目錄:上海一研生物科技有限公司>>生化檢測試劑盒>>氨基酸代謝系列>> 半胱氨酰亞砜裂解酶(CSL)生化檢測試劑盒
參考價 | ¥650-¥1200 |
參考價:¥650 ~ ¥1200
100管/48樣 50管/24樣
100管/48樣 | 1200元 | 30盒可售 |
50管/24樣 | 650元 | 30盒可售 |
更新時間:2024-11-21 20:39:39瀏覽次數:1497評價
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供貨周期 | 現貨 | 規(guī)格 | 100管/48樣 50管/24樣 |
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貨號 | EY-01S1115 | 應用領域 | 生物產業(yè) |
主要用途 | 僅用于科研 |
商品屬性:
產品名稱:半胱氨酰亞砜裂解酶(CSL)生化檢測試劑盒
規(guī)格:100管/48樣 50管/24樣
貨號 : EY-01S1115
測試方法:微量法 可見分光光度法
分類:氨基酸代謝系列
商品詳情:
測定意義
半胱氨酰亞砜裂解酶(CSL)廣泛存在于百合科蔥屬(如大蒜和洋蔥),十字花科蕓薹屬
(如卷心菜,,菜花,,西蘭花),以及豆科中的合金歡屬中,,并通常被稱為蒜氨酸酶(Alliinase),。香菇酸在γ-谷氨酰轉肽酶和半亞砜裂解酶的作用下轉化成香菇精,以及產生丙酮酸,、乙醛,、甲醛和NH3,。CSL是內源性甲醛生成的關鍵酶之一,測定CSL活性對于研究食品安全具有重要意義,。
測定原理
CSL催化S-甲基-L-半亞砜反應產生丙酮酸,,與2,4-苯肼反應,在堿性條件下顯棕紅色,,在510nm下有特征吸收峰,。
自備實驗用品及儀器
天平、研缽,、離心機,、酶標儀、96孔板,、恒溫水浴鍋,、蒸餾水。
粗酶液提?。?br/>
1,、組織:按照組織質量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進行冰浴勻漿,。16000g,,4℃離心20min,取上清置冰上待測,。
2,、細菌、真菌:按照細胞數量(104個):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1mL試劑一),,冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,,超聲3秒,間隔7秒,,總時間3min);16000g,, 4℃離心20min,,取上清液置冰上待測。
3,、血清等液體:直接測定,。
ADH測定操作:
1. 分光光度計預熱30 min,調節(jié)波長到340 nm,,蒸餾水調零,。
2. 試劑三在25℃水浴中保溫30 min。
3. 在1mL石英比色皿中依次加入100μL樣本上清液,、800μL試劑三和100μL試劑四,,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A1和A2,?!鰽測定管=A1-A2。
測定步驟:
1,、分光光度計預熱30min以上,,調節(jié)波長至340nm,蒸餾水調零,。
2,、將試劑二在37℃(哺乳動物)或25℃(其它物種)水浴10min以上。
3,、操作表:
試劑名稱(μL) | 測定孔 |
樣本 | 20 |
試劑二 | 760 |
試劑三 | 10 |
試劑四 | 10 |
將上述試劑按順序加入1 mL石英比色皿中,,混勻后立即在340 nm波長下記錄初始吸光度A1和反應1min后的吸光度A2,計算ΔA=A1-A2,。
注意:若A1-A2大于0.5,,需將樣本用提取液稀釋,使A1-A2小于0.5,,可提高檢測靈敏度,。計算公式中乘以相應稀釋倍數。
NAD-MDH活力單位的計算:
1,、血清(漿)NAD-MDH活力的計算
單位的定義:每毫升血清(漿)每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個酶活力單位,。
NAD-MDH(nmol/min/mL)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷V樣÷T=6430×ΔA
2、組織,、細菌或細胞中NAD-MDH活力的計算:
(1)按樣本蛋白濃度計算:
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個酶活力單位,。
NAD-MDH(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=6430×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計算:
單位的定義:每g組織每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個酶活力單位。
NAD-MDH(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W× V樣÷V樣總)÷T =6430×ΔA÷W
半胱氨酰亞砜裂解酶(CSL)生化檢測試劑盒(3)按細菌或細胞密度計算:
單位的定義:每1萬個細菌或細胞每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個酶活力單位,。
NAD-MDH(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(2000×V樣÷V樣總)÷T=3.215×ΔA
V反總:反應體系總體積,,8×10-4 L;ε:NADH摩爾消光系數,,6.22×103 L / mol /cm,;d:比色皿光徑,1cm,;V樣:加入樣本體積,,0.02mL;V樣總:加入提取液體積,,1 mL,;T:反應時間,1 min,;W:樣本質量,,g,;Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL,;2000:細胞或細菌總數,,2000萬。
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