184A1，人乳腺上皮細(xì)胞,，上海細(xì)胞庫(kù)    

“細(xì)胞空泡化”在細(xì)胞培養(yǎng)中也是一個(gè)常見(jiàn)問(wèn)題,，它的出現(xiàn)原因有多種，實(shí)驗(yàn)人員碰到往往會(huì)很頭疼,。

在文章中小編給大家列舉出了可能出現(xiàn)這種情況的原因,，方便大家進(jìn)行分析選擇解決的方法。

184A1,，人乳腺上皮細(xì)胞,，上海細(xì)胞庫(kù)   

可以引起細(xì)胞空泡化出現(xiàn)的原因有哪些那？

1）細(xì)胞老化

原代細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程中經(jīng)常出現(xiàn)這樣的情況,，是有些細(xì)胞處于終末分化狀態(tài),，不會(huì)再分裂，時(shí)間長(zhǎng)了就會(huì)空泡化而死亡,。

傳代細(xì)胞出現(xiàn)這種狀況比較少見(jiàn),，出現(xiàn)的原因一般都是因?yàn)榧?xì)胞傳代次數(shù)過(guò)多，老化嚴(yán)重。

2）PH值

培養(yǎng)液的PH值與細(xì)胞正常所需PH值差別太大,。

3）胰酶消化

 胰酶消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng),，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞狀態(tài)受損，有時(shí)也會(huì)出現(xiàn)這種情況,。除此之外,，還有一個(gè)大家容易忽略的問(wèn)題,在香港的一家科研機(jī)構(gòu)表明如果消化細(xì)胞吹打時(shí)力度過(guò)大，產(chǎn)生太多氣泡,，長(zhǎng)期存在也會(huì)出現(xiàn)這種現(xiàn)象,。

4）自噬

細(xì)胞缺乏營(yíng)養(yǎng)導(dǎo)致饑餓誘導(dǎo)形成自噬也會(huì)形成空泡化，但是這種空泡在光學(xué)顯微鏡下是看不到的,，只有在電鏡下才能觀察到,。

5）細(xì)胞代謝

在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，由于血清濃度不夠,、藥物作用,、外界刺激等情況下導(dǎo)致細(xì)胞代謝出現(xiàn)問(wèn)題，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激狀況下會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞空泡化的情況,。

6）污染

衣原體感染：一旦一些細(xì)胞出現(xiàn)空泡化,，繼續(xù)培養(yǎng)，空泡范圍會(huì)擴(kuò)大,，即使傳代后也如此,，出現(xiàn)這種情況，細(xì)胞基本無(wú)法挽救,。后來(lái)檢測(cè)發(fā)現(xiàn),，此種細(xì)胞存在衣原體的感染。

支原體污染：支原體污染在不嚴(yán)重的時(shí)候細(xì)胞是沒(méi)有什么明顯癥狀的,，而且也無(wú)法通過(guò)光學(xué)顯微鏡觀察到,，只有在嚴(yán)重的時(shí)候會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞狀態(tài)變差，出現(xiàn)細(xì)胞空泡化的現(xiàn)象,，細(xì)胞膜上也會(huì)出現(xiàn)小黑點(diǎn)附著,。

病毒污染：在文獻(xiàn)上也有說(shuō)病毒污染也會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)空泡化的情況。

遇到細(xì)胞空泡化我們應(yīng)該如何解決,？

1）如果是因?yàn)榧?xì)胞老化的原因,，可以通過(guò)復(fù)蘇代數(shù)靠前的細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)。

2）如果是培養(yǎng)液PH的問(wèn)題,，可以通過(guò)更換培養(yǎng)液調(diào)整到合適的PH值,，再進(jìn)行培養(yǎng)。

3）在傳代時(shí),，要選用合適濃度的胰酶和選取適當(dāng)?shù)南瘯r(shí)間進(jìn)行消化,，在操作時(shí)避免吹打太過(guò)用力出現(xiàn)太多氣泡,。

4）要保證細(xì)胞培養(yǎng)所需的營(yíng)養(yǎng)充足，可以通過(guò)增加血清濃度和在培養(yǎng)基中加入谷氨酰氨解決,。

5）盡量使用質(zhì)量好和渠道正規(guī)的胎牛血清,，因?yàn)檫@樣的血清營(yíng)養(yǎng)豐富且外源刺激因子少，可以有效的避免出現(xiàn)這類問(wèn)題,。

6）在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)要嚴(yán)格進(jìn)行無(wú)菌操作,，操作時(shí)要規(guī)范，減少污染的可能性,?？梢酝ㄟ^(guò)試劑盒檢測(cè)細(xì)胞是否污染，對(duì)于已經(jīng)污染的細(xì)胞滅菌后直接處理,，避免污染其他細(xì)胞,。

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