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原代細胞嚴(yán)格無菌操作,,多噴噴酒精,,要是對滅菌的東西不放心,自己包自己送自己烘干,。不要和別人共用試劑耗材,,自己準(zhǔn)備一套。有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測,。水浴鍋很臟,,生化培養(yǎng)箱要是得手動...
除非原代細胞產(chǎn)品說明書上另有特別說明,否則所有PeproTech蛋白產(chǎn)品都為凍干粉形式,,在室溫下也能保持很好的穩(wěn)定性,。但是,我們推薦凍干產(chǎn)品保存于-20℃,。大多數(shù)凍干產(chǎn)品經(jīng)溶解和稀釋后,,可短時間保存于...
原代細胞凍存是細胞保存的主要方法之一。利用凍存技術(shù)將細胞置于一196~C液氮中低溫保存,,可以使細胞暫時脫離生長狀態(tài)而將其細胞特性保存起來,,這樣在需要的時候再復(fù)蘇細胞用于實驗。而且適度地保存一定量的細胞...
原代細胞的選擇透過性:這種膜可以讓水分子自由通過,,細胞要選擇吸收的離子和小分子(如:氨基酸,、葡萄糖)也可以通過,而其它的離子,、小分子和大分子(如:信使RNA,、蛋白質(zhì)、核酸,、蔗糖)則不能通過,。膜蛋白:指...
zui常用的細胞系方法是檢測96孔細胞培養(yǎng)板中蛋白的濃度;另外一個方法是讓細胞在軟瓊脂上生長形成集落,然后利用原位免疫沉淀技術(shù)獲得高產(chǎn)細胞,。近年來,,發(fā)展起來的高通量自動化篩選技術(shù)也被受關(guān)注。為實現(xiàn)克隆...
雖然細胞株DNA突變是物種進化的原動力,,但突變帶來的損傷也往往是危害極大的,。因此,物種自身進化出了保護自己不受基因突變帶來的損傷的修復(fù)機制,。其中一類機制叫做“DNA錯配損傷修復(fù)”,,它能夠改變由于基因在...
腫瘤細胞建立起線粒體這一細胞的發(fā)電所來增加氧化作用。線粒體大量生成氧自由基損害DNA,,zui終造成了細胞周期阻滯,。Sadek博士說:“我們發(fā)現(xiàn)了以往未知的一個介導(dǎo)心肌細胞周期阻滯的保護機制,其是因氧依...
細胞系培養(yǎng)板的加樣和操作:細胞培養(yǎng)板在進行細胞操作時同樣遵循嚴(yán)格無菌的原則,,各項操作要保證規(guī)范,、科學(xué),不對細胞的生長造成額外的影響,。這其中zui常見的問題就是如何保證加樣后細胞的均勻和盡量減少換液對細...
原代細胞是zui簡單的檢測細胞生長的方法,。計數(shù)細胞一般利用臺盼藍(錐蟲藍染色,臺盼藍(錐蟲藍)不能透過活細胞正常完整的細胞膜,,故活細胞不著色,。而死亡細胞的細胞膜通透性增高,可使染料進入細胞內(nèi)而使細胞著...
原代細胞在酶的作用下,,由它再進一步生成一組旁分泌激素物質(zhì),,如血栓素和前列腺素等,這類物質(zhì)對調(diào)節(jié)血管口徑和通透性有明顯的作用,,還能引起炎癥反應(yīng)和疼痛,,并影響血液凝固。中性粒細胞內(nèi)含許多彌散分布的細小的淺...
傳統(tǒng)的原代細胞培養(yǎng)主要是通過顯微鏡下形態(tài)學(xué)變化以及傳代培養(yǎng)周期的變化預(yù)估細胞生長生存狀態(tài),。這種主觀判斷既無法量化,,也無法進行統(tǒng)計學(xué)分析,。因此,,目前對細胞存活質(zhì)量的判斷并沒有準(zhǔn)確、客觀的統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn),,并且對...
總結(jié)細胞株不貼壁可能原因如下:●胰蛋白酶消化過度●支原體污染●培養(yǎng)基pH值過堿(NaHCO3分解)●細胞老化●接種細胞起始濃度太低或太高解決方法:●縮短胰蛋白酶消化時間或降低胰蛋白酶濃度●分離培養(yǎng)物,...
原代細胞實驗中正常機體的T淋巴細胞在體外培養(yǎng)過程中受到特異性抗原或有絲分裂原刺激,??赊D(zhuǎn)化為淋巴母細胞。細胞免疫缺陷時,,患惡性腫瘤或某些其他疾病時,。轉(zhuǎn)化率顯然降低,。目前zui常用植物血凝素(PHA)作為...
細胞株實驗室低溫保存設(shè)備包括:液氮保存箱、液氮罐,、-140℃/-150℃深冷低溫保存箱,、-86℃超低溫冰箱、程控降溫儀,、低溫冰箱(-20℃,、-30℃、-40℃),、藥品保存箱,、疫苗保存箱、血庫冰箱,、層析...
原代細胞實驗試劑1.細胞營養(yǎng)液(DMEM液體培養(yǎng)基,,10%胎牛血清,雙抗100單位/ml),,消化液(0.05%胰酶,,0.53mMEDTA·Na),Hank’s液,。2.2×HBS液(280mMNaCl,...
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