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導(dǎo)讀

上一篇《《中國藥典》0512高效液相色譜法修訂公示稿梳理  梯度延遲體積應(yīng)對方案》介紹使用島津液相色譜儀截止環(huán)功能和調(diào)整梯度起點功能可以作為一種方式應(yīng)對方法開發(fā)時的系統(tǒng)與實際使用系統(tǒng)之間滯留體積的差異。本篇介紹在溶液制備中出現(xiàn)溶劑效應(yīng)問題如何解決,！

l                      溶劑效應(yīng)概念及對分析的影響

在公示稿“溶液制備”章節(jié)中,，提到為減少溶劑峰和色譜峰的畸變,，制備供試品溶液和參比物質(zhì)溶液可用流動相（或梯度起始比例流動相組成）作為溶劑,，這是首次在0512通則修訂公示中收載溶劑效應(yīng)解決方式,。

溶劑效應(yīng)：樣品注入色譜系統(tǒng)后,，兩端靠近流動相的目標(biāo)物逐漸擴散進入流動相,，中心區(qū)域目標(biāo)物仍溶在原溶劑中，目標(biāo)物進入色譜柱后,，流動相氛圍中的目標(biāo)物以正常速度被洗脫,，溶劑氛圍中的目標(biāo)物因強溶劑洗脫，移動速度快,，樣品在空間上開始分裂,，即樣品溶劑的洗脫強度強于流動相強度而導(dǎo)致的色譜峰展寬，分叉(嚴重時分裂)的現(xiàn)象,，另外在多個項目中我們發(fā)現(xiàn)可能會出現(xiàn)峰形前延,、肩峰等現(xiàn)象，而峰形較差會顯著影響定性和定量指標(biāo),。

在梯度洗脫中,，溶劑效應(yīng)對出峰較早的色譜峰影響更為明顯。溶劑效應(yīng)會影響峰形,，從而影響理論塔板數(shù),、分離度等,，應(yīng)盡可能改善該現(xiàn)象！

l                      溶劑效應(yīng)解決辦法

1. 使用初始流動相溶解待測樣品,，公示稿首次收載該方法,。

2. 減少進樣體積，需要注意靈敏度是否滿足標(biāo)準(zhǔn)要求,。

3. 增加柱前管路的體積,，需要改配置。

4. Co-injection（共同注入） 進樣功能,，軟件中可直接選擇該模式,，操作簡便。

l                      推薦儀器方案

l                      應(yīng)用案例

1,、《中國藥典》2020年版第一增補本 石淋通片【指紋圖譜】

《中國藥典》2020年版第一增補本中,，石淋通片增加了【指紋圖譜】和【含量測定】的項目。在進行對照品夏佛塔苷進樣過程中,，發(fā)現(xiàn)了較嚴重的溶劑效應(yīng),，可見以上對比圖。使用標(biāo)準(zhǔn)進樣方式,，由于溶劑效應(yīng)會導(dǎo)致峰分叉,，采用 Co-injection 進樣功能可有效解決此問題。

2,、《中國藥典》2020年版  2341第五法  藥材及飲片（植物類）中禁用農(nóng)藥多殘留測定法

禁用農(nóng)藥相關(guān)檢測標(biāo)準(zhǔn)實施已經(jīng)有三年,，島津技術(shù)團隊在走訪幾十家企業(yè)和藥檢了解到，在出峰較早的化合物存在明顯的溶劑效應(yīng)現(xiàn)象,，導(dǎo)致峰形出現(xiàn)分叉（嚴重時出現(xiàn)分裂）,、肩峰、峰展寬及峰前延等,，以上展示是國內(nèi)某藥品檢驗機構(gòu)使用島津Co-injection功能有效解決了殺蟲脒和久效磷峰形問題,。

3、《中國藥典》2020年版  2351第六法  多種真菌毒素測定法

島津技術(shù)團隊在復(fù)現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)中發(fā)現(xiàn)嘔吐毒素存在肩峰現(xiàn)象,，使用Co-injection功能有效改善了峰形,，并提升了響應(yīng)。

4,、杜仲配方顆粒國家藥品標(biāo)準(zhǔn)【含量測定】

杜仲配方顆粒標(biāo)準(zhǔn)起初要求理論塔板數(shù)按松脂醇二葡萄糖苷峰計算理論塔板數(shù)應(yīng)不低于10000,，在后續(xù)的修訂稿中修訂為不低于8000。島津技術(shù)團隊在走訪配方顆粒企業(yè)時,，客戶提到即使修訂為8000的要求,，對色譜柱選型要求還是很高，并且耐用性需要完善,，島津技術(shù)團隊與客戶共同尋找背后可能存在的原因和解決辦法,，最終發(fā)現(xiàn)兩種方案可以解決（Co-injection進樣功能或者優(yōu)化有機相比例為22%）,，兩種方案任選其一即可。

注：本文中所用數(shù)據(jù)均為島津?qū)嶒炇姨囟l件下的測試數(shù)據(jù),，結(jié)果可能隨實際情況變動

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