MONOMAC6，人急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞，上海細(xì)胞庫   

“細(xì)胞空泡化”在細(xì)胞培養(yǎng)中也是一個常見問題,，它的出現(xiàn)原因有多種,，實驗人員碰到往往會很頭疼。

在文章中小編給大家列舉出了可能出現(xiàn)這種情況的原因,，方便大家進(jìn)行分析選擇解決的方法,。

MONOMAC6，人急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞,，上海細(xì)胞庫

可以引起細(xì)胞空泡化出現(xiàn)的原因有哪些那,？

1）細(xì)胞老化

原代細(xì)胞培養(yǎng)的過程中經(jīng)常出現(xiàn)這樣的情況，是有些細(xì)胞處于終末分化狀態(tài),，不會再分裂,，時間長了就會空泡化而死亡。

傳代細(xì)胞出現(xiàn)這種狀況比較少見,，出現(xiàn)的原因一般都是因為細(xì)胞傳代次數(shù)過多,，老化嚴(yán)重。

2）PH值

培養(yǎng)液的PH值與細(xì)胞正常所需PH值差別太大,。

3）胰酶消化

 胰酶消化時間過長,，會導(dǎo)致細(xì)胞狀態(tài)受損，有時也會出現(xiàn)這種情況,。除此之外,，還有一個大家容易忽略的問題,在香港的一家科研機(jī)構(gòu)表明如果消化細(xì)胞吹打時力度過大，產(chǎn)生太多氣泡,，長期存在也會出現(xiàn)這種現(xiàn)象,。

4）自噬

細(xì)胞缺乏營養(yǎng)導(dǎo)致饑餓誘導(dǎo)形成自噬也會形成空泡化，但是這種空泡在光學(xué)顯微鏡下是看不到的,，只有在電鏡下才能觀察到,。

5）細(xì)胞代謝

在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，由于血清濃度不夠,、藥物作用,、外界刺激等情況下導(dǎo)致細(xì)胞代謝出現(xiàn)問題，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激狀況下會出現(xiàn)細(xì)胞空泡化的情況,。

6）污染

衣原體感染：一旦一些細(xì)胞出現(xiàn)空泡化,，繼續(xù)培養(yǎng)，空泡范圍會擴(kuò)大,，即使傳代后也如此,，出現(xiàn)這種情況，細(xì)胞基本無法挽救,。后來檢測發(fā)現(xiàn),，此種細(xì)胞存在衣原體的感染,。

支原體污染：支原體污染在不嚴(yán)重的時候細(xì)胞是沒有什么明顯癥狀的，而且也無法通過光學(xué)顯微鏡觀察到,，只有在嚴(yán)重的時候會導(dǎo)致細(xì)胞狀態(tài)變差,，出現(xiàn)細(xì)胞空泡化的現(xiàn)象，細(xì)胞膜上也會出現(xiàn)小黑點附著,。

MONOMAC6,，人急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞，上海細(xì)胞庫

MONOMAC6,，人急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞,，上海細(xì)胞庫

病毒污染：在文獻(xiàn)上也有說病毒污染也會導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)空泡化的情況。

遇到細(xì)胞空泡化我們應(yīng)該如何解決,？

1）如果是因為細(xì)胞老化的原因,，可以通過復(fù)蘇代數(shù)靠前的細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)。

2）如果是培養(yǎng)液PH的問題,，可以通過更換培養(yǎng)液調(diào)整到合適的PH值，再進(jìn)行培養(yǎng),。

3）在傳代時,，要選用合適濃度的胰酶和選取適當(dāng)?shù)南瘯r間進(jìn)行消化，在操作時避免吹打太過用力出現(xiàn)太多氣泡,。

4）要保證細(xì)胞培養(yǎng)所需的營養(yǎng)充足,，可以通過增加血清濃度和在培養(yǎng)基中加入谷氨酰氨解決。

5）盡量使用質(zhì)量好和渠道正規(guī)的胎牛血清,，因為這樣的血清營養(yǎng)豐富且外源刺激因子少,，可以有效的避免出現(xiàn)這類問題。

6）在細(xì)胞培養(yǎng)時要嚴(yán)格進(jìn)行無菌操作,，操作時要規(guī)范,，減少污染的可能性?？梢酝ㄟ^試劑盒檢測細(xì)胞是否污染,，對于已經(jīng)污染的細(xì)胞滅菌后直接處理，避免污染其他細(xì)胞,。

MONOMAC6,，人急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞，上海細(xì)胞庫

上海蒂科生物專注細(xì)胞培養(yǎng),，公司主營業(yè)務(wù)：胎牛血清（HAKATA,、HyClone、SERANA,、NTC,、Corning,、BOVOGEN、PAA,、PAN,、SIGMA等品牌），無外泌體血清(SBI),，ELISA試劑盒,，細(xì)胞（400多種類通過STR鑒定）包含大鼠、小鼠,、人,、貓、株,、兔子等種屬,，HAKATA和HyClone培養(yǎng)基（干粉、液體）,、雙抗,、胰酶，CST,，abcam,，sigma等品牌抗體，詳詢,。