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培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)減慢這種情況可能的原因包括:
1.由于更換了不同培養(yǎng)液或血清,,細(xì)胞需要重新適應(yīng)。
2.試劑保存不當(dāng),,培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長(zhǎng)必需成分如谷氨酰胺或生長(zhǎng)因子耗盡或缺乏或已被破壞,。
3.培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染。
4.接種細(xì)胞起始濃度太低,。
5.細(xì)胞已老化,。
6.支原體污染。
建議解決方法:
1.比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,,比較新血清與舊血清支持細(xì)胞生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn),。讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液,。
2換入新鮮配制培養(yǎng)液,,或補(bǔ)加谷氨酰胺及生長(zhǎng)因子,。
3.用無(wú)抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,,更換培養(yǎng)物,。
4.培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存。含血清培養(yǎng)液在2-8℃保存,,并在2周內(nèi)用完,。
5.增加接種細(xì)胞起始濃度。
6.換用新的保種細(xì)胞,。
7.隔離培養(yǎng)物,,檢測(cè)支原體。清潔支架和培養(yǎng)箱,。如發(fā)現(xiàn)支原體污染,,更換新的培養(yǎng)物。
培養(yǎng)細(xì)胞死亡的原因:
常見(jiàn)的可能原因是細(xì)胞傳代時(shí),,消化過(guò)度,,細(xì)胞嚴(yán)重受傷。如經(jīng)驗(yàn)不足,,細(xì)胞傳代消化時(shí),,在顯微鏡下觀察,至細(xì)胞變圓,、脫壁,,加入含血清的培養(yǎng)液,終止消化,。其他原因包括長(zhǎng)途運(yùn)輸,,細(xì)胞在不適宜的溫度下時(shí)間過(guò)長(zhǎng);培養(yǎng)液中營(yíng)養(yǎng)成分消耗殆盡,,沒(méi)有及時(shí)換液,。如果原來(lái)細(xì)胞狀態(tài)較好,換液后細(xì)胞死亡,,應(yīng)考慮是培養(yǎng)液及血清的質(zhì)量,。-好事先已證明培養(yǎng)液及血清質(zhì)量良好。
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