一.儀器

  液相色譜儀,；

二.試劑

  混合標(biāo)準(zhǔn)溶液：分別吸取1.0mg/mL土霉素,、四環(huán)素的0.01mol/L鹽酸溶液各1mL,，1.0mg/mL金霉素水溶液2mL,，置于10mL容量瓶中,，加蒸餾水至刻度,。此溶液每毫升含土霉素、四霉素,、金霉素各0.1mg,，臨時現(xiàn)配。

三.實驗步驟

 （1）色譜條件

  ① 檢測器：紫外檢測器，波長為355nm,，靈敏度為0.002AUFS,。

  ② 色譜柱：ODS--C₁₈5_μm，6.2mm×15cm,。

  ③ 流動相：乙腈/0.01mol/L磷酸二氫鈉溶液（用30%硝酸溶液調(diào)節(jié)pH至2.5,；35:65，體積比）,。

  ④ 溫度：柱溫為室溫,。

  ⑤ 流速：1mL/min，進(jìn)樣量為10μL,。

 （2）樣品測定   吸取25mL鮮牛乳或其他均漿樣品,，置于250mL分液漏斗中，加入75mL乙酸乙酯振蕩1h,，或在超聲浴上振搖30min,，取出一半乙酸乙酯萃取液（37.5mL），于減壓下蒸干,。蒸干后的殘留物分別二次用5mL乙腈溶解,，移入30mL分液漏斗，再分別二次用3mL異辛烷萃取,，除去乙腈溶解液中的類脂物,，將乙腈液濃縮近干，并分別二次用1mL乙酸乙酯把蒸干物轉(zhuǎn)移到3mL聚四氟乙烯三角瓶內(nèi),。經(jīng)氮氣流濃縮,，濃縮后用0.2mL氯fang溶解。再加入0.2mL丙二醇-水（50:50,，體積比）混合液,，用旋轉(zhuǎn)攪拌器混勻，靜置,，zui后用上層醇相進(jìn)行色譜分析,。