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細(xì)胞株凍存技術(shù)綜述

時間:2018-3-5閱讀:242
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細(xì)胞株實驗室低溫保存設(shè)備包括:液氮保存箱,、液氮罐,、-140℃/-150℃深冷低溫保存箱、-86℃超低溫冰箱,、程控降溫儀,、低溫冰箱(-20℃、-30℃,、-40℃),、藥品保存箱、疫苗保存箱,、血庫冰箱,、層析柜、防爆冰箱,、防火冰箱等,。
檢驗冰箱可靠性和制冷能力的方法:1、常規(guī)冰箱放置溫度計,;2,、超低溫冰箱放置加熱器、大量樣品或反復(fù)開門
  
凍存保護(hù)劑
很多化合物都可以作為凍存保護(hù)劑,,它們既可以單獨使用也可以聯(lián)合使用,,例如糖、血清和去污劑,。雖然凍存沒有的準(zhǔn)則,,但是大家普遍認(rèn)為二甲基亞砜(DMSO)和甘油是保護(hù)活細(xì)胞和組織使用zui廣泛且zui有效的凍存保護(hù)劑。其他凍存保護(hù)劑可根據(jù)情況使用,,可單獨使用也可聯(lián)合使用,,包括:聚乙烯乙二醇(polyethylene glycol),丙烯乙二醇(propylene  glycol),,甘油(glycerine),,聚乙烯吡咯烷酮(polyvinylpyrolidone),山梨醇(sorbitol),,右旋糖苷(dextran),,海藻糖(trehalose)。
凍存組織和整個器官的需求,,促進(jìn)了凍存方法的發(fā)展,,新方法也提高了凍存細(xì)胞和有機(jī)體的復(fù)蘇,。這些方法包括改變凍存保護(hù)劑的濃度和加入添加劑,避免凍存過程引發(fā)的細(xì)胞調(diào)亡或 程序性死亡,。多年來人們一直認(rèn)為,,是凍存過程中產(chǎn)生的細(xì)胞內(nèi)物理變化或損壞,造成凍存后細(xì)胞的死亡,。而zui近有研究發(fā)現(xiàn),,一些更為精細(xì)的胞內(nèi)活動可能導(dǎo)致了細(xì)胞死亡,而這些活動可在一定程度上受控于適當(dāng)?shù)膬龃嫣砑觿?br />細(xì)胞株凍存過程中,,凍存保護(hù)劑有多種功能,。例如,DMSO 可以降低冰點,,促進(jìn)細(xì)胞在胞內(nèi)冰晶形成之前脫水更加*,。普遍認(rèn)為,當(dāng)凍存保護(hù)劑可有效穿透細(xì)胞,,延遲胞內(nèi)冰晶形成,,降低溶液效應(yīng)時,凍存保護(hù)的效果*,。另外,,需要根據(jù)凍存的細(xì)胞類型來選擇凍存保護(hù)劑。對絕大多數(shù)細(xì)胞來說,,甘油是更好的選擇,,因為它的毒性比DMSO 小。但是,,DMSO 具有更好的滲透性,, 通常作為較大型較復(fù)雜的細(xì)胞凍存,如原生生物,。在添加到細(xì)胞懸液之前,凍存保護(hù)劑應(yīng)該用新鮮培養(yǎng)基稀釋到適宜濃度,,這能zui小化潛在的化學(xué)反應(yīng)損害,,并確保細(xì)胞能均一接觸到保護(hù)劑,減少毒害效應(yīng),。DMSO 和甘油通常使用的濃度范圍為 5-10%(v/ v),。除了用于植物細(xì)胞,二者一般不聯(lián)合使用,。
1205003    Diltiazem Hydrochloride    鹽酸地爾硫卓標(biāo)準(zhǔn)品    200mg
3801/6/7    Fluorometholone Acetate     氟米龍醋酸酯標(biāo)準(zhǔn)品    200mg
3704/9/4    Mibolerone CIII    米勃龍標(biāo)準(zhǔn)品    200mg
2391/3/9    Dexbrompheniramine Maleate    右旋溴苯那敏馬來酸鹽標(biāo)準(zhǔn)品    200mg
2321/7/5    Fluorescein    熒光素標(biāo)準(zhǔn)品    200mg
2315/2/8    Oxymetazoline Hydrochloride     鹽酸羥甲唑啉標(biāo)準(zhǔn)品    200mg
1987/8/1    Penicillin V     青霉素V標(biāo)準(zhǔn)品    200mg
1984/2/6    Prochlorperazine Maleate     馬來酸丙氯拉嗪標(biāo)準(zhǔn)品    200mg
1981/7/2    Saccharin    糖精標(biāo)準(zhǔn)品    200mg
1977/6/5    Gibberellic Acid    赤霉酸標(biāo)準(zhǔn)品    200mg
細(xì)胞株

 

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