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血清主要作用:提供基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì):氨基酸、維生素,、無(wú)機(jī)物,、脂類物質(zhì)、核酸衍生物等,,是細(xì)胞生長(zhǎng)必須的物質(zhì),。
提供激素和各種生長(zhǎng)因子:胰島素、腎上腺皮質(zhì)激素(氫化可*松,、地塞米松),、類固醇激素(雌二醇、睪酮,、孕酮)等,。生長(zhǎng)因子如成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子、表皮生長(zhǎng)因子,、血小板生長(zhǎng)因子等,。
提供結(jié)合蛋白:結(jié)合蛋白作用是攜帶重要地低分子量物質(zhì),如白蛋白攜帶維生素,、脂肪,、以及激素等,轉(zhuǎn)鐵蛋白攜帶鐵,。結(jié)合蛋白在細(xì)胞代謝過(guò)程中起重要作用,。
提供促接觸和伸展因子使細(xì)胞貼壁免受機(jī)械損傷。
對(duì)培養(yǎng)中的細(xì)胞起到某些保護(hù)作用:有一些細(xì)胞,,如內(nèi)皮細(xì)胞,、骨髓樣細(xì)胞可以釋放蛋白酶,,血清中含有抗蛋白酶成分,起到中和作用,。這種作用是偶然發(fā)現(xiàn)的,,現(xiàn)在則有目的的使用血清來(lái)終止胰蛋白酶的消化作用。因?yàn)橐鹊鞍酌敢呀?jīng)被廣泛用于貼壁細(xì)胞的消化傳代,。血清蛋白形成了血清的粘度,,可以保護(hù)細(xì)胞免受機(jī)械損傷,特別是在懸浮培養(yǎng)攪拌時(shí),,粘度起到重要作用,。血清還含有一些微量元素和離子,他們?cè)诖x解毒中起重要作用,,如SeO3,硒等,。
細(xì)胞培養(yǎng)基既是培養(yǎng)細(xì)胞中供給細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)和促使細(xì)胞生殖增殖的基礎(chǔ)物質(zhì),也是培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)和繁殖的生存環(huán)境,。
細(xì)胞培養(yǎng)基的成份基本介紹
動(dòng)物血清成分復(fù)雜,,各種生物大小分子混合在一起,有些成分至今尚未搞清楚,。血清對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)很有效,,但后期對(duì)培養(yǎng)產(chǎn)物的分離、提純以及檢測(cè)造會(huì)成一定困難,。另外高質(zhì)量的動(dòng)物血清來(lái)源有限,,成本高,限制了它的大量使用,。
常用的動(dòng)物血清主要有牛血清和馬血清,。牛血清分為胎牛血清和犢牛血清,前者來(lái)源少,,價(jià)格高,;后者要求剛產(chǎn)下尚未哺乳的小牛,因?yàn)椴溉楹蟮男∨Q逯锌赡芎懈鼜?fù)雜的成分,。血清中已知的成分主要有蛋白質(zhì),、氨基酸、葡萄糖,、激素等,。蛋白質(zhì)主要是白蛋白和球蛋白。
水解乳蛋白,、膠原是另外兩種較好的天然培養(yǎng)基成分,。水解乳蛋白是乳白蛋白的水解產(chǎn)物,呈蛋黃色粉末狀,,富含氨基酸,。一般配制成0.5%溶液,,微酸性。膠原是從動(dòng)物真皮中提取的,,具改善細(xì)胞表面特性促使其附著生長(zhǎng)的作用,。
氨基酸是細(xì)胞合成蛋白質(zhì)的基本成分,氨基酸中有12種是細(xì)胞本身不合成的,,必須由培養(yǎng)液提供,。激素有胰島素、生長(zhǎng)激素和多種生長(zhǎng)因子如表皮生長(zhǎng)因子,、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子,、增殖刺激因子(MSA)、類胰島素生長(zhǎng)因子(IGFl,、IGF2)等,。
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