壽命
色譜柱壽命不理想的問題一直困擾著眾多實(shí)驗(yàn)室的小伙伴們,，針對各品牌色譜柱的壽命表現(xiàn)均低于它們的普遍壽命的情況,，不少小伙伴紛紛表示其玻璃心不堪色譜柱年輕即逝的打擊。對此,，月旭科技為您仔細(xì)研究了色譜柱的“長生不老”之術(shù),，解決色譜柱壽命不理想的問題，話不多說,，快跟隨小編腳步一起往下看吧,！
月旭科技將為您提供以下解決思路
01 di一步
自查：
1、是否使用同填料保護(hù)柱（相同品牌）,；
2,、流動相從配置到棄用在 12 小時以內(nèi)；
3,、流動相瓶子嚴(yán)格清洗干燥,，密封；
4,、濾頭濾膜材質(zhì)和品質(zhì)是否選擇錯,，注意查看是否使用后有溶解現(xiàn)象；
5,、使用廠家推薦的沖洗方式?jīng)_洗色譜柱,。
02 第二步
以上自查項(xiàng)目改善后均不能解決，則采取第二步：與廠家溝通,，建議寄回廠家進(jìn)行色譜柱“解剖”,，月旭科技擁有多年專業(yè)“解剖”各種問題色譜柱的經(jīng)驗(yàn)，為您總結(jié)出可能出現(xiàn)的原因如下：
原因一：色譜柱污染
可能出現(xiàn)的原因
1,、樣品組分吸附在色譜柱的前端
a,、可能是由于樣品在流動相中的溶解度低而沉淀出來的,；
b、樣品中有強(qiáng)保留物質(zhì)（與鍵合相極性相似的物質(zhì)）,；
c,、樣品或者流動相中與填料表面發(fā)生微弱的不可預(yù)知的化學(xué)反應(yīng)；
d,、樣品溶劑本身的pH值在色譜柱的耐受臨界值附近,，而且進(jìn)樣體積較大（內(nèi)徑4.6mm，上樣體積在 50μl 以上）,。
通常這樣的情況伴隨柱壓升高,；或者柱壓正常，一個色譜圖中出現(xiàn)有些峰形異常,，有些峰形正常的情況,。
解決方法
a、 盡量從根源上解決問題,，選擇合適的樣品前處理技術(shù),，去除掉強(qiáng)保留物質(zhì)，獲得更加“干凈”更加成分單一的樣品,；
b,、 使用保護(hù)柱，保護(hù)柱的選擇盡量與分析柱同等填料,，同等鍵合方法的保護(hù)柱,，如果使用不同品牌填料、不同裝填工藝的保護(hù)柱,，在分離能力和保護(hù)方面可能得不到ZH的效果,，也不要使用更大粒徑的保護(hù)柱，更大粒徑或者裝填較差的保護(hù)柱會因?yàn)樗姆逭箤捵饔枚鴮?dǎo)致分離能力下降,。
2,、流動相“臟”了
流動相在色譜柱中的使用量比樣品要大得多，不停的沖刷色譜柱,，如果流動相變質(zhì)或者有其他的污染物,，那對色譜柱的污染會比樣品更大，色譜柱對流動相反而是一種凈化,，而且在運(yùn)行梯度時,，還會出現(xiàn)鬼峰。
解決方法
a,、流動相配置后盡快使用,，多不超過 12 小時；
b、有機(jī)相和鹽相混合的流動相,，更容易導(dǎo)致鹽的析出,，盡量使用在線混合，且在運(yùn)行梯度時變化速率不宜太快,，避免鹽析出,；
c、用專業(yè)的經(jīng)過鈍化處理過的溶劑瓶裝流動相,，切忌不能使用塑料瓶,，做好密封，在更換流動相的時候同時更換試劑瓶,；
d,、水在接觸空氣或者離開制水設(shè)備以后會出現(xiàn)變質(zhì)，現(xiàn)用現(xiàn)制,，打開后盡快使用。
原因二 固定相損壞
由色譜條件的多方面作用而導(dǎo)致的固定相損壞,，是目前的色譜技術(shù)不能解決的一個問題,。一般情況下小基團(tuán)鍵合相更容易被水解而脫落，加快了鍵合相的脫落,。硅膠裸露以后暴露在流動相中,，增加了鹽等對硅膠骨架的攻擊，導(dǎo)致骨架變薄,，機(jī)械強(qiáng)度降低,，表現(xiàn)為柱頭塌陷。
可能出現(xiàn)的原因
a,、流動相中的鹽,，尤其是磷酸類的緩沖鹽，對硅膠的攻擊是較強(qiáng)的,；
b,、高柱溫，加快鹽運(yùn)動的速率,；
c,、高氧，流動相中未排除的氧,，會加快硅膠內(nèi)部鍵的斷裂,；
d、高pH（＞8）,，OH 根離子攻擊硅膠內(nèi)部的 Si-O-Si 鍵,，導(dǎo)致硅膠直接破碎；
e、低 pH（＜2）,，H 根離子攻擊硅膠表面的 Si-C 鍵,，鍵合相脫落以后，硅膠裸露出來,；
f,、高水，也是引起鍵合相水解硅膠裸露的重要誘因,。
解決方法
a,、使用鹽的時候，柱溫 ≤30℃,；
b,、鹽的濃度使用在 50mmol 以下；
c,、使用在線脫氣機(jī)或者超聲脫氣（10 分鐘,，時間太久會發(fā)熱導(dǎo)致流動相成分改變）；
d,、除了特殊標(biāo)注,，色譜柱的使用 pH 值在 2-8 之間，如果樣品溶解的 pH 較苛刻,，請使用保護(hù)柱來抵御 pH 所帶來的損傷,，并及時更換；
e,、不要把未標(biāo)注能耐受純水的色譜柱使用在水相大于 95% 的流動相條件下,。
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