產(chǎn)品名稱：小鼠胎兒表皮角質(zhì)形成層細(xì)胞*培養(yǎng)基

規(guī)格：100mL/125mL×4
貨號(hào)：YS-02X10313

細(xì)胞生長實(shí)驗(yàn) ：細(xì)胞生長良好，形態(tài)正常

儲(chǔ)存條件：2℃-8℃,，避光儲(chǔ)存

運(yùn)輸條件：冰袋冷藏運(yùn)輸
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞特性：

1)】組織來源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常眼組織,。

2)細(xì)胞鑒定：細(xì)胞免疫熒光染色為陽性。

3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%,。

4)不含有 HIV-1,、 HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌,。

5)細(xì)胞生長方式：上皮樣,，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng),。

細(xì)胞培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1） 準(zhǔn)備RPMI-1640 培養(yǎng)基,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%,；Glutamax（invitrogen 35050061）,，1%,；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070）,，1%；雙抗,，1%,。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%,；二氧化碳,，5%。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。

3） 凍存液：90%血清，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配,。

二． 細(xì)胞處理：

1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

注意事項(xiàng)：

（1）凍存前細(xì)胞狀態(tài),，細(xì)胞最好在對數(shù)生長期,，細(xì)胞密度適合，剛剛發(fā)生細(xì)胞融合,，過密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好,，而且消化時(shí)不容易分散；

（2）凍存的密度不宜過低,，10的6次方-7次方的數(shù)量級(jí)比較好,，我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107），一瓶凍一管（1.5ml凍存管）,，10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個(gè)細(xì)胞）分成兩管,。

（3）消化和吹打，切忌胰酶消化過度,，吹打不可太用力,，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦,，不是加入凍存液再吹打,。

（4）離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于細(xì)胞而言要求不是很嚴(yán)格,，我從10%-90%都用過,，問題不大，個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了,，能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛,！另外，凍存液可以在處理細(xì)胞前配置,，放在4度冰箱預(yù)冷,。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸，移入凍存管,。

（5）關(guān)于“慢凍",，傳統(tǒng)的方法,，細(xì)胞凍存管用棉花包好，4度2h,，-20度2h或更長,，-80度過夜，最后液氮,。對于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室,，推薦使用程序降溫盒，內(nèi)裝異丙醇,，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,，很方便，省了包棉花,、4度,、-20度了。

C4 ELISA Kit 大鼠補(bǔ)體蛋白4Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

 Tyrosinase 酪酶抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh GDF15/MIC-1 生長分化因子15/巨嗜細(xì)胞抑制因子1抗體 規(guī)格 0.1ml

Casp-3 ELISA Kit 大鼠胱天蛋白酶3 96T

NMDAR1 英文名稱： 谷酸受體1抗體 0.1ml

ADAM9 英文名稱： 去整合素樣金屬蛋白酶9抗體 0.2ml

 Tyrosinase 酪酶抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

BCL-2(humen) 人細(xì)胞凋亡相關(guān)基因BCL-2Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

 CK17 細(xì)胞角蛋白17抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh NSBP1 核小體結(jié)合蛋白1抗體 規(guī)格 0.1ml

Immobilon-Nc Membrane ,、mixed cellulose esters,、0.45um 纖維素膜(NC膜;膜孔徑0.45um) 13X20CM

RNF92 英文名稱： 環(huán)指蛋白92抗體 0.2ml

C9orf131 英文名稱： 9號(hào)染色體開放閱讀框131抗體 0.2ml

 CK17 細(xì)胞角蛋白17抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rabbit  Avidin/AP 堿性磷酸酶(AP)標(biāo)記的兔抗親和素 0.1ml

GRB10 英文名稱： 生長因子受體結(jié)合蛋白10抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh ABHD3 肺α/β水解酶蛋白3抗體 規(guī)格 0.2ml

 Phospho-MK6 (Ser202)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化原活化蛋白激酶MKK6抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh RAB8 ras癌基因家族Rab8蛋白抗體(原癌基因c MEL) 規(guī)格 0.1ml

 TRAF3/CD40bp /FITC 熒光素標(biāo)記CD40結(jié)合蛋白/CD40受體相關(guān)因子1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
小鼠胎兒表皮角質(zhì)形成層細(xì)胞*培養(yǎng)基水質(zhì)汞元素比色法定量檢測試劑盒20次酪

土壤汞元素比色法定量檢測試劑盒20次商陸皂苷甲

魚類組織汞元素比色法定量檢測試劑盒20次天冬

細(xì)胞汞元素比色法定量檢測試劑盒20次對氯酚

組織汞元素比色法定量檢測試劑盒20次成骨特異性轉(zhuǎn)錄因子抗體流式組化

血液汞元素比色法定量檢測試劑盒20次代謝型谷受體3

體液汞元素比色法定量檢測試劑盒20次3，5-二-L-甲腺

毛發(fā)汞元素比色法定量檢測試劑盒20次甘鋅

通用型砷元素比色法定量檢測試劑盒20次L-精L-天冬鹽

水質(zhì)砷元素比色法定量檢測試劑盒20次復(fù)合蛋白酶

土壤砷元素比色法定量檢測試劑盒20次乳酸過氧化物酶

魚類組織砷元素比色法定量檢測試劑盒20次無水硼酸鈉

細(xì)胞砷元素比色法定量檢測試劑盒20次1,3-

組織砷元素比色法定量檢測試劑盒20次對二甲醛

血液砷元素比色法定量檢測試劑盒20次偏磷酸鈉

使用步驟：

一）準(zhǔn)確稱量試劑：根據(jù)不同的菌類和用途,，選擇適宜的培養(yǎng)基,，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。

（二）校正pH值：將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi),，標(biāo)記劃線,，加熱溶解，補(bǔ)充水分,，測定酸堿度,，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計(jì)測定。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi),。

（三）過濾：將玻璃漏斗置鐵架上,，再用紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,，將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明,。

（四）分裝：將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(nèi)（試管內(nèi)每支裝5mL,；三角瓶中裝100～150ml）,，塞好棉塞用牛皮紙包扎好,，準(zhǔn)備滅菌。

（五）滅菌：培養(yǎng)基的滅菌,，常用高壓蒸汽滅菌法,。一般微生物的營養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死，但細(xì)菌的芽胞有較強(qiáng)的抗熱性,，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到*滅菌的目的,。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,，即壓力越大，蒸汽溫度就越高,。因此,，在同一溫度條件下，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好,。而且在濕熱情況下,，菌體吸收水分后，其蛋白質(zhì)易于凝固變性,，因?yàn)檎羝拇┩噶?qiáng),，殺菌效果好。