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總前列腺特異抗原ELISA試劑盒?操作步驟

閱讀:830      發(fā)布時間:2021-10-12
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總前列腺特異抗原ELISA試劑盒操作步驟:

1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,,在di一,、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,,然后在di一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,,混勻,;然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,,再在第三,、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻,;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,,再在第五,、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻,;混勻后從第五,、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,,再在第七,、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七,、第八孔中分別取50μl加到第九,、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉,。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180 ng/L,,120 ng/L ,,60 ng/L,30 ng/,,15 ng/L),。

2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同),、待測樣品孔,。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍),。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,。

3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘,。

4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用,。

5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,,甩干,,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,,如此重復(fù)5次,,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,,空白孔除外,。

7. 溫育:操作同3。

8. 洗滌:操作同5,。

9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,,37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止:每孔加終止液50μl,,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

11. 測定:以空白空調(diào)零,,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值),。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘。

白細(xì)胞關(guān)聯(lián)免疫球蛋白樣受體2(LAIR2)重組蛋白

白細(xì)胞激活黏附因子(ALCAM)重組蛋白

白血病抑制因子(LIF)重組蛋白

白血病抑制因子受體(LIFR)重組蛋白

半胱氨酸蛋白酶抑制劑3(CST3)重組蛋白

半胱氨酸蛋白酶抑制劑A(CSTA)重組蛋白

半乳糖苷酶α(GLα)重組蛋白

半乳糖凝集素1(GAL1)重組蛋白

半乳糖凝集素14(GAL14)重組蛋白

半乳糖凝集素2(GAL2)重組蛋白

半乳糖凝集素3(GAL3)重組蛋白

半乳糖凝集素4(GAL4)重組蛋白

半乳糖凝集素7(GAL7)重組蛋白

半乳糖凝集素8(GAL8)重組蛋白

半乳糖凝集素9(GAL9)重組蛋白

半乳糖凝集素9B(GAL9B)重組蛋白

半乳糖凝集素9C(GAL9C)重組蛋白

胞外5'-核苷酸酶(NT5E)重組蛋白

胞外超氧化物歧化酶(SOD3)重組蛋白

苯酚磺基轉(zhuǎn)移酶(PST)重組蛋白

表面活性物質(zhì)關(guān)聯(lián)蛋白J(SPJ)重組蛋白

表皮生長因子(EGF)重組蛋白

表皮生長因子受體(EGFR)重組蛋白

丙氨酸氨肽酶(AAP)重組蛋白

丙酮酸激酶(PK)重組蛋白

丙酮酸脫氫酶α(PDHα)重組蛋白

丙酮酸脫氫酶磷酸酶(PDP)重組蛋白

波形蛋白(VIM)重組蛋白

玻連蛋白(VTN)重組蛋白

補(bǔ)體1抑制因子(C1INH)重組蛋白

補(bǔ)體成分1r(C1r)重組蛋白

補(bǔ)體成分2(C2)重組蛋白


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