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COV644細(xì)胞,,CPC-N細(xì)胞株的培養(yǎng)和傳代
產(chǎn)品名稱:COV644細(xì)胞
中文名稱:
貨號:COV644
規(guī)格:1~3*106細(xì)胞/25cm2培養(yǎng)瓶
上海蒂科生物 細(xì)胞株,、血清,、培養(yǎng)基,、 各種細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)試劑,,開學(xué)酬賓*中,更多產(chǎn)品,,更大優(yōu)惠,,敬請!,!
用于檢測細(xì)胞因子的細(xì)胞株通常培養(yǎng)于含10%小牛血清和抗生素的培養(yǎng)液中,,培養(yǎng)細(xì)胞因子依賴細(xì)胞株還有加入適量細(xì)胞因子。在37℃ 5% CO2的飽和水汽二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng),,3~4天傳代一次,。
懸浮生長細(xì)胞的傳代:
直接直接吸去或離心后吸去培養(yǎng)上清液,用新鮮培養(yǎng)液懸浮細(xì)胞,,1:3或1:5稀釋細(xì)胞后,,分瓶繼續(xù)培養(yǎng)。
帖壁生長細(xì)胞的傳代:
吸去培養(yǎng)液,用PBS洗滌細(xì)胞一次,,加入消化液,,在37℃中消化約3~10分鐘,待細(xì)胞開始脫落時,,倒去消化液,,加入新鮮培養(yǎng)液,懸浮和吹打分散細(xì)胞,。也可以待細(xì)胞*消化脫落,,500×g離心5分鐘,去除消化液,,用新鮮培養(yǎng)液懸浮細(xì)胞,。1:3或1:5稀釋細(xì)胞后,分瓶繼續(xù)培養(yǎng),。
2,、細(xì)胞株的凍存:
(1)取培養(yǎng)2~3天生長旺盛的細(xì)胞,用細(xì)胞培養(yǎng)液將細(xì)胞配成2×106~2×107/ml,。
(2)在1ml細(xì)胞凍存管中加入0.5ml細(xì)胞懸液,,0.4ml小牛血清和0.1ml二甲基亞砜(或甘油),混勻后密封,。置4℃ 1小時,,-20℃ 2小時,然后直接放入液氮中或置液氮蒸汽上隔日后浸入液氮中,。
3、細(xì)胞株的復(fù)蘇:
復(fù)蘇時,,從液氮中取出凍存管,,立即置37℃水浴中融化細(xì)胞。將細(xì)胞直接加入10ml含15%小牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)液中,,置37℃ 5%CO2飽和水汽二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。懸浮細(xì)胞待細(xì)胞全部沉降后小心吸去上清液,更換新鮮的上述培養(yǎng)液,,繼續(xù)培養(yǎng),;帖壁細(xì)胞則培養(yǎng)2~3實驗。
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