產(chǎn)品描述

LyGreen核酸染料是一種新型的的雙鏈DNA結(jié)合飽和熒光染料，是新一代用于HRM分析的熒光染料,，也可用于實(shí)時(shí)定量PCR（qPCR）,。該染料結(jié)構(gòu)上由兩個(gè)單體染料分子通過(guò)一個(gè)彈性臂連接成一個(gè)二聚體，在沒(méi)有DNA存在時(shí),，該結(jié)構(gòu)呈無(wú)熒光環(huán)狀結(jié)構(gòu),，一旦有DNA出現(xiàn)，則恢復(fù)隨機(jī)形態(tài)并與DNA結(jié)合發(fā)出強(qiáng)烈的綠色熒光,。
與市場(chǎng)上其他熒光染料如SYBR Green I 相比,，LyGreen具有如下優(yōu)點(diǎn)：（1）靈敏度高：在推薦濃度下使用時(shí)可以獲得比SYBR Green I 更強(qiáng)的信號(hào)（2）準(zhǔn)確：結(jié)合雙鏈DNA，變形時(shí)染料不遷移,，熒光信號(hào)準(zhǔn)確反映雙鏈DNA變化情況,。過(guò)量染料形成二聚體，而不游離,，使得LyGreen對(duì)PCR的抑制遠(yuǎn)小于SYBR Green I,，因此，使用LyGreen進(jìn)行的qPCR實(shí)驗(yàn)可以使用快速PCR步驟,。（3）穩(wěn)定性好：在正常的儲(chǔ)存,、操作和PCR過(guò)程中不會(huì)被破壞。在緩沖溶液中的染料可以安全的儲(chǔ)存在室溫或冰箱里,，也可以反復(fù)凍融,。（4）安全：細(xì)胞膜穿透性測(cè)試表明，LyGreen幾乎不能穿透細(xì)胞膜,。（5）兼容性：和SYBR Green I 光譜相似,，使用不同品牌qPCR儀器時(shí)不需改變光譜元件設(shè)置，也無(wú)需改變操作步驟,，qPCR完成后,，無(wú)需加入其它核酸染料便能直接在凝膠成像系統(tǒng)下觀察分析。（6）重復(fù)性好（如圖1）：特殊設(shè)計(jì)染料,，相同反應(yīng)體系下,，熒光信號(hào)釋放僅與雙鏈濃度有關(guān),，優(yōu)秀線性。
應(yīng)用實(shí)例

圖1. LyGreen染料用于綿羊FecB基因HRM分析.

HRM分析設(shè)備為L(zhǎng)ightCycler@480熒光定量PCR儀(德國(guó)羅氏)
訂購(gòu)信息

運(yùn)輸與保存
藍(lán)冰運(yùn)輸,。-20 oC干燥避光保存,，有效期12個(gè)月。
光學(xué)性質(zhì)
激發(fā)波長(zhǎng)= 497 nm
發(fā)射波長(zhǎng)= 520 nm
使用方法
PCR反應(yīng)的配制（50 μL）

注意事項(xiàng)

1. 本產(chǎn)品僅限于科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究使用,，不得用于臨床診斷、治療等領(lǐng)域,。

2. 請(qǐng)根據(jù)不同的儀器類(lèi)型,，不加入或加入合適濃度的參比染料ROX。該體系需根據(jù)所使用的Taq酶的不同進(jìn)行適當(dāng)優(yōu)化,。

3. 根據(jù)實(shí)驗(yàn)用量于冰上向無(wú)菌離心管中依次加入水,，Taq poLymerase buffer, dNTPs, MgCl₂, LyGreen, Taq poLymerase, and primers等配制qPCR反應(yīng)體系（1×Master mix）。

4. 將1×Master mix 適量分裝至無(wú)菌PCR管中,，并加入DNA (50 ng/反應(yīng)),。

5. 按照儀器類(lèi)型選擇合適的擴(kuò)增程序。

6. 做qPCR時(shí)注意設(shè)置陽(yáng)性和陰性對(duì)照,。

7. 為了您的安全和健康,，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。