培養(yǎng)操作：
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并 檢查細胞密度,。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng),。
1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次,。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分 變圓并脫落,，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,，棄去上清液,，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類,；
1. 細胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ,，細胞變圓 脫 落后,，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù),。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清,。加 1ml 血清重懸細胞,，根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻,，DMSO 終濃度為 10%,，細胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,，注意凍 存管做好標識,。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,，放入-80 度冰箱,，2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。

產品屬性：

名稱    臍帶間充質干細胞
2.組織來源：臍帶

3.產品規(guī)格：1×106cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

4.細胞簡介：

臍帶間充質干細胞是一種能分化成骨細胞,、脂肪細胞和軟骨細胞的多能干細胞。其具有強大的增殖能力,，且參與構成造血微環(huán)境,，因此被廣泛應用于組織工程，細胞治療和基因治療,。

Procell人臍帶間質干細胞取自健康足月分娩孕婦的臍帶,，其擁有強大的自我更新能力并具有多向分化潛能。

臍帶是哺乳類的連接胎兒和胎盤的管狀結構,。原來是由羊膜包卷著卵黃囊和尿膜的柄狀伸長部而形成的,。臍帶中通過尿膜的血管即臍動脈和臍靜脈，卵黃囊的血管即臍腸系膜動脈及臍腸系膜靜脈,。當卵黃囊及其血管退化,，臍動脈和臍靜脈就發(fā)達起來，在這些間隙中可以看到疏松的膠狀的間充質,。在子宮中,，子宮動脈在胎盤的母體部分出的毛細血管，與胎盤的子體部胎兒毛細血管靠近,，在此處母體和胎兒的血液間進行CO2和O2,，代謝產物即代謝廢物和營養(yǎng)物質的交換。臍動脈將胎兒來的廢物運送至胎盤,，臍靜脈將O2和營養(yǎng)物質從胎盤運送給胎兒,。后由子宮靜脈將來自胎兒的代謝廢物運走，某種激素和抗體等也通過臍帶從母體移交給胎兒,。臍帶中含有大量的干細胞,，干細胞是生命的種子，它會分化成機體的各種細胞,，結出各種不同的果實——血液細胞,、神經細胞,、骨骼細胞等。干細胞是具有自我更新,、高度增殖和多項分化潛能的細胞群體,；這些細胞可以通過分裂維持自身細胞的特性和數(shù)量，又可進一步分化為各種組織細胞,，從而在組織修復等方面發(fā)揮積極作用,。間充質干細胞(MSC)是一種具有高度自我更新和多向分化潛能的干細胞。在不同的誘導條件下,，可分化為多種造血細胞以外的組織細胞,，并具有造血支持、免疫調節(jié),、組織修復等作用,；目前，多用于風濕免疫疾病的治療,。間充質干細胞(MSCs)是一種具有自我更新和多向分化潛能的成體干細胞,，存在于骨髓、脂肪組織,、臍血及多種胎兒組織,。它可分泌多種細胞因子及生長因子，促進造血干細胞(HSC)的增殖與分化,。MSCs還具有免疫調節(jié),、抗炎和組織修復作用，可減輕移植物抗宿主病(GVHD)及其他移植相關并發(fā)癥,。

質量控制：

本產品經過了細菌,、真菌、霉菌,、支原體檢測,。

產品承諾：

人臍帶間質干細胞的體外培養(yǎng)周期有限；建議使用Procell配套的培養(yǎng)基和正確的培養(yǎng)方法來培養(yǎng),、傳代,，以此保證細胞具備良好的增殖和分化能力。

產品用途：

本產品只提供給進一步的科研使用,，不可應用于治療等其他方面,。

實驗報告：
產品僅用于科研一、分離與培養(yǎng)：
1,、無菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，后將成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s,，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液,，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復此步驟2-3次,，直至組織*被消化,；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,，1200r/min 離心10min,，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
5,、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基,，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；
二、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細胞生長至80%融合時,，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次,，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2,、PBS沖洗細胞2次,，每次10min，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3,、PBS沖洗細胞2次，每次10min,，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細胞30min；
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5,、PBS沖洗細胞3次,，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h,；
6、用PBS沖洗3次,，每次10min,，后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
細胞死亡調節(jié)蛋白抗體(凋亡,、半胱胺酸激活抑制劑)

軸蛋白1抗體

膜粘連蛋白A1抗體

β淀粉樣肽1-16/Aβ1-16 抗體

自噬相關蛋白1抗體
人γ-谷氨酰環(huán)化轉移酶(GGCT)elisa分析檢測試劑盒

人γ-半合成酶(γ-GCS)elisa分析檢測試劑盒

人γ干擾素誘導蛋白16/p16(IFI16/p16)elisa分析檢測試劑盒

人γ干擾素誘導單核細胞因子(MIG/CXCL9)elisa分析檢測試劑盒

人γ干擾素受體(IFN-γR)elisa分析檢測試劑盒
臍帶間充質干細胞小鼠分泌型磷脂酶A2(sPLA2)elisa檢測試劑盒免費代測

小鼠分泌型免疫球蛋白A(sIgA)elisa分析檢測試劑盒

小鼠分泌型免疫球蛋白A(sIgA)elisa檢測試劑盒

小鼠分泌型免疫球蛋白A（sIgA）elisa檢測試劑盒

小鼠分泌性白細胞抑制因子(SLPI)elisa檢測試劑盒

冷凍保存細胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存,。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大,，造成細胞大量死亡,，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些,。