CML-T1細胞,，COLO 201細胞株收到貨的注意事項

規(guī)格：1~3*106細胞/25cm2培養(yǎng)瓶

上海蒂科生物 細胞株、血清,、培養(yǎng)基,、 各種細胞培養(yǎng)相關試劑，開學酬賓*中,，更多產品,，更大優(yōu)惠,，敬請?。?/span>

1. 收到細胞株包裹時，請檢查細胞株冷凍管是否有解凍情形,，若有請立即通知,。細胞株請盡速開始培養(yǎng)，或立即冷凍保存（置于-70 ℃,，隔夜后,，移到液氮）。

2. 冷凍細胞解凍程序：

2.1. 依據(jù)細胞株數(shù)據(jù)單之基礎培養(yǎng)基種類,、血清種類和其它之成份和比例,，制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細胞均無法立即適應不同之基礎培養(yǎng)基或不同之 血清種類,，若因實驗需要,，必須有所不同時，務必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,， 確定細胞適應后,，方進行所需之實驗。

2.2. FBS （fetal bovine serum,，胚牛血清）,，CS （calf serum，小牛血清）和HS （horse serum,，馬血清）,，對細胞而言差異極大，請務必依據(jù)細胞株資料單之血清種類培養(yǎng)之,。

2.3. 將培養(yǎng)基置于37 ℃ 水槽中回溫,，回溫后噴以70 % 酒精并擦拭之，移入無菌操作臺內,。取出冷凍管,，立即放入37 ℃ 水槽中快速解凍，水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿,，否則易發(fā)生污染,。輕搖冷凍管使其在1 分鐘內全部融化后，以70 % ethanol 擦拭冷凍管外部,， 移入無菌操作臺內,。

2.4. 依據(jù)細胞種類和濃度，于無菌操作臺內取10 ml 培養(yǎng)基加至T25 或T75 flask中,。取出已解凍之細胞懸浮液,，緩緩加入T25 或T75 flask 內之培養(yǎng)基，混合均勻,，放入37 ℃,，5 % CO₂ 培養(yǎng)箱培養(yǎng),。

2.5. 對絕大多數(shù)細胞而言，1 % 以下之冷凍保護劑DMSO,，不會對細胞之貼附或活 化有不良影響,，不需立刻由解凍細胞中去除， 待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可,。惟對極少數(shù)因對DMSO 敏感或會造成細胞分化之細胞,，需 立即去除DMSO 者， 則可將解凍后之細胞懸浮液放入5 - 10 ml 培養(yǎng)基中,，離心300 xg （約1000 rpm）,，5 分鐘，小心移去上清液,，加入適量新鮮培養(yǎng)基,，將細胞均勻混合后，轉移至培養(yǎng)瓶中,，再放入37 ℃,，5 % CO₂ 培養(yǎng)箱培養(yǎng)。收到T25 flask 細胞時,，處理方式為：

2.5.1. 于寄送過程中,，為避免起泡造成細胞脫落死亡，T25 flask 均加滿培養(yǎng)基,。請檢查flask 外觀,，并于顯微鏡下觀察細胞生長狀況和有無污染現(xiàn)象，若有任何問題,，不要打開蓋子,，請立即通知細胞實驗室。

2.5.2. 將原封之T25 flask 靜置于37 ℃,，5 % CO₂ 培養(yǎng)箱中,，使細胞回溫至37 ℃，并讓運送過程中少數(shù)脫落的細胞可再附著生長,。隔天后,，于無菌操作箱內取出flask 內之培養(yǎng)基，（取出之培養(yǎng)基可以再使用）,，僅留約5-10ml 培養(yǎng)基于flask 內,，依一般培養(yǎng)方式再將細胞置入培養(yǎng)箱中，或細胞已長滿盤,， 則將細胞做傳代培養(yǎng),。