zui常用的細胞系方法是檢測96孔細胞培養(yǎng)板中蛋白的濃度,；另外一個方法是讓細胞在軟瓊脂上生長形成集落,，然后利用原位免疫沉淀技術獲得高產(chǎn)細胞,。近年來，發(fā)展起來的高通量自動化篩選技術也被受關注,。
   為實現(xiàn)克隆的高表達,，在有些情況下外源基因擴增，比如以CHO用作宿主細胞,；有些情況則不需要,，比如雜交瘤細胞。為了實現(xiàn)外源基因的擴增,，將細胞在高濃度的擴增標記（比如dhfr）抑制劑的壓力下生長,。細胞存活需要擴增標記。高濃度的抑制劑能夠殺死除擁有多個擴增標記基因以外的絕大多數(shù)細胞,。在標記基因擴增的過程中,，與它相鄰的基因也隨之發(fā)生擴增?；蚩截悢?shù)的增加導致轉錄和翻譯水平的提高,。在這個過程中，某些高產(chǎn)細胞株重組IgG重鏈的轉錄水平成為細胞內zui高,。另一方面,，過高的蛋白表達可能會超過細胞內蛋白折疊的限度，內質網(wǎng)中發(fā)生未折疊蛋白效應導致細胞凋亡,。因此沒有建立起與高表達相匹配的其它結構的細胞可能不能存活,。
     基因擴增后的細胞既含有多個拷貝的外源基因，能高水平的表達目的基因和抗性基因,，還具備了強大的蛋白分泌能力,。除此之外,，高產(chǎn)細胞株還應具備高密度培養(yǎng)和能維持較長平臺期的能力。
    基因擴增后的細胞可以視為一個細胞“Pool”,，其中含有眾多不同遺傳背景的細胞,，或是基因插入位點的不同，或是擴增程度的不同等等,。因此基因擴增后下一步是細胞的單克隆化,。單克隆化是利用流式細胞儀或有限稀釋法或其他自動化方式(0.2個細胞/孔)將細胞接種到多孔板中?？梢哉J為從某一特定孔里長出的細胞都是由早期的一個細胞分裂而來,，他們在遺傳上是同源的。
     單克隆化后需要對獲得的細胞系進行初步的評價,。主要包括生長特性,，產(chǎn)品質量的評價。有些情況下需要將細胞馴化到更接近模式的條件下,，進行培養(yǎng),。
3x1.5ml    Methyl Alcohol     67-56-1     甲醇標準品
4.5oz            氟化牙粉：氟化鈉/二氧化硅標準品
4.6oz            氟化牙粉：單氟磷酸鈉-碳酸鈣標準品
4.6oz            氟化牙粉：單氟磷酸鈉/磷酸氫鈣標準品
400mg    Zidovudine     30516-87-1     齊多夫定標準品
400mg    Trehalose     6138-23-4     海藻糖標準品
400mg    Tilmicosin     108050-54-0     替米考星標準品
400mg    Sucralose     56038-13-2     三氯蔗糖標準品
400mg    Sodium Starch Glycolate Type B    9063-38-1     羧甲基淀粉鈉標準品（B型）
400mg    Sodium Starch Glycolate Type A    9063-38-1     羧甲基淀粉鈉標準品（A型）
400mg    Quinapril Hydrochloride     82586-55-8     鹽酸喹那普利標準品
400mg    Octisalate (Octyl Salicylate)    118-60-5     水楊酸乙基己酯標準品
細胞系