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商品屬性：

產(chǎn)品名稱：土壤脂肪酶（SLPS)生化檢測試劑盒

規(guī)格：100管/96樣 50管/48樣 

貨號(hào) : EY-01S1319

測試方法:微量法　可見分光光度法　　

分類：土壤系列

商品詳情：

測定意義：

LPS又稱甘油酯水解酶，催化甘油三酯水解生成脂肪酸和甘油（或者甘油二酯和單酯）。LPS廣泛的存在于各種生物中,。

測定原理：

LPS催化油酯水解成脂肪酸，利用銅皂法測定脂肪酸生成速率,，即可計(jì)算LPS活性,。

自備儀器和用品：

研缽、臺(tái)式離心機(jī),、震蕩混勻器,、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板,、可調(diào)式移液槍,、甲苯80mL、冰和蒸餾水,。

ADH測定操作：

1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min,，調(diào)節(jié)波長到340 nm，蒸餾水調(diào)零,。

2. 試劑三在25℃水浴中保溫30 min,。

3. 在1mL石英比色皿中依次加入100μL樣本上清液、800μL試劑三和100μL試劑四,，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,，分別記錄15s和75s時(shí)吸光值，分別記為A1和A2,?！鰽測定管=A1-A2,。

測定步驟：

1、分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,，調(diào)節(jié)波長至340nm,，蒸餾水調(diào)零。

2,、將試劑二在37℃（哺乳動(dòng)物）或25℃（其它物種）水浴10min以上,。

3、操作表：

將上述試劑按順序加入1 mL石英比色皿中,，混勻后立即在340 nm波長下記錄初始吸光度A1和反應(yīng)1min后的吸光度A2,，計(jì)算ΔA=A1-A2。

注意：若A1-A2大于0.5,，需將樣本用提取液稀釋,，使A1-A2小于0.5，可提高檢測靈敏度,。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù),。

NAD-MDH活力單位的計(jì)算：

1、血清（漿）NAD-MDH活力的計(jì)算

單位的定義：每毫升血清（漿）每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個(gè)酶活力單位,。

NAD-MDH（nmol/min/mL）=[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷V樣÷T=6430×ΔA

2、組織,、細(xì)菌或細(xì)胞中NAD-MDH活力的計(jì)算:

（1）按樣本蛋白濃度計(jì)算：

單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個(gè)酶活力單位,。

NAD-MDH（nmol/min/mg prot）=[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=6430×ΔA÷Cpr

（2）按樣本鮮重計(jì)算：

單位的定義：每g組織每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個(gè)酶活力單位。

NAD-MDH（nmol/min/g 鮮重）=[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷（W× V樣÷V樣總）÷T =6430×ΔA÷W

（3）按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算：

單位的定義：每1萬個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個(gè)酶活力單位,。

NAD-MDH（nmol/min/104 cell）=[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷（2000×V樣÷V樣總）÷T=3.215×ΔA

V反總：反應(yīng)體系總體積,，8×10-4 L；ε：NADH摩爾消光系數(shù),，6.22×103 L / mol /cm,；d：比色皿光徑，1cm,；V樣：加入樣本體積,，0.02mL；V樣總：加入提取液體積,，1 mL,；T：反應(yīng)時(shí)間，1 min,；W：樣本質(zhì)量,，g；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度,，mg/mL,；2000：細(xì)胞或細(xì)菌總數(shù),，2000萬。

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