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當(dāng)前位置:上海仁捷生物科技有限公司>>公司動(dòng)態(tài)>>上海仁捷生物發(fā)布-豬(NGAL2)elisa檢測原理
豬中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白2(NGAL2)試劑盒(ELISA)試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA),。往預(yù)先包被豬中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白2(NGAL2)捕獲抗體的包被微孔中,,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品,、HRP標(biāo)記的檢測抗體,,經(jīng)過溫育并*洗滌,。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的豬中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白2(NGAL2)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),,計(jì)算樣品濃度,。
試劑盒組成:
名稱 | 96孔配置 | 48孔配置 | 備注 |
微孔酶標(biāo)板 | 8孔×12條 | 8孔×6條 | 無 |
標(biāo)準(zhǔn)品 | 0.3mL*6管 | 0.3mL*6管 | 無 |
樣本稀釋液 | 6mL | 3mL | 無 |
檢測抗體-HRP | 10mL | 5mL | 無 |
20×洗滌緩沖液 | 25mL | 15mL | 按說明書進(jìn)行稀釋 |
底物A | 6mL | 3mL | 無 |
底物B | 6mL | 3mL | 無 |
終止液 | 6mL | 3mL | 無 |
封板膜 | 2張 | 2張 | 無 |
說明書 | 1份 | 1份 | 無 |
自封袋 | 1個(gè) | 1個(gè) | 無 |
備注:
1. 標(biāo)準(zhǔn)品濃度依次為:240、120,、60,、30、15,、7.5 pg/mL
2. 經(jīng)過大量正常標(biāo)本檢驗(yàn),,標(biāo)本的正常濃度值均在試劑盒提供的檢測范圍內(nèi),實(shí)驗(yàn)過程中直接取50μL樣本上樣即可,。當(dāng)有部分樣本值超過zui大標(biāo)準(zhǔn)品濃度時(shí),,可用樣本稀釋液將標(biāo)本進(jìn)行適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算
以所測標(biāo)準(zhǔn)品的OD值為橫坐標(biāo),,標(biāo)準(zhǔn)品的濃度值為縱坐標(biāo),,在坐標(biāo)紙上或用相關(guān)軟件繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,并得到直線回歸方程,,將樣品的OD值代入方程,,計(jì)算出樣品的濃度。(例如下圖)
試劑盒性能
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