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牛血清白蛋白(BSA)在生化實(shí)驗(yàn)中的用處,!

時(shí)間:2022-3-25閱讀:1789

牛血清白蛋白(BSA),,是牛血清中的一種球蛋白,包含607個(gè)氨基酸殘基,,分子量為66.446KDa,,等電點(diǎn)為4.7,。牛血清白蛋白在生化實(shí)驗(yàn)中有廣泛的應(yīng)用。

主要成分:
1.蛋白質(zhì)——是牛血清中主要成份,。除包括可攜帶金屬離子,、脂肪酸和自身是激素類(lèi)蛋白外主要還有白蛋白,,球蛋白,。
2.多肽——血小板促生長(zhǎng)因子能促細(xì)胞分裂,是多肽家庭的主要成員之一,,是主要的促細(xì)胞增殖因子;成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子,、表皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子,、神經(jīng)細(xì)胞生長(zhǎng)因子等,,血清中含量雖很少,但對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)也有一定作用,。
3.激素——胰島素:促進(jìn)細(xì)胞攝取葡萄糖和氨基酸,與促細(xì)胞分裂有關(guān),;類(lèi)胰島素生長(zhǎng)因子:能與細(xì)胞表達(dá)的胰島素受體結(jié)合,從而有胰島素同樣的作用,;促生長(zhǎng)激素:促細(xì)胞增殖效應(yīng)。
4.其他成份——氨基酸,、葡萄糖,、酮酸等對(duì)多種營(yíng)養(yǎng)成分的合成培養(yǎng)基意義不大,。與蛋白相結(jié)合狀態(tài)的微量元素對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)有意義,。

結(jié)構(gòu)與作用:
牛血清中的簡(jiǎn)單蛋白,是血液的主要成分(38g/1000ml),,分子量68kD。等電點(diǎn)4.8,。含氮量16%,,含糖量0.08%。僅含己糖和己糖胺,,含脂量只有0.2%。白蛋白由581個(gè)氨基酸殘基組成,,其中35個(gè)半胱氨酸組成17個(gè)二硫鍵,,在肽鏈的第34位有一自由巰基。白蛋白可與多種陽(yáng)離子,、陰離子和其他小分子物質(zhì)結(jié)合。血液中的白蛋白主要起維持滲透壓作用,、PH緩沖作用,、載體作用和營(yíng)養(yǎng)作用,。在動(dòng)物細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)中,添加白蛋白可起到生理和機(jī)械保護(hù)作用和載體作用,。牛血清白蛋白(BSA),,又稱(chēng)第五組分,是牛血清中的一種球蛋白,,包含583個(gè)氨基酸殘基,分子量為66.430 Da,,等電點(diǎn)為4.7,。牛血清白蛋白在生化實(shí)驗(yàn)中有廣泛的應(yīng)用,,例如在wesern blot中作為Blocking agent。

BSA一般做為穩(wěn)定劑被用于限制酶或者修飾酶的保存溶液和反應(yīng)液中,,因?yàn)橛行┟冈诘蜐舛认虏环€(wěn)定或活性低,。加入BSA后,,它可能起到“保護(hù)"或“載體"作用,不少酶類(lèi)添加 BSA后能使其活性大幅度提高,。不需要加BSA的酶加入BSA一般不會(huì)受到什么影響,。對(duì)多數(shù)底物DNA而言,BSA可以使酶切更*,,并可實(shí)現(xiàn)重復(fù)切割。在37℃,,酶切反應(yīng)超過(guò)1h時(shí),,BSA可以使酶更加穩(wěn)定,,因?yàn)樵诓缓珺SA的反應(yīng)緩沖液中,,許多限制性?xún)?nèi)切酶在37℃下只能存活10"20min甚至更短的時(shí)間。而B(niǎo)SA可以結(jié)合緩沖液或底物DNA中抑制限制性?xún)?nèi)切酶活性的金屬離子和其它化學(xué)物質(zhì),。

牛血清白蛋白(BSA)的用途如下:
1、用于生化研究,、遺傳工程和醫(yī)藥研究
2,、用作醫(yī)藥保健食品,、調(diào)味品
3、維持滲透壓,、pH緩沖,、載體作用
4、在PCR體系中有助于Taq酶的穩(wěn)定性及活性,,可以提高PCR的效率

應(yīng)用:
牛血清白蛋白(BSA)在生化實(shí)驗(yàn)中有廣泛的應(yīng)用, 例如在WB實(shí)驗(yàn)中加入BSA, 通過(guò)提高溶液中蛋白質(zhì)的濃度,對(duì)酶起保護(hù)作用,。防止酶的分解和非特異性吸附,能減輕有些酶的變性,,減輕不利環(huán)境因素如加熱,,表面張力及化學(xué)因素引起的變性的。

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