產(chǎn)品名稱：海藻糖6磷酸酯酶(TPP)微量法測(cè)試盒
規(guī)格 : 100管/48樣
測(cè)試方法: 微量法
貨號(hào)：GOY-01S6716
分類：海藻糖系列
商品介紹：
海藻糖是功能性低聚糖,，具有非還原性、保濕性,、熱酸穩(wěn)定性,、抗凍結(jié)性等特性，是細(xì)胞在不良環(huán)境條件下產(chǎn)生的一種重要的抗逆應(yīng)激物之一,，它對(duì)生物大分子和生物體組織有著非特異性的保護(hù)作用,。海藻糖合成酶（Trehalose Synthase）催化麥芽糖合成海藻糖，是海藻糖生物合成的關(guān)鍵途徑之一,。

測(cè)定原理：

TS催化麥芽糖產(chǎn)生海藻糖,，使用糖化酶分解剩余麥芽糖為葡萄糖,，通過葡萄糖氧化酶法測(cè)定葡萄糖含量，按照麥芽糖減少的量表示海藻糖合酶活性,。

需自備的儀器和用品：

分光光度計(jì),、水浴鍋、可調(diào)式移液器,、1mL玻璃比色皿,、研缽、冰和蒸餾水,。
試劑的組成和配制
提取液一：液體50mL×1瓶,，4℃保存。
提取液二：液體50mL×1瓶,，4℃保存,。
試劑一：粉劑×1瓶，-20℃保存,；臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用,，用不完的試劑4℃保存；
試劑二：液體18μL×1瓶,，4℃保存,；臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用，用不完的試劑4℃保存,；
試劑三：粉劑×1瓶,，-20℃保存；臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,，用不完的試劑4℃保存,；
試劑四：液體50mL×1瓶， 4℃保存,；
測(cè)定步驟
1,、 分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至340nm,，蒸餾水調(diào)零,。
2、 將試劑一,、二、三37℃(哺乳動(dòng)物)或25℃(其它物種)預(yù)熱10分鐘,。
3,、 加樣表：

樣本的前處理
①總FBP酶提取：建議稱取約0.1g樣本,，加入1mL提取液一,，冰浴勻漿后超聲破碎（冰浴,，200W，破碎3s,，間歇7s,，總時(shí)間1min），然后4℃,，8000g離心10min,，取上清測(cè)定。
②胞漿和葉綠體FBP酶的分離：按照植物組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5～10的比例（建議稱取約0.1g樣本,，加入1mL提取液一）,，冰浴勻漿后于4℃，200g離心5min,，棄沉淀,，取上清在4℃，8000g離心10min,，取上清用于測(cè)定胞漿FBP酶活性,，取沉淀加1mL提取液二，震蕩溶解后超聲破碎（冰浴,，200W,，破碎3s，間歇7s,，總時(shí)間1min）,，然后4℃，8000g離心10min,，取上清測(cè)定葉綠體中FBP酶活性,。
建議測(cè)定總FBP酶活性，按照步驟①提取粗酶液,，若需要分別測(cè)定胞漿和葉綠體中的FBP,，則按照步驟②提取粗酶液。
FBP活性計(jì)算：
（1）按樣本蛋白濃度計(jì)算
單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個(gè)酶活力單位,。
FBP（nmol/min/mg prot）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
（2）按樣本鮮重計(jì)算
單位的定義：每g組織每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個(gè)酶活力單位,。
FBP（nmol/min/g 鮮重）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反總：反應(yīng)體系總體積，1×10-3 L,；ε：NADPH摩爾消光系數(shù),，6.22×103 L / mol /cm；d：比色皿光徑,，1cm,；V樣：加入樣本體積，0.1 mL,；V樣總：加入提取液體積,，1mL,；T：反應(yīng)時(shí)間，5 min,；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度,，mg/mL；W：樣本質(zhì)量,，g,。
DNA聚合酶δ催化亞單位/DNA pol δ cat抗體     乳鐵蛋白抗體

DNA聚合酶η抗體     乳酸脫氫酶抗體

DNA聚合酶γ/DNA pol γ抗體     乳酸脫氫酶D抗體

DNA聚合酶ι/DNA pol ι抗體     乳清蛋白α抗體

DNA聚合酶κ/DNA pol κ抗體     肉堿氧位甲基轉(zhuǎn)移酶抗體
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普通變形桿菌AS1.1527凍干粉南京便診   生孢梭菌   ATCC 19404
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