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上海仁捷生物科技有限公司

上海仁捷生物-豬 KL-6 ELISA試劑盒檢測方法

時間:2017-7-5閱讀:1671

豬Ⅱ型肺泡細(xì)胞表面抗原(KL-6)試劑盒(ELISA)

操作步驟

  1.   從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
  2.   設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
  3.   樣本孔待測樣本50μL,;空白孔不加。
  4.   除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min,。
  5.   棄去液體,,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL,,靜置1min,,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板),。
  6.   每孔加入底物A、B各50μL,,37℃避光孵育15min,。
  7.   每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),,在450nm波長處測定各孔的OD值,。

 

實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算

所測標(biāo)準(zhǔn)品的OD值為橫坐標(biāo),標(biāo)準(zhǔn)品的濃度值為縱坐標(biāo),,在坐標(biāo)紙上或用相關(guān)軟件繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,,并得到直線回歸方程,,將樣品的OD值代入方程,計(jì)算出樣品濃度,。

 

試劑盒性能

  •  檢測范圍25 IU/mL  800 IU/mL,。
  •  靈敏度:zui低檢測濃度小于1.0 IU/mL
  •  特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng),。
  •  重復(fù)性:板內(nèi)變異系數(shù)小于10% ,,板間變異系數(shù)小于15% 

試劑盒組成

 

名稱

96孔配置

48孔配置

備注

微孔酶標(biāo)板

8孔×12

8孔×6

標(biāo)準(zhǔn)品

0.3mL*6管

0.3mL*6管

樣本稀釋液

6mL

3mL

檢測抗體-HRP

10mL

5mL

20×洗滌緩沖液

25mL

15mL

按說明書進(jìn)行稀釋

底物A

6mL

3mL

底物B

6mL

3mL

終止液

6mL

3mL

封板膜

2張

2張

說明書

1份

1份

自封袋

1個

1個

1.  標(biāo)準(zhǔn)品濃度依次為:800,、400,、200、100,、50,、25 IU/mL

2.  經(jīng)過大量正常標(biāo)本檢驗(yàn),標(biāo)本的正常濃度值均在試劑盒提供的檢測范圍內(nèi),,實(shí)驗(yàn)過程中直接取50μL樣本上樣即可,。當(dāng)有部分樣本值超過zui大標(biāo)準(zhǔn)品濃度時,可用樣本稀釋液將標(biāo)本進(jìn)行適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行實(shí)驗(yàn),。

 

本試劑盒用于體外定量檢測血清,、血漿、組織勻漿及相關(guān)液體樣本豬Ⅱ型肺泡細(xì)胞表面抗原KL-6)的含量,。

有效期:6個月

保存條件:2-8℃

 

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