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產(chǎn)品型號(hào)PD-Cog-1000
品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)生產(chǎn)商
所 在 地上海市
更新時(shí)間:2024-09-12 11:58:27瀏覽次數(shù):436次
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貨號(hào) | PD-Cog-1000 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,食品,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),制藥 |
主要用途 | 測(cè)蛋白濃度 |
Bradford Protein Assay Kit
貨號(hào):PD-Cog-1000
組分:1000毫升染色液一瓶,,5 mg/ml BSA四支。
保存:4度避光,,密封保存,,一年有效。
試劑盒原理:
在酸性環(huán)境中,,蛋白質(zhì)結(jié)合考馬斯亮藍(lán)G250染料,,導(dǎo)致染料的最大吸收發(fā)生位移,從紅棕色形式(最大吸收峰 465nm)轉(zhuǎn)化為藍(lán)色形式(最大吸收峰 610nm),。這兩種形式在 595nm 處光吸收差異最大,,因此 595nm 是測(cè)定考馬斯染料-蛋白復(fù)合物的藍(lán)色的最佳波長(zhǎng)?;诳捡R斯染料的蛋白質(zhì)檢測(cè)法中,,顏色的形成是與某些堿性氨基酸(主要是精氨酸、賴(lài)氨酸和組氨酸)有關(guān),,范德華力和疏水相互作用也影響染料-蛋白質(zhì)的結(jié)合,。結(jié)合到每個(gè)蛋白質(zhì)分子上的考馬斯染料分子數(shù)大致與蛋白所帶正電荷的數(shù)量成正比。游離氨基酸,、肽和低分子量蛋白質(zhì)不會(huì)與考馬斯染料試劑產(chǎn)生顏色,,肽或蛋白質(zhì)的分子量必須大于 3,000 道爾頓才能被檢出。
與BCA法和Lowry法相比,,Bradford法測(cè)定蛋白濃度不受絕大部分樣品中的化學(xué)物質(zhì)的影響,,尤其是還原試劑的影響,但是受去垢劑的影響較大,。常見(jiàn)物質(zhì)的兼容性參考兼容物列表,。
Bradford法蛋白定量試劑盒對(duì)BSA的檢測(cè)靈敏度可達(dá)到0.15 µg,檢測(cè)濃度上限可達(dá)到5 mg/ml以上,,主要受讀數(shù)所用儀器的檢測(cè)范圍限制,。不同蛋白由于氨基酸組成不同,與染料結(jié)合后的吸光值有差異,,線性范圍會(huì)有所變動(dòng),。由于染料與蛋白結(jié)合前后的吸收光譜有重疊,因此直接使用OD595(在595 nm的光吸收值)線性擬合,,得到的是一個(gè)直徑很大的曲線,,可近似看作直線,在蛋白的濃度跨度較大時(shí),,線性度下降,。使用OD595/OD470的比值(在595 nm和470 nm的光吸收值之比)能更好地?cái)M合反應(yīng)過(guò)程,得到的是一條直線,可在一定程度上提高檢測(cè)靈敏度,。
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