CMK-11-5細(xì)胞,，CMK-86細(xì)胞株收到貨的注意事項(xiàng)

規(guī)格：1~3*106細(xì)胞/25cm2培養(yǎng)瓶

上海蒂科生物 細(xì)胞株、血清,、培養(yǎng)基,、 各種細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)試劑，開學(xué)酬賓*中,，更多產(chǎn)品，更大優(yōu)惠,，敬請(qǐng)?。?/span>

1. 收到細(xì)胞株包裹時(shí),，請(qǐng)檢查細(xì)胞株冷凍管是否有解凍情形,，若有請(qǐng)立即通知。細(xì)胞株請(qǐng)盡速開始培養(yǎng),，或立即冷凍保存（置于-70 ℃,，隔夜后，移到液氮）,。

2. 冷凍細(xì)胞解凍程序：

2.1. 依據(jù)細(xì)胞株數(shù)據(jù)單之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類,、血清種類和其它之成份和比例，制備培養(yǎng)基,。絕大多數(shù)之細(xì)胞均無法立即適應(yīng)不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之 血清種類,，若因?qū)嶒?yàn)需要，必須有所不同時(shí),，務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,， 確定細(xì)胞適應(yīng)后，方進(jìn)行所需之實(shí)驗(yàn),。

2.2. FBS （fetal bovine serum,，胚牛血清），CS （calf serum,，小牛血清）和HS （horse serum,，馬血清），對(duì)細(xì)胞而言差異極大,，請(qǐng)務(wù)必依據(jù)細(xì)胞株資料單之血清種類培養(yǎng)之,。

2.3. 將培養(yǎng)基置于37 ℃ 水槽中回溫，回溫后噴以70 % 酒精并擦拭之,，移入無菌操作臺(tái)內(nèi),。取出冷凍管,，立即放入37 ℃ 水槽中快速解凍，水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿,，否則易發(fā)生污染,。輕搖冷凍管使其在1 分鐘內(nèi)全部融化后，以70 % ethanol 擦拭冷凍管外部,， 移入無菌操作臺(tái)內(nèi),。

2.4. 依據(jù)細(xì)胞種類和濃度，于無菌操作臺(tái)內(nèi)取10 ml 培養(yǎng)基加至T25 或T75 flask中,。取出已解凍之細(xì)胞懸浮液,，緩緩加入T25 或T75 flask 內(nèi)之培養(yǎng)基，混合均勻,，放入37 ℃,，5 % CO₂ 培養(yǎng)箱培養(yǎng)。

2.5. 對(duì)絕大多數(shù)細(xì)胞而言,，1 % 以下之冷凍保護(hù)劑DMSO,，不會(huì)對(duì)細(xì)胞之貼附或活 化有不良影響，不需立刻由解凍細(xì)胞中去除,， 待第二天確定細(xì)胞生長或貼附良好后再去除即可,。惟對(duì)極少數(shù)因?qū)MSO 敏感或會(huì)造成細(xì)胞分化之細(xì)胞，需 立即去除DMSO 者,， 則可將解凍后之細(xì)胞懸浮液放入5 - 10 ml 培養(yǎng)基中,，離心300 xg （約1000 rpm），5 分鐘,，小心移去上清液,，加入適量新鮮培養(yǎng)基，將細(xì)胞均勻混合后,，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中,，再放入37 ℃，5 % CO₂ 培養(yǎng)箱培養(yǎng),。收到T25 flask 細(xì)胞時(shí),，處理方式為：

2.5.1. 于寄送過程中，為避免起泡造成細(xì)胞脫落死亡,，T25 flask 均加滿培養(yǎng)基,。請(qǐng)檢查flask 外觀，并于顯微鏡下觀察細(xì)胞生長狀況和有無污染現(xiàn)象,，若有任何問題,，不要打開蓋子，請(qǐng)立即通知細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室。

2.5.2. 將原封之T25 flask 靜置于37 ℃,，5 % CO₂ 培養(yǎng)箱中,，使細(xì)胞回溫至37 ℃，并讓運(yùn)送過程中少數(shù)脫落的細(xì)胞可再附著生長,。隔天后,，于無菌操作箱內(nèi)取出flask 內(nèi)之培養(yǎng)基，（取出之培養(yǎng)基可以再使用）,，僅留約5-10ml 培養(yǎng)基于flask 內(nèi),，依一般培養(yǎng)方式再將細(xì)胞置入培養(yǎng)箱中，或細(xì)胞已長滿盤,， 則將細(xì)胞做傳代培養(yǎng),。