目錄:上海一研生物科技有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒>>土壤系列>> 土壤中性磷酸酶(SNP)生化檢測(cè)試劑盒
參考價(jià) | ¥300-¥5000 | /盒 |
參考價(jià):¥300 ~ ¥5000
更新時(shí)間:2024-11-23 20:04:08瀏覽次數(shù):1221評(píng)價(jià)
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100管/96樣 50管/48樣 |
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貨號(hào) | EY-01S1294 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
主要用途 | 僅用于科研 |
產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
土壤中性磷酸酶(SNP)生化檢測(cè)試劑盒 | 100管/96樣 50管/48樣 | EY-01S1294 |
測(cè)定意義:
土壤磷酸酶是催化土壤有機(jī)磷礦化的酶,,其活性的高低直接影響著土壤中有機(jī)磷的分解轉(zhuǎn)化及其生物有效性,是評(píng)價(jià)土壤磷素生物轉(zhuǎn)化方向與強(qiáng)度的指標(biāo),。磷酸酶活性受到土壤碳,、氮含量、有效磷含量和pH的顯著影響,,根據(jù)最適PH范圍,,一般把土壤磷酸酶分為中性、酸性和堿性三種類(lèi)型,。
測(cè)定原理:
中性環(huán)境中,,S-NP催化磷酸苯二鈉水解生成,通過(guò)測(cè)定酚的生成量即可計(jì)算出NP活性,。
自備儀器和用品:
紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀,、微量玻璃比色皿/96孔板、臺(tái)式離心機(jī),、37℃恒溫培養(yǎng)箱,、分析天平、可調(diào)式移液器,、冰,、蒸餾水、乙醇和甲苯,。
試劑一:液體×1瓶,,室溫保存。
試劑二:液體×1瓶,,4℃保存,。
試劑三:粉劑×2瓶,-20℃保存,。臨用前加入22mL試劑二,,現(xiàn)配現(xiàn)用。
試劑四:液體×1支,,4℃保存,。
1,、組織:按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱(chēng)取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進(jìn)行冰浴勻漿,。16000g,,4℃離心20min,取上清置冰上待測(cè),。
2,、細(xì)菌、真菌:按照細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1mL試劑一),,冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率300w,,超聲3秒,間隔7秒,,總時(shí)間3min),;16000g, 4℃離心20min,,取上清液置冰上待測(cè),。
3、血清等液體:直接測(cè)定,。
(1)按照蛋白濃度計(jì)算
活性單位定義:25℃中每毫克蛋白每分鐘氧化1nmol NADH 為1個(gè)酶活單位,。
ADH (nmol/min/mg prot) =(△A÷ε÷d×V反總×109) ÷(Cpr×V樣)÷T
=1608×△÷Cpr
(2)按照樣本質(zhì)量計(jì)算
活性單位定義:25℃中每克組織每分鐘氧化1nmol NADH 為1個(gè)酶活單位。
ADH (nmol/min/g鮮重) =(△A÷ε÷d×V反總×109) ÷(W×V樣÷V樣總)÷T
=1608×△A÷W
(3)按細(xì)胞數(shù)量計(jì)算
活性單位定義:25℃中每104個(gè)細(xì)胞每分鐘氧化1nmol NADH 為1個(gè)酶活單位,。
ADH (nmol/min/104cell) =(△A÷ε÷d×V反總×109)÷(細(xì)胞數(shù)量×V樣÷V樣總)÷T
=1608×△A ÷細(xì)胞數(shù)量
(4)按液體體積計(jì)算
活性單位定義:25℃中每毫升血清每分鐘氧化1nmol NADH 為1個(gè)酶活單位,。
ADH (nmol/min/mL) =(△A÷ε÷d×V反總×109) ÷V樣÷T
=1608×△A
ε:NADH摩爾消光系數(shù),6.22×103L/mol/cm,;d:比色皿光徑,1 cm,;V反總:反應(yīng)體系總體積,,1000μL=0.001 L;Cpr:上清液蛋白質(zhì)濃度,,mg/mL,;W:樣本質(zhì)量,g,;V樣:加入反應(yīng)體系中上清液體積,,100μL=0.1 mL;T:反應(yīng)時(shí)間,,1min,。
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