elisa試劑盒實驗時為什么需要保溫?因為ELISA屬固相免疫測定,，抗原,、抗體的結合只在固相表面上發(fā)生,。以抗體包被的夾心法為例,，加入板孔中的標本,，其中的抗原并不是都有均等的和固相抗結合的機會,，只有最貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。這是一個逐步平衡的過程,，因此需經擴散才能達到反應的終點,。
在ELISA中一般有兩次抗原抗體反應，即加標本和加酶結合物后,。保溫的方式除有的ELISA儀器附有特制的電熱塊外,，一般均采用水浴,，可將ELISA板置于水浴箱中，ELISA板底應貼著水面,，使溫度迅速平衡,。為避免蒸發(fā)，板上應加蓋,，也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋板孔,，此時可讓反應板漂浮在水面上。
若用保溫箱,，ELISA試劑盒應放在濕盒內,，濕盒要選用傳熱性良好的材料如金屬等，在盒底墊濕的紗布,，最后將ELISA板放在濕紗布上,。濕盒應先放在保溫箱中預溫至規(guī)定的溫度，特別是在氣溫較低的時候更應如此,。無論是水浴還是濕盒溫育,，反應板均不宜疊放，以保證各板的溫度都能迅速平衡,。室溫溫育的反應,，操作時的室溫應嚴格限制在規(guī)定的范圍內，標準室溫溫度是指20～25℃,，但具體操作時可根據說明書的要求控制溫育,。
室溫溫育時，ELISA試劑盒只要平置于操作臺上即可,。應注意溫育的溫度和時間應按規(guī)定力求準確,。為保證這一點，一個人操作時,，一次不宜多于兩塊板同時測定,。