詳細介紹
商品介紹:
白蛋白由肝實質(zhì)細胞合成,,在血漿蛋白中含量最多,具有重要的生理功能,,包括維持膠體滲透壓,,并可與長鏈脂肪酸、膽汁酸,、膽紅素,、血紅素、鈣和鎂離子等物質(zhì)結合,。它擁有抗氧化性和抗凝血性,,能充當營養(yǎng)物質(zhì)和藥物的運輸載體,同時也是血漿PH值的緩沖劑,。血清白蛋白含量直接關系到肝臟疾病,、腎臟疾病、營養(yǎng)不良或蛋白流失性腸道病癥的發(fā)生發(fā)展,,是臨床檢測的一個重要指標,。
測定原理
白蛋白在pH4.2的緩沖液中帶正電荷,可與帶負電荷的染料溴甲酚綠結合形成藍綠色復合物,,在波長630nm處有吸收峰,,在一定范圍內(nèi)其顏色深淺與白蛋白濃度成正比例。
需自備的儀器和用品
可見分光光度計/酶標儀,、微量石英比色皿/96孔板,、蒸餾水。
產(chǎn)品名稱:白蛋白微量法測試盒
規(guī)格 : 100管/96樣
測試方法: 微量法
貨號:GOY-01S6963
分類:蛋白含量測定系列
試劑的組成和配制
提取液一:液體50mL×1瓶,,4℃保存,。
提取液二:液體50mL×1瓶,4℃保存,。
試劑一:粉劑×1瓶,,-20℃保存;臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用,,用不完的試劑4℃保存,;
試劑二:液體18μL×1瓶,,4℃保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,,用不完的試劑4℃保存,;
試劑三:粉劑×1瓶,-20℃保存,;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,,用不完的試劑4℃保存;
試劑四:液體50mL×1瓶,, 4℃保存,;
測定步驟
1、 分光光度計預熱30min以上,,調(diào)節(jié)波長至340nm,,蒸餾水調(diào)零。
2,、 將試劑一,、二、三37℃(哺乳動物)或25℃(其它物種)預熱10分鐘,。
3、 加樣表:
樣本的前處理
①總FBP酶提?。航ㄗh稱取約0.1g樣本,,加入1mL提取液一,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,,200W,,破碎3s,間歇7s,,總時間1min),,然后4℃,8000g離心10min,,取上清測定,。
②胞漿和葉綠體FBP酶的分離:按照植物組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一),,冰浴勻漿后于4℃,,200g離心5min,棄沉淀,,取上清在4℃,,8000g離心10min,取上清用于測定胞漿FBP酶活性,,取沉淀加1mL提取液二,,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,,200W,破碎3s,,間歇7s,,總時間1min),然后4℃,,8000g離心10min,,取上清測定葉綠體中FBP酶活性。
建議測定總FBP酶活性,,按照步驟①提取粗酶液,,若需要分別測定胞漿和葉綠體中的FBP,則按照步驟②提取粗酶液,。
FBP活性計算:
(1)按樣本蛋白濃度計算
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位,。
FBP(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計算
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位。
FBP(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反總:反應體系總體積,,1×10-3 L,;ε:NADPH摩爾消光系數(shù),6.22×103 L / mol /cm,;d:比色皿光徑,,1cm;V樣:加入樣本體積,,0.1 mL,;V樣總:加入提取液體積,1mL,;T:反應時間,,5 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,,mg/mL,;W:樣本質(zhì)量,g,。
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,,不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,,請仔細閱讀購買說明,!
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