轉(zhuǎn)基因大豆MON87705品系核酸檢測試劑盒反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物,、酶、dNTP,、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,,只要知道任何一段模板DNA序列,, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增,。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段,。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶,。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列,。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,,否則會形成引物二聚體,,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,,特別是最末及倒數(shù)第二個堿基,,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗,。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點,, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處,。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性,。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
蛋白激酶A2抗體
血管緊張素Ⅱ受體2抗體
ASH1蛋白抗體
芳香乙酰胺脫乙?;笜拥鞍?抗體
血管內(nèi)皮細胞遷移蛋白抗體
醛糖還原酶相關(guān)蛋白質(zhì)抗體
膽汁酸結(jié)合蛋白DDH2抗體
血管生成素樣蛋白3抗體
甘油酯激酶線粒體抗體
磷酸化內(nèi)收蛋白a1抗體
自噬體ATG16L2蛋白抗體
睪丸酸性磷酸酶抗體
酸性磷酸酶抗體
極光激酶A相互作用蛋白1抗體
載脂蛋白樣蛋白6抗體
凋亡相關(guān)蛋白TGFb信號抗體
A2LD1蛋白抗體
α1,4-N-乙酰葡糖胺轉(zhuǎn)移酶α4Gn-T抗體
芳香乙酰胺脫乙?;缚贵w
芳香乙酰胺脫乙酰基酶樣蛋白4抗體
氨基乙二酸半醛脫氫酶磷酸泛酰巰基乙胺轉(zhuǎn)移酶抗體
賴氨酸酮戊二酸還原酶抗體
錨蛋白重復(fù)域6抗體
精氨酸酶2抗體
醛固酮還原酶家族1成員C3抗體
促腎上腺皮質(zhì)激素受體
褐黑素相關(guān)蛋白ART抗體
腎上腺皮質(zhì)線粒體鐵氧還蛋白抗體
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