目錄:上海一研生物科技有限公司>>生化檢測試劑盒>>氮代謝系列>> 土壤硝態(tài)氮生化檢測試劑盒
| 參考價 | ￥360-￥700 |
參考價：￥360 ~ ￥700
100管/96樣 50管/48樣
| 100管/96樣 | 700元 | 30盒可售 |
| 50管/48樣 | 360元 | 30盒可售 |
更新時間：2024-11-21 21:42:22瀏覽次數(shù)：1250評價
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100管/96樣 50管/48樣 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | EY-01S1100 | 應用領域 | 生物產業(yè) |
| 主要用途 | 僅用于科研 |
商品屬性：
產品名稱：土壤硝態(tài)氮生化檢測試劑盒
規(guī)格：100管/96樣 50管/48樣
貨號 : EY-01S1100
測試方法:微量法 可見分光光度法
分類：氮代謝系列
商品詳情：
測定意義
硝態(tài)氮是指硝酸鹽中所含有的氮元素,，土壤中的有機物分解生成銨鹽，被氧化后變?yōu)橄鯌B(tài)氮,。土壤中硝態(tài)氮是高等植物吸收氮的主要形式之一,，其含量直接關系到作物的產量與品質。測定原理
在濃酸條件下,，NO3-與水楊酸反應,，生成硝基水楊酸，硝基水楊酸在堿性條件下（PH>12）呈黃色,，在一定范圍內,，其顏色深淺與含量成正比，可比色測定計算得硝態(tài)氮含量,。
自備實驗用品及儀器
蒸餾水,、天平、常溫離心機,、可見分光光度計/酶標儀,、微量石英比色皿/96孔板、振蕩儀,。
粗酶液提?。?br/>
1、組織：按照組織質量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織,，加入1mL試劑一）進行冰浴勻漿,。16000g，4℃離心20min，取上清置冰上待測,。
2,、細菌、真菌：按照細胞數(shù)量（104個）：試劑一體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細胞加入1mL試劑一）,，冰浴超聲波破碎細胞（功率300w,，超聲3秒，間隔7秒,，總時間3min）,；16000g， 4℃離心20min,，取上清液置冰上待測,。
3、血清等液體：直接測定,。
ADH測定操作：
1. 分光光度計預熱30 min,，調節(jié)波長到340 nm，蒸餾水調零,。
2. 試劑三在25℃水浴中保溫30 min,。
3. 在1mL石英比色皿中依次加入100μL樣本上清液、800μL試劑三和100μL試劑四,，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,，分別記錄15s和75s時吸光值，分別記為A1和A2,?！鰽測定管=A1-A2。
測定步驟：
1,、分光光度計預熱30min以上,，調節(jié)波長至340nm，蒸餾水調零,。
2,、將試劑二在37℃（哺乳動物）或25℃（其它物種）水浴10min以上。
3,、操作表：
試劑名稱（μL） | 測定孔 |
樣本 | 20 |
試劑二 | 760 |
試劑三 | 10 |
試劑四 | 10 |
將上述試劑按順序加入1 mL石英比色皿中,，混勻后立即在340 nm波長下記錄初始吸光度A1和反應1min后的吸光度A2，計算ΔA=A1-A2,。
注意：若A1-A2大于0.5,，需將樣本用提取液稀釋，使A1-A2小于0.5,，可提高檢測靈敏度,。計算公式中乘以相應稀釋倍數(shù),。
NAD-MDH活力單位的計算：
1、血清（漿）NAD-MDH活力的計算
單位的定義：每毫升血清（漿）每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個酶活力單位,。
NAD-MDH（nmol/min/mL）=[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷V樣÷T=6430×ΔA
2,、組織,、細菌或細胞中NAD-MDH活力的計算:
（1）按樣本蛋白濃度計算：
單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個酶活力單位,。
NAD-MDH（nmol/min/mg prot）=[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=6430×ΔA÷Cpr
（2）按樣本鮮重計算：
單位的定義：每g組織每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個酶活力單位。
NAD-MDH（nmol/min/g 鮮重）=[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷（W× V樣÷V樣總）÷T =6430×ΔA÷W
（3）按細菌或細胞密度計算：
單位的定義：每1萬個細菌或細胞每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個酶活力單位,。
NAD-MDH（nmol/min/104 cell）=[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷（2000×V樣÷V樣總）÷T=3.215×ΔA
V反總：反應體系總體積,，8×10-4 L；ε：NADH摩爾消光系數(shù),，6.22×103 L / mol /cm,；d：比色皿光徑，1cm,；V樣：加入樣本體積,，0.02mL；V樣總：加入提取液體積,，1 mL,；T：反應時間，1 min,；W：樣本質量,，g；Cpr：樣本蛋白質濃度,，mg/mL,；2000：細胞或細菌總數(shù)，2000萬,。
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