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細(xì)胞培養(yǎng)為何需要在CO2培養(yǎng)箱中?二氧化碳不僅是細(xì)胞生長(zhǎng)的必需成分,,還與維持培養(yǎng)液的pH有關(guān),。
細(xì)胞的體外培養(yǎng)需要理想的氣體環(huán)境,氧氣,、二氧化碳是細(xì)胞生存的必要條件,。氧氣參與細(xì)胞的三羧酸循環(huán),為細(xì)胞生存,、代謝與合成提供能量,;二氧化碳既是細(xì)胞的代謝產(chǎn)物,是細(xì)胞生長(zhǎng)的必需成分,又與維持培養(yǎng)液的pH有關(guān),。大多數(shù)細(xì)胞適宜的pH范圍往往是7.2~7.4,。在開放式培養(yǎng)中,以5%的二氧化碳?xì)怏w比例為宜,。
細(xì)胞污染的預(yù)防
①實(shí)驗(yàn)用品防止污染,。細(xì)胞培養(yǎng)所用試劑、耗材,、器材的清洗,、消毒要che底,各種溶液滅菌要仔細(xì),,并在無菌實(shí)驗(yàn)檢測(cè)陰性后才能使用。操作室及剩余的無菌器材要定期清潔,、消毒,、滅菌。
②操作過程防止污染,。
③穿著容易起靜電或吸附灰塵的衣物必須更換為白大褂后才能進(jìn)入細(xì)胞間,。
④實(shí)驗(yàn)開始前需要確定戴的手套沒有問題,只要接觸過生物安全柜之外的物品,,必須及時(shí)對(duì)手套進(jìn)行消毒,。
⑤不要從敞開的容器口上方經(jīng)過,以避免衣服上掉落不明物體對(duì)細(xì)胞的污染,。
⑥細(xì)胞操作時(shí)動(dòng)作要輕,,必須在火焰周圍無菌區(qū)內(nèi)打開瓶口,并將瓶口放在火焰周圍簡(jiǎn)單轉(zhuǎn)動(dòng)燒灼,,注意不要讓火焰把塑料瓶口燒化,。
⑦瓶蓋應(yīng)當(dāng)?shù)狗旁谶h(yuǎn)離自己的地方,以避免瓶蓋被誤操作所污染,。
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