人真胰島素酶聯(lián)免疫試劑盒洗滌方法：
1. 自動洗板機：每孔加入洗滌液350μl,，注入與吸出間隔60秒,。洗板5次。
2. 手工洗板：甩盡孔內(nèi)液體,，在潔凈的吸水紙上拍干,，每孔加洗滌液350μl，浸泡1-2分鐘,，吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內(nèi)的液體,，在厚的吸水紙上拍干。洗板5次,。
實驗開始前,，各試劑均應(yīng)平衡至室溫,；試劑或樣品配制時,，均需充分混勻,，并盡量避免起泡。
1.加樣：分別設(shè)空白孔,、標準孔,、待測樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡,，加樣時將樣品加于酶標板底部,，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻,。給酶標板覆膜,，37℃孵育2小時。為保證實驗結(jié)果有效性,，每次實驗請使用新的標準品溶液,。
2.棄去液體，甩干,，每個孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分鐘內(nèi)配制),，酶標板加上覆膜，37℃溫育1小時,。
3.棄去孔內(nèi)液體,，甩干，洗板 3次,，每次浸泡1-2分鐘,，大約350μl /每孔，甩并在吸水紙上輕拍將孔內(nèi)液體拍干,。
干4.每孔加HRP Conjugate工作液(臨用前15分鐘內(nèi)配制)100μl,，加上覆膜，37℃溫育1小時,。
5.棄去孔內(nèi)液體,，甩干，洗板5次,，方法同步驟3,。
6.每孔加底物溶液100μl，酶標板加上覆膜37℃避光孵育15分鐘左右(根據(jù)實際顯色情況酌情縮短或延長,，但不可超過30分鐘,。當標準孔出現(xiàn)明顯梯度時，即可終止),。
7.每孔加終止液50μl,，終止反應(yīng),，此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同,。
8.立即用酶標儀在450nm波長測量各孔的光密度(OD值),。應(yīng)提前打開酶標儀電源，預熱儀器,，設(shè)置好檢測程序,。
9.實驗完畢后將未用完的試劑按規(guī)定的保存溫度放回冰箱保存至有效期結(jié)束。
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