,采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好,。而且在濕熱情況下,,菌體吸收水分后,其蛋白質(zhì)易于凝固變性,,因?yàn)檎羝拇┩噶?qiáng),,殺菌效果好。
MPO ELISA Kit 大鼠髓過(guò)氧化物酶Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Tyk2/Non receptor tyrosine protein kinase 2 非受體酪蛋白激酶2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh GDF9 生長(zhǎng)分化因子9抗體 規(guī)格 0.1ml
Bcl-2 ELISA Kit 大鼠B細(xì)胞瘤因子2 96T
Nogo-A 英文名稱(chēng): 軸索過(guò)度生長(zhǎng)抑制因子-A抗體 0.1ml
ASAP3 英文名稱(chēng): GTP酶激活蛋白ASAP3抗體 0.2ml
Tyk2/Non receptor tyrosine protein kinase 2 非受體酪蛋白激酶2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
ChRM2 (Muscarinic Acetylcholine receptor M2) 毒蕈堿型乙酰膽堿受體M2(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
CCL21/6Ckine 細(xì)胞趨化因子CCL21抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh PCDH7 原鈣粘蛋白7抗體 規(guī)格 0.2ml
METTL1 Kit Human 人 METTL1 ELISA配對(duì)抗體 ELISA
RNF89 英文名稱(chēng): 環(huán)指蛋白89 0.2ml
CaMK2 alpha 英文名稱(chēng): 鈣/鈣調(diào)素依賴(lài)蛋白激酶2α抗體 0.1ml
CCL21/6Ckine 細(xì)胞趨化因子CCL21抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Avidin/HRP 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的兔抗親和素 0.1ml
phospho-GSK-3 Beta(Thr390) 英文名稱(chēng): 磷酸化糖原合酶激酶3β抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh ABHD5 自水解酶結(jié)構(gòu)域5蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
Phospho-MKK3 (Ser189)/MKK6 (Ser207) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化原活化蛋白激酶MKK3/6抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh RAB9 ras癌基因家族Rab9蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
TRAF1/FITC 熒光素標(biāo)記壞死因子受體相關(guān)因子1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
小鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞*培養(yǎng)基N-乙酰轉(zhuǎn)移酶(NAT)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次黨參炔苷
植物N-乙酰轉(zhuǎn)移酶(NAT)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次6,7-二甲氧基
人體細(xì)胞N-乙酰轉(zhuǎn)移酶1(NAT1)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次4'-去甲基鬼臼素
人體組織N-乙酰轉(zhuǎn)移酶1(NAT1)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次同源盒基因的一種Anti-HOXc8
人體細(xì)胞N-乙酰轉(zhuǎn)移酶2(NAT2)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次抑制素α抗體流式組化
人體組織N-乙酰轉(zhuǎn)移酶2(NAT2)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次DL-甘氨醇
人體細(xì)胞N-乙酰轉(zhuǎn)移酶1(NAT1)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒20次D-色
人體組織N-乙酰轉(zhuǎn)移酶1(NAT1)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒20次L-甘-谷二肽
人體細(xì)胞N-乙酰轉(zhuǎn)移酶2(NAT2)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒20次D-亮甲酯鹽酸鹽
人體組織N-乙酰轉(zhuǎn)移酶2(NAT2)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒20次N-乙酰-L-脯
動(dòng)物細(xì)胞N-乙酰轉(zhuǎn)移酶1(NAT1)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次葡萄糖氧化酶
動(dòng)物組織N-乙酰轉(zhuǎn)移酶1(NAT1)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次透明質(zhì)酸酶
動(dòng)物細(xì)胞N-乙酰轉(zhuǎn)移酶2(NAT2)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次n-辛基-β-D-吡喃葡萄糖苷
動(dòng)物組織N-乙酰轉(zhuǎn)移酶2(NAT2)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次2′-脫氧鳥(niǎo)苷
通用型N-乙酰轉(zhuǎn)移酶(NAT)活性高效液相層析法(HPLC)定量檢測(cè)試劑盒20次乙二乙酸二鈉鎂鹽水物
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