紫外可見分光光度計(jì)的應(yīng)用詳解
紫外可見分光光度計(jì)是什么?紫外可見分光光度計(jì)是各種涉及水和廢水分析領(lǐng)域的通用儀器,，可用于檢測的組分或成分有蛋白質(zhì)、賴氨酸,、葡萄糖,、維生素C、硝酸鹽,、亞硝酸鹽等,。
分子的紫外可見吸收光譜是由于分子中的某些基團(tuán)吸收了紫外可見輻射光后，發(fā)生了電子能級(jí)躍遷而產(chǎn)生的吸收光譜,。由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子,、原子和不同的分子空間結(jié)構(gòu)，其吸收光能量的情況也就不會(huì)相同,，因此，每種物質(zhì)就有其*的,、固定的吸收光譜曲線,，可根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長處的吸光度的高低判別或測定該物質(zhì)的含量，這就是分光光度定性和定量分析的基礎(chǔ),。
分光光度分析就是根據(jù)物質(zhì)的吸收光譜研究物質(zhì)的成分、結(jié)構(gòu)和物質(zhì)間相互作用的有效手段,。它是帶狀光譜,，反映了分子中某些基團(tuán)的信息?？梢杂脴?biāo)準(zhǔn)光圖譜再結(jié)合其它手段進(jìn)行定性分析,。
根據(jù)Lambert-Beer定律說明光的吸收與吸收層厚度成正比，比耳定律說明光的吸收與溶液濃度成正比;如果同時(shí)考慮吸收層厚度和溶液濃度對(duì)光吸收率的影響,，即得朗伯-比耳定律,。即A=εbc，(A為吸光度,，ε為摩爾吸光系數(shù),，b為液池厚度，c為溶液濃度)就可以對(duì)溶液進(jìn)行定量分析,。
將分析樣品和標(biāo)準(zhǔn)樣品以相同濃度配制在同一溶劑中,，在同一條件下分別測定紫外可見吸收光譜。若兩者是同一物質(zhì)，則兩者的光譜圖應(yīng)*一致,。如果沒有標(biāo)樣,，也可以和現(xiàn)成的標(biāo)準(zhǔn)譜圖對(duì)照進(jìn)行比較。這種方法要求儀器準(zhǔn)確,，精密度高,，且測定條件要相同。
實(shí)驗(yàn)證明,，不同的極性溶劑產(chǎn)生氫鍵的強(qiáng)度也不同,，這可以利用紫外光譜來判斷化合物在不同溶劑中氫鍵強(qiáng)度，以確定選擇哪一種溶劑,。
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