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目錄:上海一研生物科技有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒>>氨基酸代謝系列>> 賴氨酸(LYS)生化檢測(cè)試劑盒

賴氨酸(LYS)生化檢測(cè)試劑盒
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參考價(jià)550-1000
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

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規(guī)格

100管/96樣 50管/48樣

屬性

供貨周期:現(xiàn)貨 規(guī)格:100管/96樣 50管/48樣 貨號(hào):EY-01S1121 應(yīng)用領(lǐng)域:生物產(chǎn)業(yè) 主要用途:僅用于科研

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規(guī)格
100管/96樣1000元30盒可售
50管/48樣550元30盒可售

更新時(shí)間:2024-11-21 20:52:46瀏覽次數(shù):1094評(píng)價(jià)

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100管/96樣 50管/48樣
貨號(hào) EY-01S1121 應(yīng)用領(lǐng)域 生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅用于科研
賴氨酸(LYS)生化檢測(cè)試劑盒賴氨酸是人體必需氨基酸之一,,能促進(jìn)人體發(fā)育,、增強(qiáng)免疫功能,并有提高中樞神經(jīng)組織功能的作用,。賴氨酸為堿性必需氨基酸。由于谷物食品中的賴氨酸含量甚低,,且在加工過程中易被破壞而缺乏,,故稱為第一限制性氨基酸。

商品屬性:

產(chǎn)品名稱:賴氨酸(LYS)生化檢測(cè)試劑盒

規(guī)格:100/96 50/48 

貨號(hào) : EY-01S1121

測(cè)試方法:微量法 可見分光光度法  

分類:氨基酸代謝系列

商品詳情:

測(cè)定意義:

賴氨酸是人體必需氨基酸之一,,能促進(jìn)人體發(fā)育,、增強(qiáng)免疫功能,并有提高中樞神經(jīng)組織功能的作用,。賴氨酸為堿性必需氨基酸,。由于谷物食品中的賴氨酸含量甚低,且在加工過程中易被破壞而缺乏,,故稱為第一限制性氨基酸,。

測(cè)定原理:

蛋白質(zhì)中的賴氨酸具有一個(gè)游離的ε-NH2,它與茚三酮試劑反應(yīng)生成藍(lán)紫色物質(zhì),,其顏色的深淺在一定范圍內(nèi)與賴氨酸的含量成線性關(guān)系,。與賴氨酸的碳原子數(shù)目相同,而且僅有個(gè)游離氨基(ε-NH2),,所以通常用配制標(biāo)準(zhǔn)液,。

需自備的儀器和用品:

可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī),、可調(diào)式移液器,、微量石英比色皿/96孔板、研缽,、冰,、蒸餾水、水浴鍋,。

 

粗酶液提?。?br/>

1、組織:按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,,加入1mL試劑一)進(jìn)行冰浴勻漿,。16000g,4℃離心20min,取上清置冰上待測(cè),。

2,、細(xì)菌、真菌:按照細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)胞加入1mL試劑一),,冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率300w,,超聲3秒,間隔7秒,,總時(shí)間3min),;16000g, 4℃離心20min,,取上清液置冰上待測(cè),。

3、血清等液體:直接測(cè)定,。


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ADH測(cè)定操作:

1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min,,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到340 nm,蒸餾水調(diào)零,。

2. 試劑三在25℃水浴中保溫30 min,。

3. 在1mL石英比色皿中依次加入100μL樣本上清液、800μL試劑三和100μL試劑四,,迅速混勻后于340nm測(cè)定吸光值變化,,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,分別記為A1和A2,?!鰽測(cè)定管=A1-A2。

測(cè)定步驟:

1,、分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至340nm,蒸餾水調(diào)零,。

2,、將試劑二在37℃(哺乳動(dòng)物)或25℃(其它物種)水浴10min以上。

3,、操作表:

試劑名稱μL

測(cè)定孔

樣本

20

試劑二

760

試劑三

10

試劑四

10


將上述試劑按順序加入1 mL石英比色皿中,,混勻后立即在340 nm波長(zhǎng)下記錄初始吸光度A1和反應(yīng)1min后的吸光度A2,計(jì)算ΔA=A1-A2,。

注意:若A1-A2大于0.5,,需將樣本用提取液稀釋,使A1-A2小于0.5,,可提高檢測(cè)靈敏度,。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù),。

NAD-MDH活力單位的計(jì)算:

1、血清(漿)NAD-MDH活力的計(jì)算

單位的定義:每毫升血清(漿)每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個(gè)酶活力單位,。

NAD-MDH(nmol/min/mL)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷V樣÷T=6430×ΔA

2,、組織、細(xì)菌或細(xì)胞中NAD-MDH活力的計(jì)算:

(1)按樣本蛋白濃度計(jì)算:

單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個(gè)酶活力單位,。

NAD-MDH(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=6430×ΔA÷Cpr

(2)按樣本鮮重計(jì)算:

單位的定義:每g組織每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個(gè)酶活力單位,。

NAD-MDH(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W× V樣÷V樣總)÷T =6430×ΔA÷W

(3)按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算:

單位的定義:每1萬個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個(gè)酶活力單位。

NAD-MDH(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(2000×V樣÷V樣總)÷T=3.215×ΔA

V反總:反應(yīng)體系總體積,,8×10-4 L,;ε:NADH摩爾消光系數(shù),6.22×103 L / mol /cm,;d:比色皿光徑,,1cm;V樣:加入樣本體積,,0.02mL;V樣總:加入提取液體積,,1 mL,;T:反應(yīng)時(shí)間,1 min,;W:樣本質(zhì)量,,g;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,,mg/mL,;2000:細(xì)胞或細(xì)菌總數(shù),2000萬,。

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